Исследования в области особоопасных инфекций

Гипериммунизация животных споровыми культурами

До 1939 г. противосибиреязвенную сыворотку готовили гипериммунизацией животных споровыми культурами, введение которых вызывало сильную общую реакцию организма. С. Г. Колесовым (1939) разработана и успешно внедрена в практику гипериммунизация лошадей вирулентной суточной бульонной культурой, преципитированной квасцами, позволившая получать высокоактивную сыворотку при резком снижении реакций продуцентов на введение антигена. Этим же автором (1938) была сделана попытка гипериммунизации 14—16-часовой бульонной культурой, обработанной бриллиантгрюном с добавлением квасцов, однако активность сывороток при этом снижалась. По данным С. Г. Колесова, И. А. Ульянова, О. А. Грачева (1955), гипериммунизация лошадей с использованием в качестве антигена вакцинных штаммов (II вакцины Ценковского, СТИ и др.) также не обеспечивает выпуск высокоактивных препаратов. Следует, однако, указать, что Р. С. Славчев (1960) применил бескапсульный авирулентный штамм Ихтиман (18—20-часовую культуру) и получил активную противосибиреязвенную сыворотку.

Проведенные исследования С. Г. Колесова, И. А. Ульянова, О. А. Грачева (1955) и многих других авторов позволили отработать схему гипериммунизации лошадей для получения противосибиреязвенной сыворотки.

С этой целью лошадей предварительно иммунизируют сибиреязвенной вакциной СТИ четырехкратно в возрастающих дозах (1—4 мл), затем гипериммунизируют антигеном. В качестве антигена используют 24-часовую бульонную культуру, содержащую не меньше 4 вирулентных штаммов микроба, выделенных из трупов павших от сибирской язвы животных. Антиген вводится преципитированным 0,1—0,2% алюмокалие,вых квасцов в дозах 0,5—1—3—5 мл с 3-дневными интервалами внутрикожно и подкожно. Для последующих: инъекций применяют возрастающие дозы антигена до 180 мл на введение, при этом до 80 мл преципитируют его 0,1% алюмокалиевых квасцов, а выше — 0,2%. Цикл заканчивается кровопусканием, которое проводится через 10 дней после последней иммунизации.

Длительное время для лечебных и профилактических целей выпускалась и использовалась нативная противосибире- язвенная сыворотка, что создавало возможность частого появления анафилактических реакций. Поэтому рядом исследователей в СССР проведена работа по получению и изучению противосибиреязвенного глобулина.

В. П. Бодиско, Ф. I. Миниович, А. И. Михайлов (I960), используя методы спиртового осаждения на холоду и фракционного осаждения сернокислым аммонием, получили из нативной сибиреязвенной сыворотки ее различные белковые фракции. Испытание их превентивных свойств на животных показало высокую профилактическую и лечебную эффективность гамма- и псевдоглобулинов по сравнению с нативной сывороткой, особенно в поздние сроки применения с лечебной целью при экспериментальной инфекции. Эти данные явились основанием для разработки производственного метода получения специфически активной глобулиновой фракции сибиреязвенных сывороток.

Н. А. Пономаревой, А. С. Нечаевой, М. Н. Дурасовой И. Д. Лоран (1960) предложен метод изготовления противосибиреязвенного глобулина из нативной сыворотки по технологической схеме принятого в производстве варианта В метода спиртового осаждения на холоду, описанного выше в соответствующем разделе. Получаемый этим методом препарат содержит бета- и гамма-глобулиновые фракции нативной сыворотки. С 1961 г. препарат готовится по указанной выше методике из лошадиной гипериммунной сыворотки в производственных условиях в жидком виде с содержанием 10% белка с общими для других лечебных сывороточных препаратов требованиями по качеству.

Как указывают многие авторы (А. В. Машков, В. П. Бодиско, 1958; М. Франке, 1964; Н. Н. Гинсбург, 1966 и др.) механизм действия противосибиреязвенной сыворотки не выявлен. Эффект действия не связан с известными антибактериальными антителами. Защитные антитела в серологических реакциях не выявляются. Предполагают, что противосибиреязвенная сыворотка разрушает капсулу, в отношении которой фагоциты обладают отрицательным химиотаксисом, а затем и клетку.

Специфическая активность сыворотки в связи с вышеизложенным оценивается в прямом опыте защиты животных от вирулентной культуры сибирской язвы (проверка на кроликах) или от споровой культуры вакцины Ценковского (проверка на морских свинках).

Препарат выпускается во флаконах, в расфасовке 20 мл С целью профилактики он используется при контакте c материалом, зараженным палочками сибирской язвы или спорами. При этом взрослым вводят 25 мл препарата, подросткам — 12 мл, детям — 5—8 мл (Г. Н. Руднев, 1966) Для лечения противосибиреязвенный глобулин применяется сразу же по установлению диагноза в дозах 30—50 мл. внутримышечно и в зависимости от клиники заболевания введения его повторяются.

1  2  3  4  5  6  7  8  9  10  11  12  13  14  15  16  17  18  19  20  21  22  23  24  25  26  27  28  29  30  31  32  33  34  35  36  37  38  39  40  41  42  43  44  45  46  47  48  49  50  51  52  53  54  55  56  57  58  59  60  61  62  63  64  65  66  67  68  69  70  71  72  73  74  75  76  77  78  79  80  81  82  83  84  85  86  87  88  89  90  91  92  93  94  95  96  97  98  99  100  101  102  103  104  105  106  107  108  109  110  111  112  113  114  115  116  117  118  119  120  121  122  123  124  125  126  127  128  129  130  131  132  133  134  135  136  137  138  139  140  141  142  143  144  145  146  147  148  149  150  151  152  153  154  155  156  157  158  159  160  161  162  163  164  165  166  167  168  169  170  171  172  173  174  175  176  177  178  179  180  181  182  183  184  185  186  187  188  189  190  191  192  193  194  195  196  197  198  199  200  201  202