Исследования в области особоопасных инфекций

Получение сыворотки против С-реактивного белка

Полученный С-реактивный белок полисахаридным или бесполисахаридным методами очищается от липоидов. С этой целью Н. Wood с соавт; (1954), П. М. Пашинин (1962) применили хлороформ. В освобожденном от липоидов виде он используется в качестве антигена для гипериммунизации животных. Б. Н. Грачев (1966) рекомендует с этой целью применять антиген, полученный бесполисахаридным методом.

При изготовлении специфической иммунной сыворотки П. М. Пашинин (1960) вводил кроликам С-реактивный белок в физиологическом растворе внутривенно по 1 мл, содержащем 3 мг белка, 3 дня подряд, после 4 дней перерыва начинался 2-й цикл. Всего автор проводил 4—5 циклов. Если титр сыворотки был невысоким, то после 30—45 дней отдыха проводилась реиммунизация. Для стимуляции антителообразования П. М. Пашинин (1960) использовал дополнительное введение антигена подкожно с адъювантом Фрейнда. Сочетанное введение антигена внутривенно и подкожно проводили также A. Lebretti, и М. Kaplan (1956).

Схема гипериммунизации кроликов при получении сыворотки против С-реактивного белка, рекомендованная Б. Н. Грачевым (1966) в производство, предусматривает проведение 3 циклов по три ежедневных инъекции антигена в дозах в 1-м цикле по 1 мг, во 2-м — по 1,5 мг ив 3-м по 2 мг на одну инъекцию. Перерыв между циклами 4 дня. М. Me Carty (1952, 1960), С. Mac Lead, О. Avery (1941), Б. Н. Грачев (1966) вводили антиген внутривенно. Перед введением антигена во 2-м и 3-м циклах животных десенсибилизировали путем подкожной инъекции 13 дозы антигена в первый день каждого цикла. Кровопускание проводилось через 6 дней после последнего введения антигена. П. М. Пашинин (1960) кровопускал тотально через 10—12 дней.

Для повышения специфичности антисыворотки используется метод истощения ее от гетерологичных антител путем применения в качестве специфических адсорбентов смесей групповых донорских сывороток (Б. Н. Грачев, 1966).

И. Б. Фрязино)ва (1966) с целью приготовления антисыворотки к С-реактивному белку использовала морских свинок, которых гипериммунизировала острофазовым кроличьим белком. Для стимуляции антителообразования вводился адъювант Фрейнда.

Об успешном использовании ослов в качестве продуцентов антисывороток к С-реактивному белку сообщили Б. Н. Грачев с соавт. (1966), И. В. Ликина (1967). Курс иммунизации ослов включает 3 цикла по две инъекции антигена ежедневно с 5-дневным интервалом. В 1-м цикле по 2 мг, во 2-м — по 3 и в 3-м — по 4 мг. С целью десенсибилизации за 3 часа до внутривенного введения антигена вводилась 13 дозы подкожно, т. е. в 1-м цикле — по 0,7 мг, во 2-м — по 1 мг, в 3-м — по 1,3 мг. На 7-й и 9-й день животных кровопускают 1969 т.).

При изучении свойств сывороток против С-реактивного белка установлена их высокая лабильность при хранение (выпадение осадка, снижение специфических свойств). Для консервирования свойств сыворогки применили лиофилизацию с использованием в качестве наполнителя 1—3% гликокола, обеспечивающую стабильность свойств сыворотки при хранении.

Антисыворотка к С-реактивному белку выпускается в сухом и жидком виде в расфасовке, соответствующей 1 мл. Она находит все более широкое применение в медицинской практике для оценки состояния организма по наличию в крови острофазового белка, а к Сх-реактивному белку — в иммунологических и других экспериментальных исследованиях. Производство этих важных препаратов налажено и совершенствуется.

1  2  3  4  5  6  7  8  9  10  11  12  13  14  15  16  17  18  19  20  21  22  23  24  25  26  27  28  29  30  31  32  33  34  35  36  37  38  39  40  41  42  43  44  45  46  47  48  49  50  51  52  53  54  55  56  57  58  59  60  61  62  63  64  65  66  67  68  69  70  71  72  73  74  75  76  77  78  79  80  81  82  83  84  85  86  87  88  89  90  91  92  93  94  95  96  97  98  99  100  101  102  103  104  105  106  107  108  109  110  111  112  113  114  115  116  117  118  119  120  121  122  123  124  125  126  127  128  129  130  131  132  133  134  135  136  137  138  139  140  141  142  143  144  145  146  147  148  149  150  151  152  153  154  155  156  157  158  159  160  161  162  163  164  165  166  167  168  169  170  171  172  173  174  175  176  177  178  179  180  181  182  183  184  185  186  187  188  189  190  191  192  193  194  195  196  197  198  199  200  201  202