Исследования в области особоопасных инфекций

Кислотно-казеиновые бульоны. Среда Вейнберга с печеночным бульоном

Использованная в Томском институте вакцин и сывороток (Г. Е. Синельников, С. А. Нестерова, С. М. Прегер, Т. В. Майорова, В. Д. Протченко, 1974) китово-кукурузная среда, приготовленная из кислотного гидролизата китовой муки и кукурузного экстракта, позволила получать высокоактивные токсины, пригодные для гипериммунизации лошадей.

Многие авторы с целью приготовления ботулинических токсинов типов А и В применяли казеиновые среды триптического перевара и кислотного гидролизата или их смеси (S.. Elberg, К. Meyer, 1939, W. Burrous, 1932; К. Lewis, E. Hill,- 1947; Ch. Rice с соавт., 1947; I. Stevenson с соавт., 1947; В. Б. Фрейман, Н. А. Ахундова, В. Д. Артеменко, 1972 и др.). В качестве ростовых факторов добавляли в бульоны кукурузный, реже дрожжевой экстракт. Последний дает менее активные токсины (К. Lewis, Е. Hill, 1947).

С. Lamanna, Н. Glossman (1947) получали токсин С1. Ьоtulinum типа В на казеиновой среде с активностью до 1 млн. Dlm/мл.

Нами (Г. Е. Синельников, С. А. Нестерова, С. М. Прегер, Т. В. Майорова, В. Д. Протченко, 1974) для культивирования Cl. botulinum типа В были использованы различные казеиновые среды (кислотно-казеиновый бульон, казеиново-панкреатический). Лучшими оказались кислотно-казеиновые бульоны.

Было показано, что токсины в культуре, приготовленные на этой среде, высокоактивны, но нестабильны: стерилизующая фильтрация приводит к потере в значительном проценте антигенных свойств. Для сохранения активности токсина нами до стерилизующей его фильтрации через фильтр Сальникова пропускался фосфатный буфер с pH 5,9. Качество антигена при этом страдало меньше.

На средах из кислотного гидролизата казеина, рыбной муки и кукурузного экстракта Т. И. Булатова, К. И. Матвеев, И. Н. Виноградова (1959) получали ботулинические токсины типов А, В, С, Е. Хорошие результаты были и при производстве токсинов В, С, Е на казеиново-грибной среде.

О. Мейзель, И. Рибицка, Г. Зеленина (1952) использовали для культивирования Cl. botulinum типа А кукурузный экстракт, порошковое молоко и глюкозу и получали сильный токсин.

Для производства ботулинического токсина типа С широко используются казеиновые среды кислотного гидролизата с кукурузным экстрактом (К. И. Матвеев, Т. И. Булатова, 19,57, 1959; Т. И. Булатова, К. И. Матвеев, И. Н. Виноградова, 1959; А. П. Маркин с соавт., 1961; Е. К. Петрова, Е. П. Лукин, 1963 и др.), реже триптического перевара (I. Stevenson с соавт., 1947). Т. И. Булатова, К. И. Матвеев, И. Н. Виноградова (1959) получали хорошей активности токсин на казеиново-грибной среде. Применялись также мясные среды, как-то: бульон Хоттингера (К. И. Матвеев, Т. И. Булатова, 1957;. 1959; Г. А. Королева, К. И. Матвеев, 3. М. Волкова, 1958; Т. И. Булатова, К. И. Матвеев, И. Н. Виноградова, 1959).

Г. А. Королева, К. И. Матвеев, 3. М. Волкова (1958) готовили антиген типа С на среде кислотного гидролизата рыбо-костной муки. Следует отметить, что на казеиновых средах образование токсина происходит более интенсивно, чем на мясных, но токсины, по данным В. К. Гольшмидта (1966), менее стабильны. Получаемые токсины на различных; бульонах имеют следующую активность: 500 тыс. — 1 млн. DLM/мл на казеиновой среде, 100—200 тыс. — на бульоне Хоттингера (К. И. Матвеев, Т. И. Булат9ва, 1959; Т. И Булатова, К. И. Матвеев, И. Н. Виноградова, 1959).

По данным A. Prevot, Е. Brygoo (1953), наилучшей средой для получения токсина Cl. botulinum типа Д является бульон Вейнберга с добавлением 1/4 части папаинового мясного фарша, 1/4 части воды и 1% глюкозы. На таком бульоне сила токсина в среднем составляла 80 тыс. Dlm/мл. Подходящей средой для культивирования типа Д является также среда Вейнберга с печеночным бульоном (К. И. Матвеев 1959).

Для производства ботулинического токсина типа Д использовали казеиновую среду триптического переваривания с кукурузным экстрактом (I. Stevenson с соавт., 1947), бульон из мясного экстракта с добавлением к нему солей хлористого кальция (Z. 1. Wentzel, М. Sterne, 1946), кукурузную среду с глицеролом и хлористым кальцием (М. Sterne, I. Wentzel, 1950).

Для получения ботулинического токсина типа Е применялись различные мясные среды (I. Gunnison с соавт., 1936; Е. Д. Кушнир, 1937; Е. Hazen, 1937; С. Dolman, D. Kerr, 1947; A. Barron, G. Reed, 1954; H. Meisel с соавт., 1964; Е. Райчев,. Н. Марчев, 1966; В. Б. Фрейман с соавт., 1966 и др.). Широкое распространение нашел бульон Мартена (В. Б. Фрейман с соавт., 1966; В. И. Чернявский, 1970; Ю. А. Шаронов, Р. А. Афанасьева, 1968; С. А. Соловьева, 1973). При этом наиболее активный токсин получают при использовании пептона в возрасте 3 месяцев. Замена при изготовлении бульона Мартена говяжьей мясной воды на конскую не ухудшило антигенности приготовленных на этой среде токсинов (С. А. Соловьева, 1972).

1  2  3  4  5  6  7  8  9  10  11  12  13  14  15  16  17  18  19  20  21  22  23  24  25  26  27  28  29  30  31  32  33  34  35  36  37  38  39  40  41  42  43  44  45  46  47  48  49  50  51  52  53  54  55  56  57  58  59  60  61  62  63  64  65  66  67  68  69  70  71  72  73  74  75  76  77  78  79  80  81  82  83  84  85  86  87  88  89  90  91  92  93  94  95  96  97  98  99  100  101  102  103  104  105  106  107  108  109  110  111  112  113  114  115  116  117  118  119  120  121  122  123  124  125  126  127  128  129  130  131  132  133  134  135  136  137  138  139  140  141  142  143  144  145  146  147  148  149  150  151  152  153  154  155  156  157  158  159  160  161  162  163  164  165  166  167  168  169  170  171  172  173  174  175  176  177  178  179  180  181  182  183  184  185  186  187  188  189  190  191  192  193  194  195  196  197  198  199  200  201  202