Количество микробных тел и пирогенные свойства белковых и безбелковых субстратов. Н. Д. Лисовская
Проведенная ранее работа установила прямую зависимость между бактериальным загрязнением и пирогенными свойствами антитоксических сывороток, обрабатываемых методом «Диаферм-III».
Кроме того, мы обнаружили, что степень пирогенности бактериально загрязненных сывороток обусловливается количеством микробных тел, видовым составом микрофлоры и температурным режимом.
В данной работе сообщаются результаты наблюдения за общим количеством микробных тел, М. концентрацией и пирогенными свойствами микробов в белковых и безбелковых средах.
Еще в 1955 г., получая бактерийные пирогены на синтетических (безбелковых) средах, мы отметили стабильность их пироготных свойств. Так, пироген, полученный на среде Богопольского от бактерий Escherichia alcalescens, сохранил свою первоначальную пирогенную активность и после проверки его по истечении одного года.
Испытывая же пирогенные свойства сывороточных культур на протяжении одного месяца, мы увидели «самопроизвольное» исчезновение этих свойств. Для проверки этого мы исследовали Пирогенные свойства культуры Escherichia аЬ calescens, выращивая ее на различных средах: белковой (нативная лошадиная сыворотка) и безбелковой (физиологический раствор поваренной соли).
Опыты проводились так: во флакон с 10 мл вышеуказанных сред вносилось по 500 млн микробных тел культуры Escherichia alcalescens. затем посевы помещались в термостат с температурой в 34°С и через каждые семь дней в течение одного месяца в них проверялось общее количество микробных тел, М. концентрация и пирогенные свойства.
Общее количество микробных тел определялось по бактерийному оптическому стандарту, М. концентрация — методом подсчета колоний на чашках Петри после посева различных разведений исследуемого материала, пирогенные свойства — путем внутривенного введения проб кроликам в объеме 0,1 мл на 1 кг веса животного (рис. 1, 2).
Результаты опытов были следующие:
1. В нативной лошадиной сыворотке:
а) общее количество микробных тел (по оптическому стандарту) к 30 дню испытания возрастало до 2 млрд. в 1 мл;
б) М. концентрация достигала к третьему дню 280 млн., а к 30 дню снижалась до 820 тысяч в 1 мл;
в) пирогенные свойства достигали максимальных показателей (1,7°С) к третьему дню, затем постепенно снижались и к 30 дню повышение температуры у кроликов равнялось 0,5°С.
2. В физиологическом растворе поваренной соли:
а) общее количество микробных тел по оптическому стандарту не определялось. С третьего по тридцатый день констатировалась лишь слабая опалесценция;
б) М. концентрация достигала к третьему дню 160 млн. микробных тел, а к 30 дню уменьшалась до 18 тыс. в 1 мл;
в) пирогенные свойства, достигнув показателей 1,1—1,2°С к третьему дню, оставались на этом же уровне до 30 дня.
3. Как в сыворотке, так и в физиологическом растворе поваренной соли максимальная пирогенная активность культуры Escherichia alcalescens обнаруживалась в момент максимальной М. концентрации.
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
50
51
52
53
54
55
56
57
58
59
60
61
62
63
64
65
66
67
68
69
70
71
72
73
74
75
76
77
78
79
80
81
82
83
84
85
86
87
88
89
90
91
92
93
94
95
96
97
98
99
100
101
102
103
104
105
106
107
108
109
110
111
112
113
114
115
116
117
118
119
|