Исследования в области особоопасных инфекций

Бактериологическая диагностика

В СССР примерно до 1956 г. бактериологическая диагностика дифтерии основывалась главным образом на изучении морфологических свойств возбудителя. Для посева пользовались средой Леффлера. Выделение чистой культуры и пробу на вирулентность проводили только в некоторых случаях, чаще всего при редких локализациях дифтерии. С 1959 г. производят обязательное выделение чистой культуры путем прямого посева материала на одну из трех теллуритовых сред (среда Клауберга II с лаковой кровью, теллуритом и глицериновой смесью, кровяной теллуритовый агар с дефибринированной кровью, сывороточно-теллуритовый агар) с последующей идентификацией культуры на основании изучения комплекса биологических признаков (токсигенность, отношение к сахарам и др.).

Этот метод примерно вдвое повышает высеваемость дифтерийных палочек по сравнению с посевом на свернутую сыворотку в пробирки (Н. Н. Костюкова и др., 1971, и др.).

Обязательное выделение чистой культуры знаменовало новый этап в изучении биологии С. diphtheriae, обитающих в носоглотке людей. Именно с этого года в СССР началось широкое изучение биологии дифтерийной палочки, появилась возможность дифференцировать выделяемые от больных и носителей токсигенные и нетоксигенные коринебактерии, началось углубленное изучение эпидемиологии процесса бактерионосительства С. diphtheriae.

По РСФСР количество подтвержденных бактериологически диагнозов дифтерии поднялось с 55,8% в 1959 г. до 79,9% в 1967 г. В последующем большинство исследователей, убедившись в преимуществах прямого посева на дифференциально-диагностические полуэклективные кровяно- или сывороточно-теллуритовые среды, отказались от посева на среду Леффлера. При посеве на чашки увеличивается площадь посева, угнетается рост сопутствующей микрофлоры, что создает благоприятные условия для роста дифтерийной палочки.

Следовательно, повышается выееваемость, значительно сокращаются сроки выделения чистой культуры для дальнейшей идентификации и определения токсигенности и ответ можно получить в сроки до 48 ч вместо прежних 72— 96 ч. Уменьшается объем работы, так как отпадает необходимость изготовления, окраски и микроскопии сотен мазков. Уже просмотр колоний на чашках позволяет отбросить большинство отрицательных анализов.

В СССР в связи с использованием отечественных материалов теллуритовые среды модифицированы. Для среды Клауберга II гемолизированную кровь получают путем вымывания гемоглобина из идущих в отходы сгустков крови человека (плацентарной или другой) (Н. Н. Костюкова, Г. Г. Ежова 1966).

Многие исследователи используют кровянотеллуритовый 2—2,5% мартеновский агар с добавлением 5— 10% крови и 0,02% теллурита калия.

В. Б. Садыгава (1963) модифицировала cpeду Тинсдаля (1947). К 100 мл расплавленного, а затем остуженного сухого питательного агара последовательно стерильно добавляют 20 мл нормальной лошадиной сыворотки, 1,2% цистина, 1,8 мл 2% раствора теллурита калия, 1,8 мл 2,5% раствора гипосульфита натрия. Эти ингредиенты разводят в стерильной дистиллированной воде.

1   2   3   4   5   6   7   8   9   10   11   12   13   14   15   16   17   18   19   20   21   22   23   24   25   26   27   28   29   30   31   32   33   34   35   36   37   38   39   40   41   42   43   44   45   46   47   48   49   50   51   52   53   54   55   56