Исследования в области особоопасных инфекций

Получение вакцины из круглых вариантов бактерий Зонне

Таблица 2. Реакции адсорбции сывороток вариантами бактерий Зонне

Для получения вакцины из круглых вариантов применялась методика, рекомендованная Геронимусом. По этой методике свбжевыделенный штамм бактерий Зонне засевался на агаровые пластинки, откуда через 24 часа, под контролем лупы, отвивались круглые формы колоний на мясо-пептонный бульон при рН=7,4. Через 18 часов верхний слой бульонной культуры переносился на агар Хоттингера. Полученная таким методом первая генерация культуры принималась нами за круглый вариант.

Для вакцины из плоского варианта и шероховатого штамма мы использовали суточные агаровые культуры из тщательно отобранных с помощью лупы колоний и проверенных по вышеуказанным тестам.

Полученными вакцинами иммунизировались кролики четырехкратно, а при получении сывороток к R-формам — шестикратно в возрастающих дозах: 250 млн., 500 млн., 750 млн., 1 млрд., 2 млрд, 4 млрд. микробных тел с интервалом в 3—4 дня. Сыворотки против круглых и плоских вариантов имели титры в пределах 1 : 3200, 1 : 6400. Титры сывороток против шероховатых форм колебались от 1 :800 до 1 : 3200.

Характер агглютинации вариантов с полученными сыворотками был различным. Круглые и плоские варианты с одноименной сывороткой давали яркую, крупнохлопчатую агглютинацию.

R-штаммы с сывороткой против шероховатых форм агглютинировались, давая мелкозернистую агглютинацию, учитывающуюся только с помощью агглютиноскопа.

Антигенные и серологические свойства вариантов бактерий Зонне изучались в прямых, перекрестных реакциях агглютинации и реакциях адсорбции по Кастелляни.

Антигенами для серологических реакций служили взвеси из тщательно отобранных с агаровых пластинок колоний круглых и плоских форм, и, кроме того, смывы со скошенного агара, состоящие только из колоний R-форм. Отбор вариантов проводился с учетом теста на трипафлавин и оседание в физиологическом растворе после прогревания. Всего было изучено 23 круглых, столько же плоских вариантов и 18 шероховатых (К) форм (табл. 1). Результаты опытов прямых, перекрестных реакций агглютинации с круглыми, плоскими и шероховатыми формами бактерий Зонне представлены в табл. 1

Как видно из табл. 1, все круглые варианты агглютинировались как одноименной сывороткой, так и сывороткой против плоских вариантов. Причем высота титров агглютинации как с той, так и с другой сыворотками была преимущественно в пределах от 1/2 до 1/4 титра. Однако с сывороткой против круглых вариантов восемь штаммов агглютинировались до Т, с сывороткой же против плоских форм в таких высоких разведениях ни один из круглых вариантов не реагировал. Что Касается агглютинации круглых вариантов сывороткой против шероховатых форм, то из 18 круглых вариантов 17 не реагировали с этой сывороткой и только один агглютинировался ниже 1/4 титра.

Плоские варианты бактерий Зонне в опытах агглютинации с сыворотками против плоских и круглых форм мало отличались от круглых. Они агглютинировались с обеими сыворотками преимущественно в диагностических титрах (от Т до 1/4 титра). Только четыре из них с одноименной сывороткой реагировали в разведениях ниже 1/4 титра, в то время как с сывороткой против круглых форм таких культур было семь.

1   2   3   4   5   6   7   8   9   10   11   12   13   14   15   16   17   18   19   20   21   22   23   24   25   26   27   28   29   30   31   32   33   34   35   36   37   38   39   40   41   42   43   44   45   46   47   48   49   50   51   52   53   54   55   56   57   58   59   60   61   62   63   64   65   66   67   68   69   70   71   72   73   74   75   76   77   78   79   80   81   82   83   84   85   86   87   88   89   90   91   92   93   94   95   96   97   98   99   100   101   102   103   104   105   106   107   108   109   110   111   112   113   114   115   116   117   118   119