Исследования в области особоопасных инфекций

Анализ материала по определению степени бактериального загрязнения и пирогенных свойств

Таблица 1. Пирогенная активность живых культур

Анализ материала по определению степени бактериального загрязнения и пирогенных свойств противодифтерийных сывороток в процессе их изготовления методом «Диаферм-III», приведенного в первом сообщении, позволил нам установить прямую зависимость пирогенных свойств от микробного обсеменения. Кроме того, было отмечено, что, ка правило, с увеличением бактериального загрязнения сывороток возрастают и пирогенные свойства их.

Однако мы не смогли ответить на вопрос о том, почему в некоторых случаях сыворотки с меньшим микробным обсеменением обнаруживают пирогенные свойства, а сыворотки более загрязненные остаются апирогенными.

Для выяснения этого мы испытывали пирогенную активность различных видов микроорганизмов, выделенных из сыворотки в процессе ее приготовления.

Первоначально испытывалась пирогенная активность живых культур. Для этого в опыт мы взяли все виды микроорганизмов, выделенных из пирогенных и выборочно из апирогенных сывороток. Это составило группу микроорганизмов из следующих 11 видов:

1. Flavobacterium dormitator (выделена из нативной сыворотки).

2. Escherichia alcaiescens (выделена из сыворотки после стандартизации).

3. Aerobacter cloacae (выделена из сыворотки после первичной дегазации).

4. Proteus bombicus (выделена из сыворотки после стандартизации).

5. Proteus vulgaris (выделена из сыворотки после диализа).

6. Bacillis subtilis (выделена из сыворотки после диализа)

7. Micrococcus cremori viscosi (выделена из сыворотки после первичной дегазации).

8. Micrococcus muscae (выделена из сыворотки после двух часов ферментативного переваривания).

9. Streptococcus faecalis (выделена из сыворотки после двух часов ферментативного переваривания).

10. Achromobacter demminum (выделена из сыворотки после первичного осаждения белков сернокислым аммонием).

11. Achromobader nitrovopum (выделена из сыворотки после первичной дегазации).

Причем культура Bact. subtilis была взята в количестве двух штаммов, один из которых выделен из пирогенной сыворотки, второй — из апирогенной.

Первые восемь из перечисленных видов микроорганизмов мы выделили из пирогенной, последующие четыре — из апирогенной сыворотки.

Пирогенные свойства перечисленных 11 видов микроорганизмов определялись на кроликах внутривенным введением различного количества микробных тел на 1 кг веса. В опыт брались 24-часовые агаровые культуры, которые петлей переносились в заведомо апирогенный физиологический раствор. Бактериальные суспензии доводились с помощью оптического стандарта до определенной концентрации и вводились кроликам.

Суспензии всех вышеперечисленных видов микроорганизмов вводились двум кроликам в концентрации 200 млн. и 2 млн. микробных тел на 1 кг веса. Культуры, которые и в той и в другой концентрации давали у кроликов повышение температуры на один и более градус, вводились повторно, но в меньших концентрация — 20 тыс. и 200 микробных тел (табл. 1).

В результате проведенного опыта оказалось, что десять из 11 видов микроорганизмов в концентрации 200 млн. микробных тел на 1 кг веса кролика проявили резко выраженные пирогенные свойства, вызвав повышение температуры на 1—3°С. И только одна культура MavobaCterior dormiiatc пирогенных свойств в этой концентрации микробных тел не обнаружила.

При введении 2 млн. микробных тел на 1 кг веса кролика пирогенные свойства проявили уже только четыре вида (Escherichia alcalescens, Aeiobacter cloacae, Proteus oombicu и vulgaris).

При введении 20 тыс. микробных тел пирогенную активность обнаруживают всего только два вида микроорганизмов Escheric. alcalescens и Aerob. cloacae, выделенных из пирогенной сыворотки. При введении 200 микробных тел на 1 кг веса кролика ни одна из испытанных культур пирогенной активности не проявила.

Из табл. 1 вытекает следующее:

1) большинство испытанных видов микроорганизмов при введении 200 млн. микробных тел на 1 кг веса кролика проявляет резко выраженные пирогенные свойства;

2) пирогенная активность разных видов микроорганизмов неодинакова. Одни из них проявляют эти свойства уже при введении 20 тыс. микробных тел, как, например, Escherichia alcalescens и Aerob. cloacae, другие не обнаруживают их даже при введении 200 млн. микробных тел на 1 кг веса кролика, как, например, Flavobacterium dormitator Отсюда следует, что пирогенные свойства бактериально, загрязненной сыворотки зависят как от количества микробов, так и от видового состава их.

Примечание к таблице 1: указанная концентрация микробных тел вводилась кроликам в объеме 0,1 мл на 1 кг живого веса.

Поставленный опыт позволил нам ответить на вопрос, почему иногда менее загрязненные сыворотки приобретают пирогенные свойства, а более загрязненные остаются апирогенными.

Кроме того, из наших опытов видно, что максимальной пирогенной активностью обладают грамотрицательные подвижные палочки, что подтверждается рядом авторов (А. Н. Филатов, Ко-Туи, К. Д. Рудат, П. Пробей и М. Питтман и др.).

Выводы

1. К микрофлоре, загрязняющей сыворотку в наших условиях обработки ее методом «Диаферм-III», относятся воздушно-водные сапрофиты, большинство из которых принадлежит к грамотрицательным подвижным палочкам.

2. Пирогенная активность разных видов микроорганизмов неодинакова. Наибольшей пирогенной активностью обладают грамотрицательные подвижные палочки.

Литература

1. Филатов А. Н. Кровезамещающие растворы, их приготовление и применение. Диссертация, Медгиз, 1944.

2. Со-Тui, Schrift a Ruggeri. Production of pyrogen in gumacacia bibacteria. Proc. Soc. exper. Biol., and Medicin, 1934, 41, р.

3. Rudai K. D. Uber . pyrogene, Stoffe und Bemtransfusions reratei: und anderen Sterilisierugut. Zbl. Bacter., Parasit. Infektion. and Hyg. L. Abtorig., 1955, 164, 3—5. 1

4. Prоbei T. and Pittman and. Pyrogeniciti of bacterial contaminants found in biologia products. 1. Bacter, 1945, X.

1   2   3   4   5   6   7   8   9   10   11   12   13   14   15   16   17   18   19   20   21   22   23   24   25   26   27   28   29   30   31   32   33   34   35   36   37   38   39   40   41   42   43   44   45   46   47   48   49   50   51   52   53   54   55   56   57   58   59   60   61   62   63   64   65   66   67   68   69   70   71   72   73   74   75   76   77   78   79   80   81   82   83   84   85   86   87   88   89   90   91   92   93   94   95   96   97   98   99   100   101   102   103   104   105   106   107   108   109   110   111   112   113   114   115   116   117   118   119