Получение сыворотки против С-реактивного белка
Полученный С-реактивный белок полисахаридным или бесполисахаридным методами очищается от липоидов. С этой целью Н. Wood с соавт; (1954), П. М. Пашинин (1962) применили хлороформ. В освобожденном от липоидов виде он используется в качестве антигена для гипериммунизации животных. Б. Н. Грачев (1966) рекомендует с этой целью применять антиген, полученный бесполисахаридным методом.
При изготовлении специфической иммунной сыворотки П. М. Пашинин (1960) вводил кроликам С-реактивный белок в физиологическом растворе внутривенно по 1 мл, содержащем 3 мг белка, 3 дня подряд, после 4 дней перерыва начинался 2-й цикл. Всего автор проводил 4—5 циклов. Если титр сыворотки был невысоким, то после 30—45 дней отдыха проводилась реиммунизация. Для стимуляции антителообразования П. М. Пашинин (1960) использовал дополнительное введение антигена подкожно с адъювантом Фрейнда. Сочетанное введение антигена внутривенно и подкожно проводили также A. Lebretti, и М. Kaplan (1956).
Схема гипериммунизации кроликов при получении сыворотки против С-реактивного белка, рекомендованная Б. Н. Грачевым (1966) в производство, предусматривает проведение 3 циклов по три ежедневных инъекции антигена в дозах в 1-м цикле по 1 мг, во 2-м — по 1,5 мг ив 3-м по 2 мг на одну инъекцию. Перерыв между циклами 4 дня. М. Me Carty (1952, 1960), С. Mac Lead, О. Avery (1941), Б. Н. Грачев (1966) вводили антиген внутривенно. Перед введением антигена во 2-м и 3-м циклах животных десенсибилизировали путем подкожной инъекции 13 дозы антигена в первый день каждого цикла. Кровопускание проводилось через 6 дней после последнего введения антигена. П. М. Пашинин (1960) кровопускал тотально через 10—12 дней.
Для повышения специфичности антисыворотки используется метод истощения ее от гетерологичных антител путем применения в качестве специфических адсорбентов смесей групповых донорских сывороток (Б. Н. Грачев, 1966).
И. Б. Фрязино)ва (1966) с целью приготовления антисыворотки к С-реактивному белку использовала морских свинок, которых гипериммунизировала острофазовым кроличьим белком. Для стимуляции антителообразования вводился адъювант Фрейнда.
Об успешном использовании ослов в качестве продуцентов антисывороток к С-реактивному белку сообщили Б. Н. Грачев с соавт. (1966), И. В. Ликина (1967). Курс иммунизации ослов включает 3 цикла по две инъекции антигена ежедневно с 5-дневным интервалом. В 1-м цикле по 2 мг, во 2-м — по 3 и в 3-м — по 4 мг. С целью десенсибилизации за 3 часа до внутривенного введения антигена вводилась 13 дозы подкожно, т. е. в 1-м цикле — по 0,7 мг, во 2-м — по 1 мг, в 3-м — по 1,3 мг. На 7-й и 9-й день животных кровопускают 1969 т.).
При изучении свойств сывороток против С-реактивного белка установлена их высокая лабильность при хранение (выпадение осадка, снижение специфических свойств). Для консервирования свойств сыворогки применили лиофилизацию с использованием в качестве наполнителя 1—3% гликокола, обеспечивающую стабильность свойств сыворотки при хранении.
Антисыворотка к С-реактивному белку выпускается в сухом и жидком виде в расфасовке, соответствующей 1 мл. Она находит все более широкое применение в медицинской практике для оценки состояния организма по наличию в крови острофазового белка, а к Сх-реактивному белку — в иммунологических и других экспериментальных исследованиях. Производство этих важных препаратов налажено и совершенствуется. 1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
50
51
52
53
54
55
56
57
58
59
60
61
62
63
64
65
66
67
68
69
70
71
72
73
74
75
76
77
78
79
80
81
82
83
84
85
86
87
88
89
90
91
92
93
94
95
96
97
98
99
100
101
102
103
104
105
106
107
108
109
110
111
112
113
114
115
116
117
118
119
120
121
122
123
124
125
126
127
128
129
130
131
132
133
134
135
136
137
138
139
140
141
142
143
144
145
146
147
148
149
150
151
152
153
154
155
156
157
158
159
160
161
162
163
164
165
166
167
168
169
170
171
172
173
174
175
176
177
178
179
180
181
182
183
184
185
186
187
188
189
190
191
192
193
194
195
196
197
198
199
200
201
202
|