|
Значение вида антигена и методов его введения при антителообразовании
Антиген — это молекула, содержащая одну или несколько антигенных детерминант, способных вызывать образование антител и тесно связываться с комплементарным участком последних. Частицы с молекулярным весом менее 3000 не являются антигенами, если они не связаны с молекулами белка — «носителя» больших размеров (Г. Носсел, 1973). Величина антигена влияет на распределение его в организме. Антигенность и иммуногенность последнего зависит от способности фагоцитироваться. Вещества, не обладающие антигенными свойствами, превращаются в хорошие антигены при помощи адсорбирования на некоторых сорбентах (лучше всего в суспензии убитых микробов).
Признается, что лучшим условием антигенности молекулы вещества является жесткость структуры ее детерминантных групп. Ароматические группы, находящиеся в антигене, представляют собой центры, вокруг которых группируются боковые цепи, собственно и определяющие специфические видовые различия. Активными являются вещества, если они хотя бы частично чувствительны к гидролитическим ферментам иммунизируемого организма (У. Бойд, 1969).
Большое место в учении об антигенах заняли неспецифические стимуляторы антителообразования или адъюванты, впервые предложенные Л. Пастером (цитир. по У. Бойду, 1969), изученные достаточно широко и примененные в практике G. Ramon, который в сотрудничестве с Ch. Zeller в 1926 г. показал, что добавление к растворимому антигену (анатоксин) убитой бактериальной взвеси усиливает продукцию антитоксина (Рамон, 1962). В качестве адъювантов используется значительное количество различных веществ, в последнее время привлекли внимание бактериальные эндотоксины или их липоидные фракции.
Применение растворимых адъювантов (эндотоксины) не приводит к видимым изменениям в картине распределения антигена на ранних этапах иммунного ответа. Сложные адъюванты (полный адъювант Фрейнда) оказывают большое влияние на картину распределения и персистендию антигена в организме. Большинство адъювантов фагоцитируются макрофагами и могут оказывать на них выраженный цитотоксический эффект (Доклад научной группы ВОЗ, 1971).
Получены результаты, объясняющие механизм действия адъювантов при иммуногенезе. Стимуляция продукции антител происходит на фоне общей активности белкового синтеза и активации эндогенных факторов, способствующих этому процессу и иммуногенезу (П. Ф. Здродовский, 1964; И. Я. Учитель и Э. Л. Хасман, 1967) и, по-видимому, относится к воздействию на индуктивную фазу образования антител. Повышается проницаемость лизосомных мембран и способность освобождать антигенные детерминанты (И. Я. Учитель, 1970). Имеются также указания на то, что адъюванты влияют усиливающим образом на пролиферацию иммунокомпетентных клеток (S. Gray, Н. Sterling, 1950; I. Spitznage, A. Alison, 1970), увеличивают скорость антигенного катаболизма (I. Stark, 1970) и способствуют задержке антигенного материала в фаголизосомной фракции макрофагов (М. Е. Бубашвили, 1973). Имеются указания (В. М. Земсков, 1970), что применение адъювантов типа Фрейнда и бактериальных эндотоксинов усиливает разрушение клеток тканей на месте их введения и при этом высвобождаются ДНК, РНК и продукты их гидролиза.
Эти вещества стимулируют антителообразование. В опытах на белых мышах было показано (В. М. Земсков, 1972), что профилактическое введение различных препаратов РНК сопровождается значительным усилением у животных неспецифической противоинфекционной резистентности по отношению Segui. Последняя формируется уже через 4 часа после введения РНК. Усиливается иммуногенность биопрепаратов (анатоксины) при комплексировании их с РНК. Подтверждением этой роли эндогенных нуклеиновых кислот являются наблюдения по использованию экзогенной рибонуклеазы, усиливающей биосинтез антител как in vivo, так и in vitro. В последнее время появились исследования по применению в качестве адъювантов синтетических полинуклеотидов (W. Braun, М. Ichizuka, 1971) при образовании антител. Авторы считают, что главными мишенями стимуляции были лимфоциты или макрофаги. Этот эффект может быть потенцирован путем конкурентного введения теофилина или кофеина. Потенциация более эффективна при подкожном введении, и стимуляция выражается как в активации антителообразующих клеток, так и в титрах циркулирующих антител. Предлагается использовать нетоксичные комбинации полинуклеотидов с небольшими количествами теофилина в практике в связи с тем, что этот метод является лучшим для стимуляции иммуногенеза.
Имеются указания, что на количество и тип синтезируемых антител влияют доза и пути введения антигена. При прочих равных условиях эффект первичной иммунизации зависит от примененной дозировки, антигена и кратности прививок. При введении больших доз антигена образуются антитела с низким аффинитетом, и их синтез продолжается в течение длительного периода времени. Уменьшая дозу, можно подобрать такую, которая будет индуцировать образование высокоафинных антител. При однократной иммунизации нарастание эффекта не идет пропорционально увеличению дозы, он отстает и за известными пределами становится очень незначительной или прекращается, несмотря на дальнейшее увеличение дозировки. Повторное введение антигена позволяет более эффективно воспроизводить иммунитет. Решающее значение имеет правильно расстановленное антигенное раздражение во времени (П. Ф. Здродовский, 1950). Способ введения антигена в определенной степени отражается и на локализации образования антител. Если последний вводится таким образом, что он ограничен в определенной части организма, то антитела образуются на месте инъекции и в регионарном лимфатическом узле (У. Бойд, 1969). Так, для корпускулярных антигенов более интенсивный ответ наблюдается при внутривенном и виутрибрюшинном введении, в то время как пищевой и дыхательный пути применения антигенов приводят к избирательному накоплению IgA (Доклад научной груплы ВОЗ, 1971).
Представленные материалы показывают, что при иммуногенезе имеют значение химический состав и молекулярный вес антигена, методы его введения в организм. Приведены дополнительные материалы по объяснению механизма действия адъювантов, так широко применяемых в практике гипериммунизации животных и вакцинации человека. 1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
50
51
52
53
54
55
56
57
58
59
60
61
62
63
64
65
66
67
68
69
70
71
72
73
74
75
76
77
78
79
80
81
82
83
84
85
86
87
88
89
90
91
92
93
94
95
96
97
98
99
100
101
102
103
104
105
106
107
108
109
110
111
112
113
114
115
116
117
118
119
120
121
122
123
124
125
126
127
128
129
130
131
132
133
134
135
136
137
138
139
140
141
142
143
144
145
146
147
148
149
150
151
152
153
154
155
156
157
158
159
160
161
162
163
164
165
166
167
168
169
170
171
172
173
174
175
176
177
178
179
180
181
182
183
184
185
186
187
188
189
190
191
192
193
194
195
196
197
198
199
200
201
202
|