|
||
|---|---|---|
|
|
К вопросу об иммунизации лошадей очищенным дифтерийным анатоксином
Целесообразно гипериммунизировать лошадей — продуцентов антитоксических сывороток очищенными анатоксинами потому, что они содержат меньше балластных белков, конкурирующих со специфическим антигеном. Кроме того, после очистки и концентрации легче вводить массовые дозьг антигена, что способствует получению сывороток высокого титра. Однако ряд исследований показал, что гипериммунизация очищенными анатоксинами не имеет особых преимуществ перед обычной методикой получения антитоксических сывороток (Д. И. Захарина и др., Э. 3. Рахман). В данной работе мы попытались испробовать внутрикожный метод иммунизации очищенным и концентрированным дифтерийным анатоксином. При этом мы предполагали, что при внутрикожном введении антиген по лимфатическим путям попадает в лимфоузлы, где сосредоточены клетки, играющие основную роль в иммуногенезе (Л. А. Зильбер), в большей степени, чем при подкожном введении. Помимо этого, мы интересовались особенностями процесса очистки антитоксической плазмы, полученной при иммунизации очищенным дифтерийным анатоксином. Эта сторона вопроса представляет большой интерес в связи с работами Попе с сотрудниками. Попе и Стивенс высказали мысль, что в препаратах очищенных противодифтерийных сывороток все белки являются антителами и лишь небольшая часть из них специфическим антитоксином. Эти неспецифические антитела можно удалить взаимодействием очищенного дифтерийного антитоксина с фильтратом бульонной культуры дифтерийной палочки, выросшей при избытке железа в среде, что тормозит токсинообразование, но не влияет на продукцию балластных белков. С помощью этого приема Попе и Стивенс получили дифтерийный антитоксин с рекордной степенью очистки — 210 000 АЕ/г белка, однако их методика настолько сложна, что не имеет производственного значения. Мы предположили, что иммунизация лошадей очищенным дифтерийным анатоксином позволит получать антисыворотки с меньшим содержанием балластных антител, и, следовательно, при их концентрации можно будет добиться более высокой степени очистки. В опыт мы взяли две лошади, предварительно грундированные нативным дифтерийным анатоксином за один месяц до начала иммунизации; одна из них перед иммунизацией имела сравнительно высокий титр — 101 АЕ/мл (№ 327), а другая — низкий — 57 АЕ/мл (№ 333). Контролем служили две лошади из той же партии с близкими титрами: 120 АЕ/мл (№ 336) и 68 АЕ/мл (№ 339). Концентрированный дифтерийный анатоксин получался из нативного препарата (штамм Парк-Вильямс 8, бульон Мартена) путем осаждения последовательной комбинацией соляной и трихлоруксусной кислоты. В 1 мл препарата содержалось 340 АЕ, очистка равнялась 830 АЕ/мг азота. В каждое место инъекции водилиось внутрикожно по 0,2 мл антигена. Две контрольные лошади получали нативный анатоксин в десятикратном объеме, так что общее количество антигенных единиц, полученное каждой лошадью, было примерно одинаковым. В первом цикле иммунизации каждая лошадь иммунизировалась семь раз с интервалами через четыре дня, в последующих циклах антиген вводился по три раза. Кровопускания производились через 5—7 дней после последней инъекции, между циклами лошадям давался отдых по две недели (табл. 1). Как видно из табл. 1 внутрикожная иммунизация концентрированным анатоксином не дала никаких преимуществ перед обычной методикой. Интересно, что лошади с более высоким титром после грундирования дали в первом цикле малоактивные сыворотки и были выбракованы. 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 |
|
|
|
||
