|
Антиген для гипериммунизации - взвесь эритроцитов
Антигеном для гипериммунизации животных является взвесь эритроцитов, отмытых физиологическим раствором после дефибринирования. На необходимость освобождения последних от плазмы указывали еще Л. А. Тарасевич (1902), О. Helles, Е. Krumbein (1913), R. Muller (1914). Н. Eagl (1930), В. С. Калинин (1932), W. Taliaferro и L. Taliaferro (1950) для отмывания и разведения эритроцитов при изготовлении антигена использовали 0,85%-ный раствор поваренной соли. М. Mauer (1948) считает более подходящий для этой цели буферную смесь 0,1% раствора безводного углекислого натрия.
Применяемые для иммунизации эритроциты должны обладать осмотической стойкостью и не темолизироваться под влиянием физиологического раствора. Еще Ю. Финкельштейн (1911) и Л. С. Розенталь (1912) для избежания гемолиза эритроцитов не рекомендовали использовать кровь от молодых животных, так как их эритроциты имеют пониженную осмотическую стойкость. Эти же авторы и В. С. Калинин (1932) указывают, что повышение хрупкости эритроцитов может быть вызвано также частыми и обильными кровопусканиями используемых доноров. При получении эритроцитарной массы следует иметь в виду, что в антигенном отношении эритроциты различных особей неравноценны (М. Рабинович, 1912), в связи с этим для гипериммунизации кроликов их необходимо забирать от нескольких животных.
Для уменьшения перегрузки животных белковыми веществами предлагается иммунизацию проводить не цельными эритроцитами, а их оболочками (И. И. Дочкин, 1956). Это обосновывается тем, что строма и содержимое эритроцитов неравноценны в антигенном отношении, что было показано еще в 1900 г. I. Bordet на 2 группах морских свинок: прозрачный гематин, примененный для иммунизации, не вызывал, в отличие от стромы эритроцитов, образования гемолизинов. На это указывает также П. Н. Косяков (1954). Однако в производственной практике до настоящего времени применяются в качестве, антигена цельные эритроциты.
Для получения гемолитической сыворотки использовались различные места введения антигена. На значении зон рецепции при получении гемолитических сывороток впервые подробно остановился Л. А. Тарасевич (1902). Сильные гемолитические сыворотки получались им при внутрисосудистых, более слабые — при внутрибрюшинных, еще слабее — при подкожных инъекциях антигена. Однако Л. А. Тарасевич (1902) также указывал, что при внутривенной иммунизации наблюдается большой отход животных. По данным Ю. Кернера (1912), причиной гибели животных при повторных внутривенных введениях антигена является анафилактическая реакция. Для предотвращения реакции Ю. Кернер (1912), А. И. Тогунова (1923), Н. Sachs (1929), W. Foster (1957) рекомендуют вводить антиген комбинированно, например, внутривенно и подкожно, внутривенно и внутрибрюшинно. 1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
50
51
52
53
54
55
56
57
58
59
60
61
62
63
64
65
66
67
68
69
70
71
72
73
74
75
76
77
78
79
80
81
82
83
84
85
86
87
88
89
90
91
92
93
94
95
96
97
98
99
100
101
102
103
104
105
106
107
108
109
110
111
112
113
114
115
116
117
118
119
120
121
122
123
124
125
126
127
128
129
130
131
132
133
134
135
136
137
138
139
140
141
142
143
144
145
146
147
148
149
150
151
152
153
154
155
156
157
158
159
160
161
162
163
164
165
166
167
168
169
170
171
172
173
174
175
176
177
178
179
180
181
182
183
184
185
186
187
188
189
190
191
192
193
194
195
196
197
198
199
200
201
202
|