Исследования в области особоопасных инфекций

Рефрактерные животные и грундиммунизация

Титр сыворотки в реакции нейтрализации на белых мышах должен быть не ниже 1:500 при 100 ЛДБО. Интервалы между циклами определяются в зависимости от состояния лошади и в среднем колеблются от 14 до 20 дней. Если после 4-го цикла титр антител не достигает требуемого уровня, животное выбраковывают. Лошади-продуценты с высокими титрами антител (выше 1:500) после 6, 7 циклов иммунизации могут подвергаться только однократной ревакцинации путем подкожного введения 150 мл 10%-ной мозговой суспензии фиксированного вируса бешенства.

Из литературных данных хорошо известно, что не все животные, подвергнутые иммунизации, становятся полноценными продуцентами. Данное положение в равной степени распространяется и на животных-продуцентов антирабической сыворотки (P. Lepine, P. Atanasiu, 1967). Оно было подтверждено и в Томском институте вакцин и сывороток. Так, из 152 лошадей, поступивших за период с 1963 по 1967 год под антирабическую иммунизацию, было получено 75 продуцентов, или всего 49,3%. Остальные 77 лошадей оказались рефрактерными. Указанное положение послужило предпосылкой для Л. А. Стрельниковой (1970) применить грундиммунизацию. Наблюдения, выполненные на 39 лошадях 2 групп за 2—4 месяца до начала их цикловой эксплуатации позволила обеспечить выход от 95 до 100% продуцентов по сравнению с 46,1% в контрольной группе, не получавших предварительное грундирование, и значительно повысить специфическую активность сыворотки.

Первые наблюдения по получению очищенной антирабической сыворотки были проведены в 1945 г. К. Habel, который извлекал глобулины из иммунных сывороток кроликов: высаливанием их сернокислым аммонием с последующим водным диализом и методом пептического переваривания. Н. Koprowski с соавт. (1950) применили способ извлечения гамма-глобулина спиртовым методом. P. Devi с соавт. (1956) сравнили 4 метода очистки и концентрации, связанные с различным фракционированием сульфатом аммония и пришли к выводу, что наибольшей перспективностью обладает метод, основанный на 4-дневном диализе плазмы из целлофановых мешочков в холодную воду с последующим осаждением содержимого в изоэлектрической точке. Осадок разводится в двойном объеме дистиллированной водой, добавляется 0,2% крезола и 12 часов выдерживается на холоде. Надосадочная жидкость после центрифугирования нейтрализуется 20%-ной содой (pH 7,2) и добавляется равный объем сульфата аммония. Через час полученный осадок отжимается и диализируется. После чего изотоническим раствором NaCl pH доводится до 7,3 и проводится фильтрование через бумажную пульпу и фильтр Зейтца.

Первые исследования по изучению способов очистки и концентрации антирабической сыворотки были предприняты в 1955 г. М. А. Селимовым ссоавт. (1957), которые показали, что для фракционирования могут быть с одинаковым успехом использованы как метод фракционного осаждения сернокислым аммонием, так и метод спиртового осаждения на холоду. Последний обеспечивал получение более стандартного однородного препарата. Пептический перевар оказался непригодным. Позже метод спиртового осаждения на холоду с одинаковым успехом был использован рядом исследователей. При этом концентрация антител происходила в 3,7 раза (Н. И. Волавич, Е. Г. Гордиенко, Ф. М. Кац, М. А. Курилова, А. С. Хайкина, 1958; 1960), а в некоторых случаях и в 6—10 раз (Ф. Л. Миниович, 1962; В. И. Файн, М. Г. Каштанова, 1972).

1  2  3  4  5  6  7  8  9  10  11  12  13  14  15  16  17  18  19  20  21  22  23  24  25  26  27  28  29  30  31  32  33  34  35  36  37  38  39  40  41  42  43  44  45  46  47  48  49  50  51  52  53  54  55  56  57  58  59  60  61  62  63  64  65  66  67  68  69  70  71  72  73  74  75  76  77  78  79  80  81  82  83  84  85  86  87  88  89  90  91  92  93  94  95  96  97  98  99  100  101  102  103  104  105  106  107  108  109  110  111  112  113  114  115  116  117  118  119  120  121  122  123  124  125  126  127  128  129  130  131  132  133  134  135  136  137  138  139  140  141  142  143  144  145  146  147  148  149  150  151  152  153  154  155  156  157  158  159  160  161  162  163  164  165  166  167  168  169  170  171  172  173  174  175  176  177  178  179  180  181  182  183  184  185  186  187  188  189  190  191  192  193  194  195  196  197  198  199  200  201  202