Исследования в области особоопасных инфекций

Реакция связывания комплемента при амебиазе

Таблица - 1. РСК у животных, иммунизированных амебными антигенами

Р. А. Карповская, Д. P. Ахмедова, Л. М. Мевзос, М. И. Пыжова при участии Г. М. Гинзбург (ТашгорСЭС)

Амебная дизентерия встречается не часто при заболеваниях кишечника в Средней Азии. По данным некоторых па разитологов, клиницистов (В. Г. Гнездилов, 1937, М. 3. Лейт май, Л. И. Рогова и К. Д. Буров, 1939, А. А. Аскаров, 1957 и др.), она составляет от 4 до 8% в группе хронических кишечных расстройств. Однако в лечебных учреждениях диагноз этого заболевания ставится исключительно редко. Главной причиной неудовлетворительной диагностики кишечного амебиаза является то, что лабораторные работники недоста точно знакомы, а иногда и вовсе не знакомы с морфологией и биологией всей группы амеб, встречающихся в кишечнике человека.

Еще хуже обстоит дело с диагностикой амебиаза печени который очень часто осложняется абсцессами, требующим хирургического вмешательства и нередко заканчивающими летально. Поэтому разработка иммуннобиологических методов диагностики амебиаза очень актуальна.

Крэг в 1928 г. сообщил, что в сыворотке у больных амебиазом имеются комплементсвязывающие антитела. Однак проверка РСК, проведенная автором у больных амебиазом и здоровых людей, показала недостаточную ее специфичность. После этого значение РСК для диагностики амебиаза исследовалось в различных странах различными авторами. Можно указать на работу Meleney and Trye, 1937; Craig.1937 Magath and Meleney 1940; Bozicevich, Reardon and Jones 1942: Chosh N., N.,Chosh H. and Ray, 1948.

В Советском Союзе РСК была проверена в 1936 г М. 3. Лейтман. В большинстве проведенных исследований отмечалась недостаточная специфичность реакции, особенно при хронических формах кишечного амебиаза, и высказывались пожелания о ее дальнейшей разработке и усовершенствовании. Учитывая все это, мы решили применить РСК для диагностики у больных амебиазом после предварительной проверки ее на экспериментальных животных (табл. 1).

Антигены для РСК были приготовлены из четырёх штаммов дизентерийной амебы. Из них А-2 и Л-21 выделены в различное время от больного амебной дизентерией и абсцессом печени, А-3 — от больной острой амебной дизентерией и 19 — от бессимптомного носителя. Все штаммы культивировались на среде Павловой с пенициллином (1000 ед. в 1 мл) с пересевами три раза в неделю.

В штамме А-3 после 12 последовательных пересевов на среду с пенициллином бактерии погибли, за исключением одного вида из группы b. paracoll; микрофлора штаммов А-2, А-21 и 19 состояла из нескольких видов бактерий.

Основную взвесь амеб для приготовления антигенов мы получали путем отстаивания и промывания культур в больших вогнутых часовых стеклах диаметром 7—8 см. Амебы, взвешенные в жидкости, обычно оседают на дно в течение нескольких минут и довольно плотно прилипают к стеклу. Если после этого быстро перевернуть стекло, то жидкость выливается, а основная масса амеб вместе с зернышками крахмала и частью бактерий остается на стекле в его центральной части. Добавляя к этому осадку свежую порцию физиологического раствора и повторяя процедуру отстаивания 2—3 раза, можно добиться значительного обогащения взвеси амебами и относительной очистки ее от бактерий. Водные антигены готовились путем повторного замораживания и отстаивания основной амебной взвеси в рефрижераторе и консервирования мертиолатом. Для приготовления спиртовых антигенов к основной амебной взвеси добавлялось четырехкратное количество спирта; эта смесь выдерживалась в термостате при температуре 37° в течение двух недель.

Для каждого амебного антигена был приготовлен соответствующий контрольный бактерийный антиген из сопутствующей микрофлоры амебного штамма. Рабочие дозы антигенов были от 0,01 До 0,0025; реакция ставилась в объеме 1,0 мл холодным методом.

Результаты предварительной проверки РСК приготовленными антигенами на сыворотках иммунизированных животных представлены в табл. 1. Восемь кроликов получили трехкратные внутривенные вливания по 1 мл амебного антигена с промежутками в семь дней. Кровь для РСК бралась в сроки от десяти дней до трех месяцев. Всего было поставлено десять реакций от иммунизированных кроликов. В пяти из них отмечалась задержка гемолиза в контроле даже с двойной дозой комплемента. В остальных пяти реакциях, где не было задержки в контроле, результаты были явно положительными.

1   2   3   4   5   6   7   8   9   10   11   12   13   14   15   16   17   18   19   20   21   22   23   24   25   26   27   28   29   30   31   32   33   34   35   36   37   38   39   40   41   42   43   44   45   46   47   48   49   50   51   52   53   54   55   56   57   58   59   60   61   62   63   64   65   66   67   68   69   70   71   72   73   74   75   76   77   78   79   80   81   82   83   84   85   86   87   88   89   90   91   92   93   94   95   96   97   98   99   100   101   102   103   104   105   106   107   108   109   110   111   112   113   114   115   116   117   118   119