Пирогенность сывороток
В Томском институте вакцин и сывороток С. М. Прегер (1961) была проверена пирогенность сывороток на всех этапах очистки и концентрации. Анализу подверглась нативная сыворотка, дистиллированная вода, применяемая для разведения белка до 3%, фильтрат после отделения балластных белков, лечебный белок перед диализом и после слива из диализа, водопроводная вода из ванн, в которых проводят диализ, и вода из водопровода. Было подтверждено, что пирогенные свойства возникают в основном на этапе диализа. Проверка водопроводной воды из ванн и из крана выявила ее пирогенность, что указывает на возможность возникновения пирогена не только как результата микробного обсеменения сывороток.
Пирогенность в сыворотках также возникает в результате накопления в них при очистке полипептидов, которые вызывают у кроликов при внутривенном введении повышение температуры (М. А. Торбан, 1957, 1967).
Проверка содержания полипептидов в 32 сериях, очищенных методом Диаферм-3, в том числе 17 пирогенных, показала, что если в апирогенных сыворотках полипептидов содержится 612—1002 мг%, то в пирогенных — 1216 — 1876 мг% (С. М. Прегер, А. П. Дутова, 1961).
Для очистки сывороток от пирогена были испробованы различные методы.
В Ставропольском институте вакцин и сывороток был применен жидкий гель гидроокиси алюминия — гидроксал Казанского фармзавода (Ф. Т. Панин с соавт., 1956). И. Теодорович с соавт. (1958) предложили для удаления пирогена гидроокись магния, хорошие результаты получены при применении гидроокиси алюминия. Ю. Б. Лукин с соавт. (1958) применили для освобождения от пирогена простерилизованный размельченный асбест, А. Н. Никольский и М. Н. Ленц (1959) — выдерживание пирогенных сывороток при 36—37° в течение 60 суток, С. М. Прегер, А. Г. Дутова, Н. Г. Турлянцева (1960) — переконцентрацию сывороток.
Позднее способы очистки сыворотки от пирогена уточнялись, предлагались новые методы.
Так, С. М. Прегер, Н. Г. Турлянцевой, А. П. Дутовой (1960) было показано, что на эффективность очистки сывороток от пирогена оказывает влияние качество применяемой гидроокиси алюминия. Лучшие результаты дает очистка гелем, приготовленным из алюминия высокой чистоты, который прибавляется к сыворотке в количестве 0,3—0,5% в виде стерильной суспензии.
С. Н. Киняпин с соавт. (1965) рекомендует применять суспензию геля гидроокиси алюминия, приготовленную по методике Уфимского ИВС.
Хорошие результаты очистки сыворотки от пирогена дает свежеприготовленная суспензия фосфата кальция (В. П. Федорчук, 1965). Данный автор (1965) применила также для этой цели бентонитовые глины и гидроокись алюминия.
Было показано, что обработка сыворотки, очищенной методом Диаферм-3, гидратом окиси алюминия приводит к уменьшению процента белка, некоторому снижению антитоксина, увеличению степени очистки препарата в результате неспецифической адсорбции продуктов протеолиза (М. А. Торбан, 1963), снижению ее анафилактогенных свойств (3. И. Сосина, В. В. Будылина, 1962; В. В. Будылина, 3. И. Сосина, 1963). Процент падения титра антител возрастает с увеличением кратности обработки сыворотки гелем гидроокиси алюминия (Г. П. Петрова, Н. И. Криводубская, 1962).
Для уменьшения возможности возникновения пирогена были повышены требования к культуре производства, предусматривающие предупреждение микробного загрязнения сывороток на этапах их очистки и концентрации.
Было показано, что обработка сывороток в закрытых условиях, применение стерильного пепсина, стерильного сернокислого аммония и понижение температуры на ряде этапов позволили значительно снизить обсемененность сывороток микроорганизмами и тем самым устранить пирогенность (Р. Г. Карчхадзе, 1963), не связанную с накоплением полипептидов.
Г. В. Дудоренко с соавт. (1958) наблюдали снижение пирогенности при проведении диализа в охлажденной воде.
Ускорение процесса обработки сывороток также уменьшает число пирогенных серий. Так, для сокращения времени деминерализации К. Л. Шаханина (1959, 1962) предложила частично заменить диализ обессоливанием на ионообменниках, А. Н. Мейпариани с соавт. (1965) предложили для этой цели электродиализатор с ионитовыми мембранами ЭДЭ-10П и КУ-2. Данный метод не вошел в практику очистки и концентрации сывороток и требует технического совершенствования. 1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
50
51
52
53
54
55
56
57
58
59
60
61
62
63
64
65
66
67
68
69
70
71
72
73
74
75
76
77
78
79
80
81
82
83
84
85
86
87
88
89
90
91
92
93
94
95
96
97
98
99
100
101
102
103
104
105
106
107
108
109
110
111
112
113
114
115
116
117
118
119
120
121
122
123
124
125
126
127
128
129
130
131
132
133
134
135
136
137
138
139
140
141
142
143
144
145
146
147
148
149
150
151
152
153
154
155
156
157
158
159
160
161
162
163
164
165
166
167
168
169
170
171
172
173
174
175
176
177
178
179
180
181
182
183
184
185
186
187
188
189
190
191
192
193
194
195
196
197
198
199
200
201
202
|