Исследования в области особоопасных инфекций

Титрование по Эрлиху, Ремеру и Рамону

Противодифтерийная сыворотка является антитоксической, и специфичность ее определяется титром антитоксина, который может выявляться методом Эрлиха, Ремера и Рамона.

За антитоксическую единицу принимается то минимальное количество сыворотки, которое обезвреживает 100 смертельных доз (Limes-tod-Lt) дифтерийного токсина для морской свинки весом 250 г.

При титровании по Эрлиху различные разведения сыворотки смешиваются с Lt токсина и вводятся подкожно морской свинке. Максимальное разведение сыворотки, при котором последняя выживает, определяет титр антитоксина.

При титровании по Ремеру различные разведения сыворотки смешиваются с одной минимальной некротической дозой токсина (Ln), - смесь в объеме 0,1 мл выводится внутрикожно в депилированную кожу морской свинки. Титр сыворотки определяется максимальным ее разведением, которое в смеси с Ln не образует некроза кожи.

Титрование по Рамону основано на способности токсина-анатоксина в смеси с антитоксической сывороткой давать осадок флокулят. Реакция в пробирке, в которой 1 ME сыворотки быстрее всего соединяется с токсином, называется инициальной и обозначается lit а время ее протекания т.

Последнее зависит от ряда факторов, в том числе от консерванта: флокуляция сывороток с хлороформом наступает медленнее, чем с мертиолятом (Л. Б. Балаян, Р. Л. Шуфер, 1960).

Из других методов оценки титра сыворотки можно указать на реакцию кольцепреципитации (Э. Ю. Ген с соавт., 1925; Э. Ю. Ген, Я. К. Гиммельфарб, 1934; И. С. Рубенштейн, Е. М. Рабинович, 1937).

Широко используется титрование по Рамону для контроля этапов производства противодифтерийной сыворотки и титрование по Ремеру при окончательном ее выпуске.

Л. Б. Балаян с соавт. (1968) показали, что при использовании точно вытитрованных стандартных препаратов результаты титрования дифтерийного антитоксина по методу Ремера (без запаса) и Рамона совпадают практически полностью. Готовый препарат выпускается с титром, определенным в реакции нейтрализации на морской свинке по методу Ремера, с запасом антитоксина. Для чего титр сыворотки устанавливается по наибольшему ее разведению, которое в смеси с опытной дозой токсина не дает реакции на месте введения.

Сыворотка выпускалась в очищенном и концентрированном методом Диаферм-3 ИЭМ АМН СССР виде. Следует отметить большую стойкость дифтерийного антитоксина (В. Г. Краснова, 1954; Л. Б. Балаян с соавт., 1959).

Противодифтерийная сыворотка применяется для лечения дифтерии, для чего больному вводят внутримышечно 5—15 тыс. ME в возможно более ранние сроки болезни. При тяжелой токсической форме дифтерии, а также запущенных случаях — до 30—50 тыс. ME одномоментно. В дальнейшем повторяют применение ее с учетом клинического течения болезни.

1  2  3  4  5  6  7  8  9  10  11  12  13  14  15  16  17  18  19  20  21  22  23  24  25  26  27  28  29  30  31  32  33  34  35  36  37  38  39  40  41  42  43  44  45  46  47  48  49  50  51  52  53  54  55  56  57  58  59  60  61  62  63  64  65  66  67  68  69  70  71  72  73  74  75  76  77  78  79  80  81  82  83  84  85  86  87  88  89  90  91  92  93  94  95  96  97  98  99  100  101  102  103  104  105  106  107  108  109  110  111  112  113  114  115  116  117  118  119  120  121  122  123  124  125  126  127  128  129  130  131  132  133  134  135  136  137  138  139  140  141  142  143  144  145  146  147  148  149  150  151  152  153  154  155  156  157  158  159  160  161  162  163  164  165  166  167  168  169  170  171  172  173  174  175  176  177  178  179  180  181  182  183  184  185  186  187  188  189  190  191  192  193  194  195  196  197  198  199  200  201  202