Исследования в области особоопасных инфекций

Опыты по интраназальному заражению морских свинок суспензией фекалий зараженных клещей-имаго

Нами поставлено 14 опытов по интраназальному заражению морских свинок суспензией фекалий зараженных клещей-имаго. В части опытов использованы свежие фекалии. В одном опыте взят материал сроком хранения в 225 дней (причем 180 дней — при температуре + 4°С и 45 дней — при температуре + 35° и +25°С). В других опытах использованы фекалии различной длительности хранения при различных температурных условиях. Разовая доза фекалий, взятых для заражения, колебалась от 0,02 до 0,000016 г. В опытах использовано 28 морских свинок по 2 морские свинки на каждый опыт. Свинки, взятые в работу, наблюдались в течение шести—восьми недель. В течение четырех недель их термометрировали, и трехкратно, через четыре—шесть—восемь недель, исследовали кровь в РСК, с применением длительного связывания (18—20 часов) при температуре +4°С, со специфическим антигеном.

Реакцию считали положительной в том случае, если задержка, гемолиза была не меньше, чем на три креста (+++)

У девяти морских свинок наблюдалась лихорадка, наступившая в разное время после заражения (от 2 до 24 дней), с длительностью до 6—8 дней. Температура максимально поднималась до 37,7° — 39,8°; только у одной морской свинки лихорадка была в пределах + 40,1 °С и наступила на 7-й день после заражения. Из двух взятых в каждый опыт морских свинок одна оставлялась для выявления в крови антител со специфическим для Ку-лихорадки антигеном, другая свинка вскрывалась на высоте лихорадки, если она наступала. Если же заболевание протекало инапарантно — вскрытие производилось на 10—11-й день после заражения животного.

Учитывались патологоанатомические изменения в органах и производилось микроскопическое исследование мазков из пораженных участков легких. В асептических условиях готовили 10-процентную суспензию из воспаленных участков легких и этой суспензией заражались внутрибрюшинно по 1,5 мл две здоровые морские свинки. Мазки обычно фиксировались на огне и красились по методу П. Ф. Здродовского.

Ни водном случае при микроскопии мазков из легких риккетсии не были найдены. У восьми морских свинок, оставленных для выявления специфических антител в сыворотке крови, была положительная РСК в титрах 180—1640. В каждом из 14 опытов проведено от 1 до 7 пассажей и использованы при этом 92 морские свинки. Начиная со второго пассажа материалом для заражения служили селезенка и тестикулы.

В результате 68 пассажных морских свинок дали лихорадку, достигавшую в отдельных случаях температуры 40,7°С, причем лихорадка наступала зачастую через 4—15 дней после заражения и длилась 4—17 дней. Патологоанатомическая картина большинства вскрываемых пассажных морских свинок была типичная для Ку-лихорадки (полнокровие внутренних органов, увеличение и дряблость печени, селезенки).

У 15 морских свинок при серологическом исследовании сыворотки крови была положительная РСК в титрах 140— 1320. В 10 опытах из 14 получено тестикулярное накопление риккетсий. В отдельных опытах тестикулярное накопление риккетсий получено с первого пассажа. Считаем необходимым остановиться на одном интересном опыте, где течение заболевания было довольно атипичным при массивной генерализованной инфекции.

Опыт IV серия Г. Для заражения взяты свежие фекалии. Две морские свинки заражались интраназально по 0,02 г. Одна из опытных морских свинок пала на 4-й день после заражения. На секции — тотальная двухсторонняя пневмония. В мазке из легких — пневмококки.

Вторая свинка пала на 7-й день после заражения. На вскрытии — двухсторонняя пневмония, в мазках из пораженных участков легких — единичные риккетсии.

10 процентной суспензией легких второй морской свинки с прибавлением пенициллина заражены внутрибрюшиннс по 1,0 мл и одновременно тестикулярно по 0,5 мл две здо ровые морские свинки. Одна из пассажных морских свинок пала на 6-й день после заражения. На секции — в легких изменений нет. Печень, селезенка и яички резко атрофичны, сосуды яичек инфицированы, поверхность синюшна. Под tunica vaginalis propria незначительное количество эксудативной жидкости. В мазках из соскоба с внутренней поверхности tunica vaginalis propria масса риккетсий, расположенных, как внутри, так и внеклеточно.

Во избежание гибели, другая свинка на 6-й день после заражения вскрыта. Патологоанатомические изменения подобны изменениям предыдущей свинки, только паренхиматозные органы менее атрофичны. В мазках из эксудата собственной влагалищной оболочки яичек — масса риккетсий. Устойчивость риккетсий Бернета к глицерину была использована для сохранения вируса. Селезенка и яички помещены в пробирку с 50-процентным глицерином при температуре +4°С.

Таким образом, перед нами генерализованный Ку-риккетсиоз, без выраженной лихорадки и с нетипичной для Ку-лихорадки патологоанатомической картиной.

Параллельно основным опытам поставлены восемь контрольных опытов на 16 морских свинках. Метод заражения и дозировка были те же, что и в основных опытах, только материал вводился тестикулярно.

В четырех опытах у восьми морских свинок была отмечена лихорадка до 39,6°С, с длительностью в 4—5 дней. У остальных морских свинок температура держалась в пределах нормы. У двух морских свинок при исследовании крови на наличие специфических антител к антигену из R. burneti была положительная РСК в титрах 1/80 - 1/1280. Одна из морских свинок каждого опыта на высоте температурной кривой или на 10—11-й день после заражения вскрывалась, и 10-процентной суспензией из селезенки и яичек тестикулярно заражались две здоровые морские свинки.

В каждом опыте проведено от одного до шести пассажей. Всего в пассажах использованы 52 морские свинки. Из них 32 морские свинки дали лихорадку, при этом температура достигала в отдельных случаях 40,6°С. Лихорадка наступала на 4—10-й день после заражения.

В четырех опытах получено тестикулярное накопление риккетсий уже в первых пассажах и только в юдном опыте накопление риккетсий в testis получено на шестом пассаже. У 10 пассажных морских свинок была положительная РСК в титрах 1/160-1/1280.

Таким образом, проделанной нами работой установлено:

1. Устойчивость R. burneti, находящихся в фекалиях зараженных клещей Rh. turanicus, до 225 дней хранения (срок наблюдения), в различных температурных условиях.

2. Высокая инфективность фекалий клещей-имаго Rh. tur anicus, ранее кормленных на зараженных R. burneti морски свинках.

3. Возможность интраназального заражения морскю свинок фекалиями зараженных клещей-имаго Rh. turanicus в условиях эксперимента, такими малыми дозами, как 0,000016 г фекалий.

Литература

Земская А. А. Гамазовые клещи в очаге Ку-лихорадки в районе залежных и целинных земель Северного Казахстана. В кн. «Девятое совещание по паразитологическим проблемам. М.Л., 1957.

Кулагин. М., Зубкова Р.И. Материалы к эпидемиологии Ку-лихорадки. ЖМЭИ, 1955, № 6, Кулагин С. М., Соколова Н. Ф. К вопросу обезвреживания различных объектов, инфицированных возбудителем Ку - лихорадки. ЖМЭИ, 1956, № 11.

Лысункина В. А. Выступление на научно-практической конференции по риккетсиозам в Москве V 1956 г.

Олсуфьев Н. Г. К методике лабораторного разведения иксодовых клещей. Медицинская паразитология и паразитарные болезни, 1941, № 3—4, т. X, М.

Поспелова-Штром М. В. К методике кормления клешей Ixodidae в лаборатории. Медицинская паразитология и паразитарные болезни, 1941, №. 3—4, т. X, М.

Тарасевич И. В. К изучению переносчиков Ку-лихорадки в очаге О. ЖМЭИ, 1955, Ж .6.

Robins, F. С., Rustigian, R. Реф. Trop. DIs. Bull. 1947, v, 44, № 7.

Philip, С. B. J. Parasitology, 1948, v. 34, № 6.

Blans, G. и др. Реф. Trop. Dis. Bull, 1948, v. 45, № 10.

Jellissоn, W. L., Hubner, R. J. и др. Реф. Trop. Dis. Bull. 1949, v. 46, № 4.

Hubner. R. J. и др. Publ. Health, Rep. Wash. 1949, Apr. 22, v. 64, № 16. Lennette, E. hL и др Реф. Trop. Dis. Bull. 1952, v. 48, № 8.

1   2   3   4   5   6   7   8   9   10   11   12   13   14   15   16   17   18   19   20   21   22   23   24   25   26   27   28   29   30   31   32   33   34   35   36   37   38   39   40   41   42   43   44   45   46   47   48   49   50   51   52   53   54   55   56   57   58   59   60   61   62   63   64   65   66   67   68   69   70   71   72   73   74   75   76   77   78   79   80   81   82   83   84   85   86   87   88   89   90   91   92   93   94   95   96   97   98   99   100   101   102   103   104   105   106   107   108   109   110   111   112   113   114   115   116   117   118   119