|
Противолептоспирозная поливалентная нативная сыворотка
Противолептоспирозную поливалентную нативную сыворотку в производственных условиях в настоящее время готовят путем гипериммунизации волов. Вначале животные иммунизируются смесью в равных количествах убитых нагреванием культур лептоспир типов L. grippothyphosa, L. pomona, L. icterohaemorrhagie, L. canicola, L. tarasovi в общей дозе 10—30—50 мл, затем смесью указанных живых культур в равных соотношениях в возрастающих дозах от 10 до 400 мл. Антиген вводят вначале подкожно, затем в сочетании под-кожно с внутривенным введением и, наконец, только внутривенно с интервалом между инъекциями в 4—6 дней. Максимальная доза при внутривенном введении не больше 100 мл. Кровопускание производят на 10—12-й день после последней иммунизации. Последующие циклы проводятся иммунизацией тремя инъекциями антигена (первая — в половинной дозе, вторая и третья — в полной дозе из расчета 1 мл антигена на 1 кг веса продуцента). Через 8 дней производят очередное взятие крови.
Параллельно с исследованиями по получению высокоэффективных сывороток против лептоспироза проводились изыскания способов их наиболее рациональной очистки и концентрации.
Н. П. Иванов с соавт. (1953) проводили очистку и концентрацию противолептоспирозных сывороток методами изо- электрического осаждения и электродиализа. Было установлено, что антитела противолептоспирозных сывороток связаны с изолабильным глобулином, который практически может быть полностью выделен указанными методами. Авторы пришли к выводу, что в условиях производства предпочтителен метод фракционного электродиализа, позволяющий в 5 и более раз повышать титр антител по сравнению с нативными сыворотками.
М. Ф. Видинский (1953) сообщил о положительных результатах очистки противолептоспирозных сывороток методом фракционного высаливания сернокислым аммонием с последующим водным диализом.
А. А. Варфоломеевой, К. С. Перовой, Ф. Л. Миниович (1954) были получены первые образцы противолептоспирозного гамма-глобулина методом спиртового осаждения из сыворотки лошадей, гипериммунизированных культурами лептоспир типов L. grippothyphosa, L. icterohaemorrhagiae, L. pomona. В 1957 г. эти же авторы изготовили гамма-глобулин из воловьих сывороток, производимых на ветеринарных биофабриках, содержащих антитела к трем указанным телам лептоспир, при этом его активность превышала в 2—3 раза таковую нативных препаратов. Позднее в 1960 г. А. А. Варфоломеевой, Л. С. Новиковой, К. М. Лазеевой был получен гамма-глобулин из сыворотки крови волов, содержащий антитела к 5 серологическим типам лептоспир.
Испытание противолептоспярозного гамма-глобулина на лабораторных животных, добровольцах и в клинике у больных водной лихорадкой под руководством А. А. Варфоломеевой (1960), при поражении глаз у больных лептоспирозом (М. М. Сахаров, 1960) выявило высокий терапевтический эффект. П. М. Барышев, Ю. М. Стригущенко, Т. Я. Хомутов (1965) при клиническом испытании подтвердили высокоэффективные лечебные свойства противолептоспирозного гамма-глобулина.
Группа экспертов ВОЗ (1968) по современным проблемам лечения лептоспирозов, рассматривая вопросы терапии заболевания, пришла к выводу о том, что специфические гамма-глобулины имеют важное значение для указанных целей, особенно при клинически выраженных формах лептоспироза. Этот вывод был сделан на основе данных широкого экспериментального изучения, проведенного под руководством А. А. Варфоломеевой группой исследователей. Поэтому медицинская биологическая промышленность для лечебных целей в настоящее время выпускает противолептоспирозный гамма-глобулин, который готовится методом фракционирования этиловым спиртом при низких температурах по технологии, принятой для других гетерогенных гамма-глобулинов. В качестве стабилизатора применяется 2—4% гликокола. Готовый гамма-глобулин должен содержать 10% (±1%) специфического белка и не более 4,5% остаточного спирта, иметь титр специфических антител в реакции агглютинации к каждому серологическому типу лептоспир не менее 1:8000. Препарат выпускается в жидком виде в ампулах по 5 мл, к каждой из которых прилагается по одной ампуле с 1 мл разведенного 1:100 гамма-глобулина для определения чувствительности к белку крупного рогатого скота.
Препарат применяется с лечебной целью при лептоспирозах, вызванных типами микроба, антитела к которым содержатся в гамма-глобулине. Вводится внутримышечно в зависимости от возраста: детям 8—13 лет — 3 мл, 14 лет и взрослым — 5—10 мл. Введение препарата повторяется в зависимости от тяжести заболевания. 1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
50
51
52
53
54
55
56
57
58
59
60
61
62
63
64
65
66
67
68
69
70
71
72
73
74
75
76
77
78
79
80
81
82
83
84
85
86
87
88
89
90
91
92
93
94
95
96
97
98
99
100
101
102
103
104
105
106
107
108
109
110
111
112
113
114
115
116
117
118
119
120
121
122
123
124
125
126
127
128
129
130
131
132
133
134
135
136
137
138
139
140
141
142
143
144
145
146
147
148
149
150
151
152
153
154
155
156
157
158
159
160
161
162
163
164
165
166
167
168
169
170
171
172
173
174
175
176
177
178
179
180
181
182
183
184
185
186
187
188
189
190
191
192
193
194
195
196
197
198
199
200
201
202
|