Исследования в области особоопасных инфекций

Сравнение токсинообразования на различных средах

Для создания анаэробных условий к средам прибавляли наполнители в виде кусочков тканей печени, мышц, куриный вареный белок или мясной фарш, вату, поролон, фибрин, древесные опилки (Е. В. Глотова, 1934; С. И. Наследышева, 1940; С. А. Зелевинская, 1943; М. Н. Лебедева, О. М. Земцова, 1962; М. Р. Нечаевская с соавт., 1966; М. Р. Нечаевская 1968).

При сравнении токсинообразования на различных средах С. И. Наследышева (1940) лучшие результаты получила на печеночном бульоне Вейнберга, С. А. Зелевинская (1943) — на бульоне Мартена, Вейнберга и бульоне Вальбума и Раймана, М. Р. Нечаевская с соавт. (1955) — на бульоне триптического перевара мышц быка, М. А. Бычкова (1973) — на бульоне из панкреатического гидролизата казеина, затем на среде Поупа. В настоящее время большинство авторов считают, что лучшими средами при производстве токсина перфрингенс являются бульоны триптического перевара (М. Р. Нечаевская с соавт., 1955; В. Д. Никитин, 1965; М. А. Бычкова, 1973 и др.), хорошей активности токсины получают Чйй рыбо-казеиновых средах, гидролизованных при помощи грибка Aspergilus terricola (И. Н. Виноградова с соавт., 1958; 3. М. Волкова, С. А. Зелевинская, 1957; А. Олару с соавт., 1960 и др.).

Исследования, проведенные Г. П. Черкас с соавт. (1955), показали, что свежеприготовленные среды не имеют преимущества по сравнению с заготовленными впрок, что дает возможность варить бульоны в больших количествах и постепенно их расходовать.

Для получения анатоксина к токсину добавляют 0,4% формалина (40%-ного) и выдерживают в термостате при 37э в течение 24—72 часов с последующим хранением во фриго при t-80°.

Исходная сила применяемого для иммунизации антигена должна быть не меньше 100 Dlm/мл, и он должен содержать не меньше 2,5 ЕС. Следует, однако, отметить, что при изучении взаимосвязи антигенности и токсичности С. А. Зелевинская (1941), Н. Ф. Калиниченко и Л. Г. Подгорная (1970) не обнаружили между ними параллелизма. Для иммунизации лошадей используются нативный и концентрированный сернокислым аммонием антигены. Как показала М. А. Бычкова (1974), применявшая для иммунизации концентрированный антиген, он сохраняет свою активность в течение года. Следует отметить, что для иммунизации используют обезвреженный и недообезвреженный антигены, последний при содержании в крови лошади не меньше 10 МЕ/мл (Г. П. Черкас с соавт., 1955). При сравнительном изучении иммунизирующих свойств недообезврежанного и полностью обезвреженного токсинов, по данным Г. П. Черкас с соавт. (1955), более активен первый. В качестве продуцента токсина вибриосептикум из большого количества различных штаммов этого вида наиболее антигенным являются Cl. Septicum 59, затем 282 (Ф. А. Черткова с соавт., 1952; И. А. Ларина, 3. М. Волкова, 1958; Н. Ф. Калиниченко, Л. А. Бергольцева, 1961), первый широко используется в производстве антигена. Септический вибрион образует при росте на питательных средах летальный токсин гемолизин, некротический токсин и гиалуронидазу (Ф. А. Черткова с соавт., 1952).

Возраст штамма не влияет на активности получаемых токсинов (Л. А. Бергольцева с соавт., 1968). Аналогичные результаты приводит М. А. Бычкова (1973) при использовании освеженной культуры. В качестве посевного материала применяют обычно односуточные культуры (И. А. Ларина; 3. М. Волкова, 1958; Н. Ф. Калиниченко, Л. А. Бергольцева, 1961), Температура засеваемого бульона в пределах 20—85° не влияет на активность токсинообразования (М. А. Бычкова, 1973). Для изготовления антигена используются токсины, полученные в течение 12—14 часов — по данным М. А. Бычковой (1973), до 18—20—24 часов — по другим авторам (С. А. Зелевинская, 1943; И. А. Ларина, 3. М Волкова, 1958; Н. Ф. Калиниченко, Л. А. Бергольцева, 1961; Л. А. Бергольцева с соавт., 1968) и даже до 2 суток (Е. В. Глотовой, 1934) в зависимости от интенсивности роста.

1  2  3  4  5  6  7  8  9  10  11  12  13  14  15  16  17  18  19  20  21  22  23  24  25  26  27  28  29  30  31  32  33  34  35  36  37  38  39  40  41  42  43  44  45  46  47  48  49  50  51  52  53  54  55  56  57  58  59  60  61  62  63  64  65  66  67  68  69  70  71  72  73  74  75  76  77  78  79  80  81  82  83  84  85  86  87  88  89  90  91  92  93  94  95  96  97  98  99  100  101  102  103  104  105  106  107  108  109  110  111  112  113  114  115  116  117  118  119  120  121  122  123  124  125  126  127  128  129  130  131  132  133  134  135  136  137  138  139  140  141  142  143  144  145  146  147  148  149  150  151  152  153  154  155  156  157  158  159  160  161  162  163  164  165  166  167  168  169  170  171  172  173  174  175  176  177  178  179  180  181  182  183  184  185  186  187  188  189  190  191  192  193  194  195  196  197  198  199  200  201  202