|
Преципитирующая сыворотка
Реакция преципитации представляет собой взаимодействие антигена и антител, в результате которого в растворе происходит выпадение осадка, а в агаре — образование полосы преципитации. Феномен преципитации, впервые зарегистрированный R. Craus (1897), является основой практическою его использования в виде соответствующей реакции иммунитета, для постановки которой требуется изготовление пре- ципитирующих диагностических сывороток, нашедших широкое применение в медицине, ветеринарии и судебно-медицинской практике.
Реакция преципитации с указанными сыворотками является высокоспецифичной, чувствительной и позволяет выявлять ничтожно малые количества антигенов, что и определяет ее ценность и надежность.
В настоящее время изготавливаются различные преципитирующие сыворотки. Так, нашли широкое применение в судебной экспертизе диагностические сыворотки к различным чужеродным белкам (человека, животных, птиц), в медицине и ветеринарии — преципитирующая сибиреязвенная сыворотка, в медицине — диагностические преципитирующие дизентерийная для постановки реакции кольцепреципитации с целью выявления специфических полисахаридов дизентерийных микробов, стрептококковые А, В, С, Д для типирования соответствующего микроба, оспенная, полиомиелитная для постановки реакции преципитации в агаре и другие.
Принципы изготовления различных гипериммунных преципитирующих сывороток примерно одинаковы. Остановимся на приготовлении некоторых из них.
Широко применяется в судебно-медицинской практике преципитирующая сыворотка к чужеродным белкам. Для ее производства используют кроликов. М. Е. Погорелов (1965) считает, что лучшими продуцентами являются животные-самцы. Определенное значение имеет возраст кроликов. П. Н. Косяков и М. И. Резникова (1955) указывают на пониженную способность молодых животных продуцировать преципитирующие сыворотки. Большое значение при производстве преципитирующей с чужеродными белками сыворотки имеет схема иммунизации, что было подтверждено м. И. Райским (1915, 1925), G. Ramon (1927, 1962) и П. Ф. Здродовским (1963).
Наиболее оптимальным сроком между первичной иммунизацией и реиммунизацией кроликов гетерогенными белками с целью получения высоких титров преципитинов, по данным М. И Райского (1925). А. П. Осиповой-Райской (1930), A. А. Климентовой (1949) и др., является 2 месяца и больше (до 26 месяцев по наблюдениям М. И. Райского, 1915). По данным М. Е. Погорелова (1965), весьма эффективна двухкратная реиммунизация с интервалом в 30—60 дней Предложенные различные схемы гипериммунизации включают многократные внутривенные инъекции антигена. А. Е. Гурвич (1955), С. Я. Капланский с соавт. (1958), Л. К. Старог сельцева (1960) при первичной иммунизации вводили внутри венно гетерогенный белок в малых дозах (0,01—0,03 мл), при отдаленной реиммунизации — двухкратно большие дозы (0,1 мл). С целью увеличения титра антител Н. В. Щм дуницын (1965) применил полный и неполный адъюванты Фрейнда. Лучшее образование преципитинов наблюдалось при использовании последнего. 1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
50
51
52
53
54
55
56
57
58
59
60
61
62
63
64
65
66
67
68
69
70
71
72
73
74
75
76
77
78
79
80
81
82
83
84
85
86
87
88
89
90
91
92
93
94
95
96
97
98
99
100
101
102
103
104
105
106
107
108
109
110
111
112
113
114
115
116
117
118
119
120
121
122
123
124
125
126
127
128
129
130
131
132
133
134
135
136
137
138
139
140
141
142
143
144
145
146
147
148
149
150
151
152
153
154
155
156
157
158
159
160
161
162
163
164
165
166
167
168
169
170
171
172
173
174
175
176
177
178
179
180
181
182
183
184
185
186
187
188
189
190
191
192
193
194
195
196
197
198
199
200
201
202
|