|
Антитоксические сыворотки
Противодифтерийная сыворотка
Обнаружение в 1890 г. Е. Берингом и С. Китазато в крови экспериментальных животных, иммунизированных дифтерийным токсином, антитоксина, а затем приготовление в 1892 г. Е. Behring (1894) противодифтерийной сыворотки положило начало специфической серотерапии дифтерии.
В России впервые противодифтерийная сыворотка была приготовлена Г. Габричевским (1895).
Уже в конце XIX в. применение противодифтерийной сыворотки в нативном виде с невысоким содержанием антитоксина для лечения дифтерии позволило снизить летальность с 51,7—63,0 до 21—26% (Н. Ф. Гамалея, 1895; К. А. Раухфус, 1895), а к периоду 1910—1930 гг. — до 4—12% (Г. Рамон, 1962).
При приготовлении противодифтерийной сыворотки имеют значение многие факторы, важным из них считается качество антигена. Последнее зависит от токсигенности дифтерийной культуры и условий, в которых она культивируется (Г. Габричевский, 1895).
Хорошо известно, что не все штаммы дифтерийной палочки способны продуцировать высокой активности токсин. Широкое распространение в производстве антигена получил токсигенный штамм Park Williams-8, выделенный в 1894 г. от дифтерийного бациллоносителя. Было показано, что противодифтерийная сыворотка, полученная при использовании антигена штамма PW-8, нейтрализует in vitro токсины других серологических типов, что свидетельствует об эффективности приготовления ее на основе применения антигена из этого штамма (Р. И. Бальзак, 1949).
Для производства токсина-анатоксина используют и другие варианты штамма, в том числе Вейсензее, Массачусетс, Торонто, Десау. Все они различаются по способности продуцировать токсин на определенных, как бы элективных, питательных средах.
Токсигенность штамма зависит от формы диссоциации. Наиболее сильные токсины получают при нахождении культуры в R-форме (В. Я. Фишбейн, 1945, 1950; М. П. Вагнер-Сахарова, Н, А. Калинская, 1959 и др.).
Показано, что селекция наиболее токсигенных колоний штамма в R-форме способствует повышению качества токсинов (М. П. Вагнер-Сахарова, Н. А. Калинская, 1956; В. Н. Шаровская, Р. Г. Мухтудинова, 1959; Е. А. Ильницкая, 1959; М. Ф. Видинский, 1959). Вполне возможно, что высокая токсигенность отобранных культур связана с явлениями лизогении (N. Groman, 1953; W. Barksdall, А. Рарpenheimer, 1954).
Активность токсинов определяется по токсичности и антигенное. Для выяснения последней широко использу ется реакция флокуляции.
По данным П. В. Павлова и А. Г. Леонова (1961), токсичность и антигеннэсть, выявляемая по реакции флокуляции, изменяются параллельно, но, как показали М. В. Далин с соавт. (1968), Л. Н. Лобанова с соавт. (1973), максимальная токсичность фильтратов при культивировании коринобактерий достигается раньше, чем их максимальная, флокулирующая активность.
Для оценки токсигенности дифтерийных штаммов, применяемых для производства дифтерийного токсина, Э. 3. Paxман (1959) предложил использовать реакцию диффузионной преципитации в геле. Им было показано, что высокотоксигенные варианты штамма PW-8 образуют резко выраженные преципитаты, а слаботоксигенные — слабые преципитаты.
Большое значение при получении токсинов высокой активности придается качеству питательной среды (Л. Конова, Л. Базилевская; D. Antona, Е. Falchetti, 1946; L. Walbi 1909 и др.).
В производстве дифтерийных токсинов используются различные питательные среды пептического и триптического переваривания. Е. А. Ильницкая (1959) указывает, что для их изготовления можно употреблять с одинаковыми результатами конское, телячье, говяжье и кроличье мясо. Анатоксины же, приготовленные на питательной среде из бараньего мяса, обладают пониженными иммуногенными свойствами.
Широкое применение при приготовлении антигена нашла среда Мартена. Г. И. Рахманчик (ТомНИИВС, 1944) предложила заменить Мартеновский пептон, для изготовления которого требуются свиные желудки, пептоном из сычугов крупного рогатого скота. На последнем автор, О. П. Кирикова, А. Ю. Иллютович (1944), С. Полундрин (1944) готовили токсины с удовлетворительным титром. На видоизме- 196 ценной среде Мартена, состоящей только из продуктов расщепления желудка свиньи пепсином с добавлением к ней 2% мальтозы и стерилизации ее фильтрованием через фильтр Зейтца, Е. Taylor (1935) получал токсины до 100 Lf/мл.
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
50
51
52
53
54
55
56
57
58
59
60
61
62
63
64
65
66
67
68
69
70
71
72
73
74
75
76
77
78
79
80
81
82
83
84
85
86
87
88
89
90
91
92
93
94
95
96
97
98
99
100
101
102
103
104
105
106
107
108
109
110
111
112
113
114
115
116
117
118
119
120
121
122
123
124
125
126
127
128
129
130
131
132
133
134
135
136
137
138
139
140
141
142
143
144
145
146
147
148
149
150
151
152
153
154
155
156
157
158
159
160
161
162
163
164
165
166
167
168
169
170
171
172
173
174
175
176
177
178
179
180
181
182
183
184
185
186
187
188
189
190
191
192
193
194
195
196
197
198
199
200
201
202
|