Исследования в области особоопасных инфекций

Продувание воздуха с углекислотой через среду (П. В. Павлов, Е. И. Нехотенова, 1957), насыщение воздуха термальных комнат озоном (В. П. Рябчикова, 1959), встряхивание культуры (А. Д. Боярйкая, 1949; Н. А. Крепышева, 1959), увеличение показателя поверхностно-объемных отношений в бульоне (U. Mueller, 1939; А. Бейлинсон, В. Геккер, 1943; В. Н. Шаровская, Р. Г. Мухутдинова, 1959; Ю. А. Хавкин с соавт., 1964) способствуют увеличению токсинообразования.

Более сильные дифтерийные токсины можно получить при глубинном культивировании дифтерийной культуры (Ю. А. Хавкин с соавт., 1965; Е. А. Ильницкая с соавт., 1965 и др.). Однако обезвреживание таких токсинов при добавлении формалина происходит более медленно (Ю. А. Хавкин с соавт., 1965; А. Н. Лобанова с соавт., 1973). Л. Б. Балаян (1959) показала возможность использования для гипериммунизации лошадей антигена, приготовленного реакторным методом.

В результате усовершенствования изготовления питательных сред качество токсина-анатоксина повышалось. Интересны данные, которые приводит Г. Рамон (1962) в отношении совершенствования производства анатоксина (таблица из книги Г. Рамона «Сорок лет исследовательской работы», 1962).

Таблица 14 Антигенные свойства анатоксина из токсинов, полученных на различных средах

Токсин, полученный на средах Антигенные свойства анатоксина, выраженные в единицах флокуляции
Ферментированный обессахаренный бульон Мартена (1898—1927) 8-10
Ферментированный бульон Мартена с глюкозой (1928) 12-15
Неферментированная среда с глюкозой (1929) 15-20
То же с глюкозой и уксуснокислым натрием
(1932)
25-30
То же с дрожжами (1934) 40
То же с дрожжами и мальтозой (1937) 40-60

В качестве антигена для гипериммунизации широко применяется анатоксин. Последний получается при детоксикации дифтерийного токсина 0,4% формалина при температуре 40° в течение 30 дней.

Для консервирования его используют фенол 0,25—0,3%. Однако Е. А. Ильницкая (1959) указывает, что последний травмирует антигенные и иммуногенные свойства анатоксина, в связи с чем она предлагает применять для этой цели мертиолят 1:10000.

Используется анатоксин, проверенный на безвредность, иммуногенность и антигенность.

Методика проверки безвредности, установленная еще G. Ramon (1925), заключается в подкожном введении по 5 мл анатоксина морским свинкам в Оба бока и наблюдении за ними не менее месяца, чтобы не пропустить поздних проявлений интоксикации, последние отмечались Н. И. Антоновым и С. П. Карповым (1937).

Иммуногенность проверяется на морских свинках, получивших по 5 мл анатоксина. Препарат иммуногенен, если на 30—40-й день после иммунизации предохраняет морских свинок от 30 Dim токсина.

М. В. Далин С соавт. (1969) использовали для проверки иммуногенности хомяков.

Для определения антигенных свойств анатоксина применяют реакцию флокуляции, предложенную G. Ramon (1924). Однако, по данным Н. Г. Фиш и М. В. Далина (1969), оценка антигенной активности дифтерийного анатоксина по единицам связывания дает более точные сведения об антигене, чем реакция флокуляции, хотя между ними и существует параллелизм (Л. А. Левченко, 1947). Реакция флокуляции анатоксина не всегда отражает его иммуногенные свойства (М. П. Изболинский, 1926; 1929; В. А. Крестовникова, А. И. Гороховникова, 1929; R. Prigge, W. Kolle, 1934; Е. Н. Левкович, О. С. Зан, 1936; Э. Ю. Ген, А. О. Фельдштейн, 1937; L. Greenberg, М. Robben, 1948; К. Т. Халяпи- на, 1954; С. В. Чеботарева, 1958; В. И. Изместьева, А. Д. Гаделева, 1965 и др.). Сравнение же антигенных по интенсивности антитоксинообразования и иммуногенных свойств анатоксинов, полученных на среде триптического переваривания с энтерокиназой и среде триптического переваривания Вагнер-Сахаровой, показало их равнозначность несмотря на различную по флокуляции активность (П. В. Павлов, А. Г. Леонова, 1961). Аналогичные данные приводит Н. Г. Фиш (1969), показавший коррелятивную зависимость между антитоксинсвязывающей активностью и иммуногенностью. И. Ф. Валдохина (1965) считает, что оценку качества анатоксина лучше проводить не по титру в Lf, а по иммуногенным свойствам путем однократной иммунизации морских свинок малыми дозами анатоксина с последующим определением его активности по LD50.

В настоящее время для оценки качества анатоксина учитывается комплекс свойств антигена.

Благодаря безвредности анатоксина животные хорошо переносят большие дозы его, мало изнашиваются, что дает возможность длительно эксплуатировать их (К. Халяпина, Ф. Баутц, 1925—1926).

Для гипериммунизации лошадей помимо анатоксина отдельные исследователи применяли смешанный антиген. Так, М. Ф. Видинский (1959) наблюдал хорошее антителообразование при использовании для иммунизации смеси равных частей токсина с анатоксином.

1  2  3  4  5  6  7  8  9  10  11  12  13  14  15  16  17  18  19  20  21  22  23  24  25  26  27  28  29  30  31  32  33  34  35  36  37  38  39  40  41  42  43  44  45  46  47  48  49  50  51  52  53  54  55  56  57  58  59  60  61  62  63  64  65  66  67  68  69  70  71  72  73  74  75  76  77  78  79  80  81  82  83  84  85  86  87  88  89  90  91  92  93  94  95  96  97  98  99  100  101  102  103  104  105  106  107  108  109  110  111  112  113  114  115  116  117  118  119  120  121  122  123  124  125  126  127  128  129  130  131  132  133  134  135  136  137  138  139  140  141  142  143  144  145  146  147  148  149  150  151  152  153  154  155  156  157  158  159  160  161  162  163  164  165  166  167  168  169  170  171  172  173  174  175  176  177  178  179  180  181  182  183  184  185  186  187  188  189  190  191  192  193  194  195  196  197  198  199  200  201  202