|
Применение токсина для иммунизации
B. Денчев, Н. Марчев, Е. Райчева (1966) применили для гипериммунизаций ботулинические токсины со 2-го цикла, после того как в крови лошадей появляются защитные титры. Дозы токсина составляли минимально 10, 20, 30 мл, максимально — 100, 150, 200 мл. Авторы отмечают, что применение токсина для иммунизации дает увеличение титра антител в 4—5 раз.
Л. Н. Шаганов с соавт. (1971), Ю. Б. Лукин с соавт. (1971) высказываются за применение токсина в 1-м цикле.
Опыт раннего применения ботулинического токсина для иммунизации способствовал гораздо более быстрой подготовке лошади как продуцента и значительному увеличению активности сывороток. Введение токсина в первых циклах иммунизации отразилось на схемах в сторону уменьшения дозировки антигена.
Большое значение в практике применения токсина для гипериммунизации животных имеет срок, в течение которого антиген сохраняет свою активность.
Ботулинические токсины типов С, Д и Е значительно устойчивей, чем токсины А и В (Т. Cartwrigh, М. Sanffer, 1952; Е. Brygoo, 1953; А. Рrevolt, Е. Brygoo, 1953), токсин Е занимает промежуточное положение между токсинами А и В, с одной стороны, и С и Д — с другой (Е. Д. Кушнир, 1952).
По данным Н. С. Кашинцевой, 3. М. Волковой, О. А. Комновой (1937), С, М. Минервина, И. Н. Моргунова (1941), О. Н. Росквас (1942), при хранении токсинов А и В в холодильнике в течение 1—2 месяцев активность их снижается до нуля. Токсин типа Е при температуре 4° в течение 3 месяцев не теряет своей силы (Е. Д. Кушнир, 1952), токсин типа С сохраняет токсичность почти неизменной в течение нескольких месяцев (Е. П. Лукин, И. В. Воронцов, 1965).
С. А. Соловьева, Г. Е. Синельников, С. А. Нестерова, С. М. Прегер, Т. В. Майорова, Г. Н. Майорова (1972) показали, что большая часть проверенных серий токсина типа А начинает терять аитигеиность через 3 недели хранения при температуре 4—10°, типа В — через 2 недели, типа Е — в течение 2 месяцев полностью сохраняют свои свойства.
Токсин типа F нестабилен. Как указывает В. П. Царапкин (1970, 1972), его токсичность при хранении в холодильнике в течение 30 дней снижается в 1500—30000 раз.
Нативный токсин типа С сохраняет токсичность почти неизмененной в течение многих месяцев (Е. П. Лукин, И. В. Воронцов, 1965).
Следует помнить, что на стабильность токсина оказывает влияние присутствие в нем мясного бульона, сыворотки, желатины, смеси глицерина и гуммиарабика (О. А. Островская, Н. С. Гродко, 1935; Z. Wentzel с соавт., 1950; U. Littauer, 1951; A. Boor с соавт., 1955); а также pH среды. Н. Sommer (1936), Е. Д. Кушнир (1937, 1941, 1952), W. Scott (1950), U. Littauer (1951), A. Prevot, Е. Brygoo (1953) показали, что ботулинические токсины сохраняют максимум активности при pH 3,5—6,6. Небольшое повышение pH приводило к частичному или полному активированию, а резкий сдвиг в щелочную сторону вызывал быстрое разрушение токсина.
В настоящее время при производстве моновалентных противоботулинических сывороток подготовительный цикл ведут двояко. Так, Ю. Б. Лукин с соавт. (1971) проводят его моноантигенами и получают товарную сыворотку после 1-го цикла.
За подготовку лошадей полианатоксином высказались Е. И. Бессолицын, П. М. Наговицын, Г. П. Хлебников (1971), Л. Н. Шаганов с соавт. (1971). Последние авторы в 1-м цикле применяли смесь ботулинических анатоксинов типов А, В, С, Е в дозах 5—10—20—40—60 мл. Затем при наличии защитного титра переводили животных на иммунизацию токсином того типа, к которому было определено наивысшее содержание антител. Дозы токсина составляли 5—10-20-40-60—80 мл. Во 2-м и последующих циклах ограничивались тремя инъекциями токсина. При такой схеме, по данным авторов, резко увеличивался титр антител, сокращался подготовительный период на 30—35 дней, снижался расход антигена и увеличивался выход деловых продуцентов до 98%.
Антиген при гипериммунизации большей частью вводится подкожно. Ф. А. Даниленко с соавт. (1963) указывают на эффективность внутрикожного его введения: титры антител, по их данным, повышаются по типу А в 2,5 раза, Е — в 3 раза. Кроме того, уменьшаются дозы антигена, что дает возможность эксплуатировать старых изношенных лошадей, а также животных, страдающих сердечной недостаточностью и перенесших другие заболевания. На положительное действие внутрикожного введения антигена указывают также В. Денчев, Н. Марчев, Е. Райчева (1966), В. Б. Фрейман с соавт. (1968).
Внутрикожный метод введения антигена несмотря на достоинства нашел ограниченное применение в сывороточном производстве из-за трудоемкости и необходимости для его проведения наличия квалифицированных кадров. Нами (С. А. Соловьева, Г. Е. Синельников, С. М. Прегер, С. С. Козыренко, М. Я. Чаунин, 1972) была показана возможность применения для внутрикожной иммунизации безыгольного инъектора БИП-4. Последний облегчает иммунизацию, но прибор требует совершенствования. 1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
50
51
52
53
54
55
56
57
58
59
60
61
62
63
64
65
66
67
68
69
70
71
72
73
74
75
76
77
78
79
80
81
82
83
84
85
86
87
88
89
90
91
92
93
94
95
96
97
98
99
100
101
102
103
104
105
106
107
108
109
110
111
112
113
114
115
116
117
118
119
120
121
122
123
124
125
126
127
128
129
130
131
132
133
134
135
136
137
138
139
140
141
142
143
144
145
146
147
148
149
150
151
152
153
154
155
156
157
158
159
160
161
162
163
164
165
166
167
168
169
170
171
172
173
174
175
176
177
178
179
180
181
182
183
184
185
186
187
188
189
190
191
192
193
194
195
196
197
198
199
200
201
202
|