Титрование по Эрлиху, Ремеру и Рамону
Противодифтерийная сыворотка является антитоксической, и специфичность ее определяется титром антитоксина, который может выявляться методом Эрлиха, Ремера и Рамона.
За антитоксическую единицу принимается то минимальное количество сыворотки, которое обезвреживает 100 смертельных доз (Limes-tod-Lt) дифтерийного токсина для морской свинки весом 250 г.
При титровании по Эрлиху различные разведения сыворотки смешиваются с Lt токсина и вводятся подкожно морской свинке. Максимальное разведение сыворотки, при котором последняя выживает, определяет титр антитоксина.
При титровании по Ремеру различные разведения сыворотки смешиваются с одной минимальной некротической дозой токсина (Ln), - смесь в объеме 0,1 мл выводится внутрикожно в депилированную кожу морской свинки. Титр сыворотки определяется максимальным ее разведением, которое в смеси с Ln не образует некроза кожи.
Титрование по Рамону основано на способности токсина-анатоксина в смеси с антитоксической сывороткой давать осадок флокулят. Реакция в пробирке, в которой 1 ME сыворотки быстрее всего соединяется с токсином, называется инициальной и обозначается lit а время ее протекания т.
Последнее зависит от ряда факторов, в том числе от консерванта: флокуляция сывороток с хлороформом наступает медленнее, чем с мертиолятом (Л. Б. Балаян, Р. Л. Шуфер, 1960).
Из других методов оценки титра сыворотки можно указать на реакцию кольцепреципитации (Э. Ю. Ген с соавт., 1925; Э. Ю. Ген, Я. К. Гиммельфарб, 1934; И. С. Рубенштейн, Е. М. Рабинович, 1937).
Широко используется титрование по Рамону для контроля этапов производства противодифтерийной сыворотки и титрование по Ремеру при окончательном ее выпуске.
Л. Б. Балаян с соавт. (1968) показали, что при использовании точно вытитрованных стандартных препаратов результаты титрования дифтерийного антитоксина по методу Ремера (без запаса) и Рамона совпадают практически полностью. Готовый препарат выпускается с титром, определенным в реакции нейтрализации на морской свинке по методу Ремера, с запасом антитоксина. Для чего титр сыворотки устанавливается по наибольшему ее разведению, которое в смеси с опытной дозой токсина не дает реакции на месте введения.
Сыворотка выпускалась в очищенном и концентрированном методом Диаферм-3 ИЭМ АМН СССР виде. Следует отметить большую стойкость дифтерийного антитоксина (В. Г. Краснова, 1954; Л. Б. Балаян с соавт., 1959).
Противодифтерийная сыворотка применяется для лечения дифтерии, для чего больному вводят внутримышечно 5—15 тыс. ME в возможно более ранние сроки болезни. При тяжелой токсической форме дифтерии, а также запущенных случаях — до 30—50 тыс. ME одномоментно. В дальнейшем повторяют применение ее с учетом клинического течения болезни. 1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
50
51
52
53
54
55
56
57
58
59
60
61
62
63
64
65
66
67
68
69
70
71
72
73
74
75
76
77
78
79
80
81
82
83
84
85
86
87
88
89
90
91
92
93
94
95
96
97
98
99
100
101
102
103
104
105
106
107
108
109
110
111
112
113
114
115
116
117
118
119
120
121
122
123
124
125
126
127
128
129
130
131
132
133
134
135
136
137
138
139
140
141
142
143
144
145
146
147
148
149
150
151
152
153
154
155
156
157
158
159
160
161
162
163
164
165
166
167
168
169
170
171
172
173
174
175
176
177
178
179
180
181
182
183
184
185
186
187
188
189
190
191
192
193
194
195
196
197
198
199
200
201
202
|