Применение живого не инактивированного вируса
Согласно производственному регламенту, применяют антиген, приготовленный из гомогенизированного головного мозга кролика или овцы, инфицированных фиксированным вирусом бешенства. К измельченному мозгу добавляется дистиллированная вода, содержащая в качестве консерванта 0,5% фенола до получения 10%-ной мозговой суспензии. Последняя готовится в день вскрытия животных без предварительного замораживания мозгов. Разрешается использовать для иммунизации стерильный антиген, сохранявшийся при температуре 4° не более 14 дней.
В Томском институте вакцин и сывороток были проведены наблюдения (Л. А. Стрельникова, 969) по применению живого не инактивированного вируса при иммунизации лошадей. С этой целью инфицированные мозги кроликов тщательно промывали в фенолизированной воде (0,5—1% фенола) и суспензировали в дистиллированной воде без фенола, что позволяло сохранить титр вируса в пределах от 166 до 107 LD50 при внутримозговом заражении белых мышей. Под наблюдением находились 22 лошади улучшенной казахской породы в возрасте 3—6 лет. До антирабической иммунизации 20 животных в течение 1—13 циклов получали столбнячный дли дифтерийный анатоксины. К моменту перевода на введение свежего антигена все лошади прошли от 4 до 13 циклов эксплуатации. На протяжении 10 циклов иммунизации все продуценты переносили введение свежего антигена спокойно без какий-либо местных и общих реакций.
Если суммировать все циклы эксплуатации 22 лошадей с применением свежего антигена, то после 188 циклов было получено 1700 л сыворотки с активностью выше 1:2000. У отдельных лошадей титр достигал 1:5000—1:10000.
Подобные же результаты были установлены и при более раннем (после 1—2 циклов) переводе животных с иммунизации инактивированным фенолом, фиксированным вирусом бешенства, на применение свежего антигена.
При анализе специфической активности сыворотки 31 лошади также показано нарастание титра антител.
В результате длительного наблюдения на протяжении 4—24 циклов в состоянии животных не было отмечено каких-либо нарушений, связанных с процессом иммунизации.
Предпринимались попытки получения антирабической сыворотки путем гипериммунизации лошадей очищенным от мозговой ткани антигеном. Так, В. Я. Ротовский (1967) сообщил о возможности изготовления высокоактивной сыворотки путем введения мозгового вируссодержащего антигена, но очищенного от ткани мозга. Это достигалось при выдерживании 5%-ной мозговой суспензии в течение 48 часов при 4°. При этом происходило разделение мозговой взвеси на 3 слоя: верхний, состоящий из протеолипидов, нижний — осадок мозговой ткани и средний, практически свободный от нее. Этот слой использовался в качестве антигена. Наблюдения показали, что иммунизация животных позволяет уже после 1-го цикла получить сыворотку, содержащую вируснейтрализующие антитела в титре 1:2750—1:6400. В то же время введение лошадям обычной 10%-ной вируссодержащен суспензии мозга обеспечивало выработку антител только в титре не выше 1:1200. После проведения 7 циклов гипериммунизации титр антител в опытной группе достиг 1:8500— 1:10300, а в контрольной — 1:2780. Вместе с тем оказалось, что применение очищенных антигенов, полученных из мозговой ткани животных, не устраняет полностью выработку нейротоксинов. 1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
50
51
52
53
54
55
56
57
58
59
60
61
62
63
64
65
66
67
68
69
70
71
72
73
74
75
76
77
78
79
80
81
82
83
84
85
86
87
88
89
90
91
92
93
94
95
96
97
98
99
100
101
102
103
104
105
106
107
108
109
110
111
112
113
114
115
116
117
118
119
120
121
122
123
124
125
126
127
128
129
130
131
132
133
134
135
136
137
138
139
140
141
142
143
144
145
146
147
148
149
150
151
152
153
154
155
156
157
158
159
160
161
162
163
164
165
166
167
168
169
170
171
172
173
174
175
176
177
178
179
180
181
182
183
184
185
186
187
188
189
190
191
192
193
194
195
196
197
198
199
200
201
202
|