Исследования в области особоопасных инфекций

Нейтрализация пирогенных свойств в белковой среде

На основании наших данных мы можем сказать, что количество микробных тел в сыворотке и физиологическом растворе поваренной соли с третьего по 30 день увеличивалось, а М. концентрация — уменьшалась. Пирогенные свойства в сыворотке «самопроизвольно» снижались, тогда как в физиологическом растворе поваренной соли с третьего по 30 день сохранялись на максимально высоком уровне.

В следующую серию опытов по испытанию пирогенных свойств культуры Escherichia alcalescens мы включили синтетическую (безбелковую) среду Богопольского. Кроме того, испытывались пирогенные свойства как самой культуры, так и ее фильтратов. Культура Echerichia alcalescens в количестве 500 млн. микробных тел засевалась на ряд пробирок с различными средами. Посевы помешались в термостат при температуре 34°С, и когда обнаруживались пирогенные свойства, половина материала от каждой среды фильтровалась через фильтры Зейтца. Фильтраты и оставшаяся нефильтрованной культура в разных средах оставлялись в термостате на два месяца и проверялись через определенные промежутки времени на пирогенные свойства (табл. 1).

Таблица 1. Пирогенные свойства культуры Ecberichia alcalescens, выращиваемой на различных средах

Примечание: цифры в графах обозначают повышение температуры у кроликов (в градусах Цельсия).

Данные опыты свидетельствуют о том, что сывороточная культура Echerichia alcalescens и ее фильтрат утрачивают пирогенные свойства на 14 день испытания.

Суспензия этой же культуры в физиологическом растворе поваренной соли, культура, выращенная на среде Богопольского, и их фильтраты сохраняют пирогенные свойства на протяжении всего опыта (два месяца).

В следующую серию опытов мы взяли различные виды культур; грамположительные и грамотрицательные палочки и кокки, пирогенные свойства которых испытывались при аналогичных опытных условиях на протяжении одного месяца. Результаты их были тождественны предыдущим, то есть пирогенные свойства всех сывороточных культур различных видов микробов утратились к 14 дню испытания, пирогенные свойства суспензий этих культур на безбелковых средах и их фильтратов сохранились в течение всего срока испытания.

На основании вышеизложенного можно сказать:

1. Нейтрализация пирогенных свойств была только в белковой среде.

2. Нейтрализующее свойство сыворотки обнаруживалось к пирогену не одного какого-то вида микроорганизмов, а,

как видно из наших опытов, ко всем испытанным видам, среди которых были грамположителъные и грамотрицательные ггаЛочки и грамположительные кокки.

После проведения экспериментов, выяснивших нейтрализующее действие сыворотки к бактерийным пирогенам, мы предположили, что оно, видимо, обусловливалось действием сывороточных ферментов.

Для выяснения этого мы поставили опыты с разрушением сывороточных ферментов путем прогревания сыворотки при 60°С и посевом на такую сыворотку различных видов микроорганизмов.

Оказалось, что как в инактивированной сыворотке, так и не гретой сыворотке на 14 день испытания получился тот же нейтрализующий эффект испытываемых бактерийных пирогенов. Такой отрицательный результат не может исключить энзимного характера нейтрализующего пирогенного фактора сыворотки, так как прогревание ее при 60°, видимо, не разрушает всех ферментов.

Кроме того, можно предположить, что нейтрализующий эффект сыворотки к бактерийным пирогенам может обусловливаться адсорбцией последних белковыми молекулами. В пользу этого говорят и удачные опыты по снятию пирогенности в сыворотках с помощью различных адсорбентов, проводимые сотрудниками нашего института (И. Л. Теодорович, В. П. Федорчук), а также. сотрудниками Уфимского (Ю. Б. Лукин, М. Е. Евсеев) и Ставропольского института (Ф. Т. Панин, Э. И. Сосина) — с помощью различных адсорбентов.

Чтобы окончательно выяснить причину нейтрализующего действия сыворотки на бактерийные пирогены, необходимо провести углубленную и, по всей вероятности, биохимическую разработку.

Выводы

1. Максимальная пирогенная активность культур обнаруживается в момент максимальной М. концентрации.

2. Нейтрализация бактерийных пирогенов возникает только в белковой среде.

3. Нейтрализующий эффект сыворотки проявляется к пирогенам испытанных видов микроорганизмов.

4. Свойство сыворотки нейтрализовать пироген различных бактерий может использоваться для снятия пирогенности в антитоксических сыворотках путем выдерживания последних в термостате в течение 10—14 дней.

Литература

1. Лукин Ю. Б., Евсеев М. В., Кинягина С. Н. Амирханова М. Г. Сравнительная оценка некоторых методов удаления пирогена из сывороток, очищенных методом «Диафером-III». Труды Уфимского научно-исследовательского института вакцин и сывороток им. Мечникова, 4. М., 1957.

2. Панин Ф. Т., Сосина 3. И., Изумрудов Л. Н. К вопросу об удалении пирогена из антитоксических сывороток, очищенных методом «Диаферм-III». Материалы по обмену опытом, т. 2/52, М., 1956.

1   2   3   4   5   6   7   8   9   10   11   12   13   14   15   16   17   18   19   20   21   22   23   24   25   26   27   28   29   30   31   32   33   34   35   36   37   38   39   40   41   42   43   44   45   46   47   48   49   50   51   52   53   54   55   56   57   58   59   60   61   62   63   64   65   66   67   68   69   70   71   72   73   74   75   76   77   78   79   80   81   82   83   84   85   86   87   88   89   90   91   92   93   94   95   96   97   98   99   100   101   102   103   104   105   106   107   108   109   110   111   112   113   114   115   116   117   118   119