Исследования в области особоопасных инфекций

Антитоксические сыворотки

Противодифтерийная сыворотка

Обнаружение в 1890 г. Е. Берингом и С. Китазато в крови экспериментальных животных, иммунизированных дифтерийным токсином, антитоксина, а затем приготовление в 1892 г. Е. Behring (1894) противодифтерийной сыворотки положило начало специфической серотерапии дифтерии.

В России впервые противодифтерийная сыворотка была приготовлена Г. Габричевским (1895). Уже в конце XIX в. применение противодифтерийной сыворотки в нативном виде с невысоким содержанием антитоксина для лечения дифтерии позволило снизить летальность с 51,7—63,0 до 21—26% (Н. Ф. Гамалея, 1895; К. А. Раухфус, 1895), а к периоду 1910—1930 гг. — до 4—12% (Г. Рамон, 1962).

При приготовлении противодифтерийной сыворотки имеют значение многие факторы, важным из них считается качество антигена. Последнее зависит от токсигенности дифтерийной культуры и условий, в которых она культивируется (Г. Габричевский, 1895).

Хорошо известно, что не все штаммы дифтерийной палочки способны продуцировать высокой активности токсин. Широкое распространение в производстве антигена получил токсигенный штамм Park Williams-8, выделенный в 1894 г. от дифтерийного бациллоносителя. Было показано, что противодифтерийная сыворотка, полученная при использовании антигена штамма PW-8, нейтрализует in vitro токсины других серологических типов, что свидетельствует об эффективности приготовления ее на основе применения антигена из этого штамма (Р. И. Бальзак, 1949).

Для производства токсина-анатоксина используют и другие варианты штамма, в том числе Вейсензее, Массачусетс, Торонто, Десау. Все они различаются по способности продуцировать токсин на определенных, как бы элективных, питательных средах.

Токсигенность штамма зависит от формы диссоциации. Наиболее сильные токсины получают при нахождении культуры в R-форме (В. Я. Фишбейн, 1945, 1950; М. П. Вагнер-Сахарова, Н, А. Калинская, 1959 и др.).

Показано, что селекция наиболее токсигенных колоний штамма в R-форме способствует повышению качества токсинов (М. П. Вагнер-Сахарова, Н. А. Калинская, 1956; В. Н. Шаровская, Р. Г. Мухтудинова, 1959; Е. А. Ильницкая, 1959; М. Ф. Видинский, 1959). Вполне возможно, что высокая токсигенность отобранных культур связана с явлениями лизогении (N. Groman, 1953; W. Barksdall, А. Рарpenheimer, 1954).

Активность токсинов определяется по токсичности и антигенное. Для выяснения последней широко использу ется реакция флокуляции.

По данным П. В. Павлова и А. Г. Леонова (1961), токсичность и антигеннэсть, выявляемая по реакции флокуляции, изменяются параллельно, но, как показали М. В. Далин с соавт. (1968), Л. Н. Лобанова с соавт. (1973), максимальная токсичность фильтратов при культивировании коринобактерий достигается раньше, чем их максимальная, флокулирующая активность.

Для оценки токсигенности дифтерийных штаммов, применяемых для производства дифтерийного токсина, Э. 3. Paxман (1959) предложил использовать реакцию диффузионной преципитации в геле. Им было показано, что высокотоксигенные варианты штамма PW-8 образуют резко выраженные преципитаты, а слаботоксигенные — слабые преципитаты.

Большое значение при получении токсинов высокой активности придается качеству питательной среды (Л. Конова, Л. Базилевская; D. Antona, Е. Falchetti, 1946; L. Walbi 1909 и др.).

В производстве дифтерийных токсинов используются различные питательные среды пептического и триптического переваривания. Е. А. Ильницкая (1959) указывает, что для их изготовления можно употреблять с одинаковыми результатами конское, телячье, говяжье и кроличье мясо. Анатоксины же, приготовленные на питательной среде из бараньего мяса, обладают пониженными иммуногенными свойствами.

Широкое применение при приготовлении антигена нашла среда Мартена. Г. И. Рахманчик (ТомНИИВС, 1944) предложила заменить Мартеновский пептон, для изготовления которого требуются свиные желудки, пептоном из сычугов крупного рогатого скота. На последнем автор, О. П. Кирикова, А. Ю. Иллютович (1944), С. Полундрин (1944) готовили токсины с удовлетворительным титром. На видоизме- 196 ценной среде Мартена, состоящей только из продуктов расщепления желудка свиньи пепсином с добавлением к ней 2% мальтозы и стерилизации ее фильтрованием через фильтр Зейтца, Е. Taylor (1935) получал токсины до 100 Lf/мл.

1  2  3  4  5  6  7  8  9  10  11  12  13  14  15  16  17  18  19  20  21  22  23  24  25  26  27  28  29  30  31  32  33  34  35  36  37  38  39  40  41  42  43  44  45  46  47  48  49  50  51  52  53  54  55  56  57  58  59  60  61  62  63  64  65  66  67  68  69  70  71  72  73  74  75  76  77  78  79  80  81  82  83  84  85  86  87  88  89  90  91  92  93  94  95  96  97  98  99  100  101  102  103  104  105  106  107  108  109  110  111  112  113  114  115  116  117  118  119  120  121  122  123  124  125  126  127  128  129  130  131  132  133  134  135  136  137  138  139  140  141  142  143  144  145  146  147  148  149  150  151  152  153  154  155  156  157  158  159  160  161  162  163  164  165  166  167  168  169  170  171  172  173  174  175  176  177  178  179  180  181  182  183  184  185  186  187  188  189  190  191  192  193  194  195  196  197  198  199  200  201  202