|
Методы введения антигена
В практике производства специфических сывороток используют различные методы введения антигенов. Наиболее эффективным способом иммунизации является внутривенное вливание, позволяющее в сравнительно короткий срок получить высокотитражную сыворотку. Однако при использовании этого способа, особенно при повторных циклах эксплуатации, можно столкнуться с явлениями анафилактического шока, приводящее животное к гибели. В связи с этим при изготовлении сывороток на крупных животных чаще всего предпочитают использовать другие парэнтеральные методы введения антигенов. Наибольшее внимание при этом отдается подкожному и внутримышечному способам инъецирования, получившим широкое распространение при изготовлении антитоксических и антибактериальных (В. С. Дзержговский, С. Е. Файн, А. В. Пономарев, 1927; Н. И. Власьевский, и Е. Ф. Гогин, 1934; Л. Б. Балаян, Р. Л. Шуфер, М. X. Колесников, С. К. Соколов, О. Г. Лютиков, М. И. Воробьева, 1955; П. С. Доценко, 1955; М. Г. Пономаренко, 1958; Ф. Т. Панин, 1958; Р. М. Слободской, 1959; В. Б. Фрейман, И. М. Михайлова, В. А. Омарова, А. Р. Комиссаров, 1966; 1967 и др.), а в ряде случаев и антивирусных (Г. Палавандов, 1938; D.D. Antona, Е. Falchetti, 1953; P. Devi, С. D'Silva, М. Ahua, 1956; М. А. Селимов, М. Н. Дурасова, Е. Н. Рогозин, В. Г. Раггауз, Л.И. Майорова, 1957; С. Winkler, G. Starke, 1961; Ю. В. Федоров, 1962; А. Т. Кравченко, И. М. Родин, Л. Н. Шошиев, М. И. Белякова, Н. Н. Сергеев, В. В. Тарасова, 1963; Л. А. Стрельникова, 1966 и Др.) сывороток.
Эффективность подкожного и внутримышечного методов иммунизации значительно повышается при условии применения дробного метода введения антигена одновременно небольшими дозами в различные участки тела животного с охватом возможно большего количества лимфоузлов. Указанное положение достаточно четко и на высоком научном уровне обосновано исследованиями, выполненными в лаборатории П. Ф. Здродовского (1961), где показано, что иммунные антитела образуются в клетках плазмоцитарного типа, находящихся в лимфатических узлах и селезенке, поэтому большее вовлечение их в иммунизаторный процесс способно интенсифицировать антителообразование. Дробный метод введения антигена с одинаковым успехом был применен при изготовлении противостолбнячной и противодифтерийной сывороток (3. Г. Пейсель, 1959; И. М. Моргунов, Е. Г. Дреслер,
E. С. Тюрина, 1961), сыворотки против клещевого энцефалита (Ю. В. Федоров, 1963) и ряда других видов иммунизации.
В последнее время рекомендуется (Б. Д. Долгов, 1969; К. С. Зобнина, Н. Г. Черепнева, 1969) производить гипериммунизацию лошадей-продуцентов антитоксических сывороток путем постепенного вовлечения в процесс антителообразования определенных групп лимфатических узлов различной локализации и, в первую очередь, регионарных в отношении места введения антигена. Особо благоприятные условия для нарастания антитоксина в крови продуцентов создаются при поочередном вовлечении в иммунизаторный процесс различных групп лимфатических узлов при двукратном введении антигена в течение цикла. При этом первую инъекцию анатоксина рекомендуется производить в затылочную область, краниальную и каудальную части середины боковой грудной стенки одной и той же стороны лошади. Антиген из первых двух точек поступает прежде всего в пакеты поверхностных шейных, подмышечных, заглоточных лимфатических узлов, а также в глубокие нижнешейные, расположенные у входа в грудную полость и средостенные краниальные узлы. Из третьей точки антиген проникает в надколенные, латеральные, повздошные, поверхностные и глубокие паховые лимфатические узлы.
Второе введение анатоксина осуществляется в 7—8 мест с учетом поступления его в те же лимфатические узлы. В последующем цикле антиген применяют по той же схеме, но на противоположном боку лошади.
В Томском институте вакцин и сывороток на протяжении многих лет при производстве ряда гипериммунных сывороток (противостолбнячная, противодифтерийная, противоботулиническая, против газовой инфекции, против клещевого энцефалита, антирабическая) с успехом используется иммунизация животных подкожно и внутримышечно. Последние не вызывают резких отклонений в состоянии здоровья лошадей и редко сопровождаются местными и общими реакциями.
В ряде случаев, для гипериммунизации продуцентов лечебно-профилактических сывороток рекомендуется использовать метод внутрикожного введения антигена. Чаще всего этот способ применяется при получении антирабической (R. Esquivel с соавт., 1955; Е. Fuenzalida, R. Palacios, 1964; Л. А. Стрельникова, 1966; Е. Г. Гордиенко, М. А. Курилова, Е. В. Мачинский, 1968), противополиомиелитной (М. Brodie, 1934), противодифтерийной (О. С. Филоненко, Т. П. Пресмаи, Е. В. Мачинский, 1968), противостолбнячной (Ф. А. Даниленко, Е. В. Мачинский, Р. Т. Лобза, Е. К. Томенко, В. А. Ротов, К. М. Эру, 1960), противоботулинической (С. А. Соловьева, Г. Е. Синельников, С. М. Прегер, С. С. Козыренко, М. Я. Чаунин, 1972) сывороток.
Предпринимались также попытки получения специфических сывороток при смазывании полости носа лошадей дифтерийной культурой и ее токсином (С. К. Дзержговский, 1895), введением дифтерийного антигена в трахею и гортань (П. П. Щавелев, 1910) и т. д.
Заслуживает внимания метод внутривенной гипериммунизации животных, получивший особо широкое распространение при изготовлении ряда противовирусных сывороток на крупных животных: противогриппозной (3. Г. Пейсель, 1960; Н. С. Целигорова, 1960; И. Е. Алатырцева, Г. Г. Ахмадуллина, И. С. Нагирнер, Т. И. Крюченкова, Б. Д. Долгов, 1965), противополиомиелитной (О. Г. Анджапаридзе, Р. Г. Десятскова, 1959), клещевого энцефалита (Ю. В. Федоров, Р. К. Локтионова, 1965), антирабической (Е. Fuenzalida, R. Palacios, 1964) и других, и особенно является общепризнанным при получении диагностических сывороточных препаратов. Прежде всего следует указать методы внутривенной иммунизации, применяемые при изготовлении агглютинирующих сывороток к пневмококкам и менингококкам (Г. В. Выгодчиков, 1943), лептоспирам (С. И. Тарасов,. 1938), брюшному тифу, дизентерии и другим кишечным инфекциям (Е. В. Трушина, 1931; В. В. Фрадкина, Н. Г. Шайман, 1937; Н. М. Овчинникова, 1940; М. И. Федорович, 1949), возбудителям газовой гангрены, столбняка и ботулизма (С. И. Наследышева, 1935) и др. Подобные же методы в основном используются и при изготовлении специфических гемолизинов (Л. А. Варшамова, 1925; М. И. Федорович, 1949), преципитирующих и антигемагглютинирующих (Н. Н. Мальцева, 1966, А. П. Степанова, 1973) сывороток.
В ряде случаев целесообразно применять комбинированный метод иммунизации, при котором антигены вводятся одновременно внутривенно и энтерально (R. Esquivel с соавт., 1955; В. С. Хитрова, Т. П. Жаркова, Б. М. Биркина, А. Н. Андреев, 1962; Т. С. Фейгин, Е. М. Кулак, 1968; Е. Г. Гордиенко, М. А. Курилова, Е. В. Мачинский, 1968; Е. И. Чернышева, Н. Г. Серебрянникова, О. А. Оплачко, 1969; Р. А. Аверкина, 1973).
Анализ представленного материала позволяет сделать вывод, что при производстве специфических гипериммунных сывороток можно пользоваться различными методами введения антигена. Однако наибольшее предпочтение (особенно при антитоксической и антибактериальной иммунизации) следует отдать подкожному и внутримышечному способам введения. Очень хороший эффект наблюдается при использовании внутривенного метода инъецирования антигена, однако, учитывая, что данный способ гипериммунизации иногда приводит к тяжелому анафилактическому шоку, его применение должно осуществляться с большой осторожностью и только в основном при получении диагностических сывороток преимущественно на мелких животных и в ряде случаев при изготовлении лечебно-профилактических сывороток от лошадей, иммунизированных вирусными антигенами, содержащими малое количество тканевых компонентов. 1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
50
51
52
53
54
55
56
57
58
59
60
61
62
63
64
65
66
67
68
69
70
71
72
73
74
75
76
77
78
79
80
81
82
83
84
85
86
87
88
89
90
91
92
93
94
95
96
97
98
99
100
101
102
103
104
105
106
107
108
109
110
111
112
113
114
115
116
117
118
119
120
121
122
123
124
125
126
127
128
129
130
131
132
133
134
135
136
137
138
139
140
141
142
143
144
145
146
147
148
149
150
151
152
153
154
155
156
157
158
159
160
161
162
163
164
165
166
167
168
169
170
171
172
173
174
175
176
177
178
179
180
181
182
183
184
185
186
187
188
189
190
191
192
193
194
195
196
197
198
199
200
201
202
|