Исследования в области особоопасных инфекций

Иммуногенность адсорбированного дифтерийного анатоксина

Лахири обнаружил в дифтерийном анатоксине, приготовленном на некоторых средах, низкомолекулярное вещество, усиливающее иммуногенность очищенного анатоксина, которое можно выделить при помощи сложной процедуры.

Эти факты имеют важное значение для производства очищенного адсорбированного дифтерийного анатоксина, так как качество исходных нативных анатоксинов и степень их очистки могут влиять на иммуногенность конечного препарата.

Попе и другие считают, что при очистке дифтерийного анатоксина можно получить неполноценный антиген за счет потери некоторых важных компонентов.

Зависимость степени очистки дифтерийного, анатоксина от титров исходных препаратов. Условные обозначения: 1 — среда Мартена; 2 — штамм Вайссензее на среде Мартена; 3 — среда Попе

А. А. Триполитова и другие показали, что при осаждении дифтерийного анатоксина трихлоруксусной кислотой, в отбрасываемом центрифугате имеются белковые вещества, усиливающие иммуногенность препарата.

С другой стороны, Левин и А. Поликар нашли, что очистка повышает иммуногенность. Высокоочищенный дифтерийный анатоксин (1200—2000 АЕ/мл азота), адсорбированный на гидроокиси алюминия, обладал: очень сильной иммуно- генностью (А. Н. Помянкевич и Е. И. Нехотенкова). Неиммуногенный нативный анатоксин после очистки и адсорбции обладал хорошими вакцинирующими свойствами (С. В. Чеботарева).

Таким образом, вопрос о влиянии качества исходного нативного анатоксина и степени его очистки на свойства адсорбированного и очищенного препарата нуждается в дальнейшем изучении.

На материале производственных испытаний 54 серий адсорбированного дифтерийного анатоксина, мы попытались уточнить этот вопрос.

Для очистки использовались нативные анатоксины, приготовленные по обычной методике со штаммом Парк-Вильямс 8 на средах Мартена и Попе-Смиса в модификации Вагнер-Сахаровой и со штаммом Вайссензее на среде Мартена с добавкой 0,4% мальтозы (М. С. Сулейманян). Последний штамм Давал высокие, титры в нативном анатоксине (50—90 АЕ/мл), что значительно упрощало технологию производства препарата. Ряд серий адсорбированного анатоксина приготовляйся из низкотитражных нативных препаратов, которые испытывались перед очисткой на иммуногенность.

Иммуногенность очищенного адсорбированного дифтерийного анатоксина в зависимости от титра исходных препаратов

Очистка производилась последовательной комбинацией соляной и трихлоруксусной кислоты по методике, описанной в инструкции, в которую были внесены некоторые изменения.

8—9 свинкам вводилось по 0,1 мл адсорбированного анатоксина от, каждой серии (6 АЕ) и через 20 дней 100 ДЛМ токсина, серия которого и доза была одинаковой во всех случаях. Учитывалась степень местной реакции, которая, как показали К. Т. Халяпина и М. М. Рошковская, вполне соответствует содержанию антитоксина в крови иммунизированных животных.

Моментом, затрудняющим оценку иммуногенности препарата, является отсутствие стандартной биологической модели, так как ответная реакция морских свинок на иммунизацию сильно колеблется в зависимости от их породы и условий содержания (Г. В. Дударенко и др.), а также времени года. Однако, поскольку наш материал проверен на сравнительно большом количестве животных, мы предполагаем, что его обработка может дать некоторые результаты благодаря статистическим закономерностям.

Из рисунка видно, что степень очистки дифтерийного анатоксина не зависит от исходного титра и характера среды. Некоторые серии с низким титром дали высокую степень очистки, и, наоборот, из высокотитражных препаратов иногда получался сравнительно загрязненный анатоксин.

Иммуногенность очищенного адсорбированного дифтерийного анатоксина в зависимости от степени осистки исходного препарата

Зависимость иммуногенных свойств адсорбированного дифтерийного анатоксина от титров исходных препаратов представлена в таблице 1.

В табл. 1 показано, что все препараты, приготовленные из анатоксинов как с низким, так и с высоким титром, по иммуногенности удовлетворяли требованиям инструкции. Однако высокотитражные анатоксины, полученные со штаммом Вайссензее, давали меньшее число реакций с гладким течением, чем остальные препараты. Что касается нативных анатоксинов с титрами от 19 до 25 АЕ/мл, то они дали вполне удовлетворительные результаты, и следовательно, требование инструкции к титру нативных анатоксинов, применяемых для концентрации (не ниже 25 АЕ/мл), может быть снижено до 20 АЕ/мл.

В табл. 2 представлены результаты проверки иммуногенности очищенного адсорбированного анатоксина в зависимостиот степени очистки концентрированного препарата.

Из табл. 2 видно, что более высокая степень очистки не уменьшает, а повышает иммуногенность препаратов. Следовательно, в производстве очищенного адсорбированного дифтерийного анатоксина следует стремиться к более полной очистке антигена, которая одновременно снижает дозу адсорбента и уменьшает реактогенность препарата.

Выводы

1 Степень очистки концентрированного дифтерийного анатоксина не зависит от титра исходного нативного препарата.

2. Для производства очищенного адсорбированного анатоксина можно использовать нативные анатоксины с титром 20-25 АЕ/мл.

3. Штамм Вайссензее, дающий высокие титры нативного анатоксина, значительно облегчает изготовление препаратов, но иммуногенность их несколько ниже, чем у адсобированного анатоксина, полученного со штаммом Парк-Вильямс 8.

4. Высокая степень очистки дифтерийного анатоксина (более 900 АЕмг азота) повышает иммуногенность адсорбированного препарата.

ЛИТЕРАТУРА

Xаляпина К. Т. В кн.: Вопросы инфекционной патологии и иммунитета, вып. 1, М., 1949.

Рошковская М. М. Там же.

Lahirl D. С., Indian J. Med. Res., 1951,39; 1952,40; Brit. med. J., 1953,4806.

Pope C. G., Stevens M. F., Caspary E. A., Fenton E. L. Brit. J. Exp. Path., 1951, 32.

Тринолитова A. A., Tpуxманов Б. Г., Ващенко ГС. Тр. Томского ИВС, вып. 6, 1955.

Levine I.J., Immunol., 1949, 63.

Поликар А. Тр. конф. Научные основы производства бак. препаратов, М., 1957.

Помянкевич А. Н., Нехотенова Е. И. Материалы по обмену опытом inaB. Упр.. ИВС. вып. 154, М., 1958.

Чеботарева С. В. Тр.Московского ИВС им. Мечникова, вып. 10, М., 1957.

Сулейманян М. С. К вопросу токсинообразования дифтерийного штамма Вайссензее рукопись).;

Xаляпина К. Т., Рошковская М. М. В кн.: Вопросы инфекционной патологии и иммунитета, вып. I, М., 1949.

Дударенко Г. В., Семко А. Ф., Мордовцева М. Я. Материалы по обмену опытом Главн. Упр. ИВС, вып.Т 54, М., 1958.

1   2   3   4   5   6   7   8   9   10   11   12   13   14   15   16   17   18   19   20   21   22   23   24   25   26   27   28   29   30   31   32   33   34   35   36   37   38   39   40   41   42   43   44   45   46   47   48   49   50   51   52   53   54   55   56   57   58   59   60   61   62   63   64   65   66   67   68   69   70   71   72   73   74   75   76   77   78   79   80   81   82   83   84   85   86   87   88   89   90   91   92   93   94   95   96   97   98   99   100   101   102   103   104   105   106   107   108   109   110   111   112   113   114   115   116   117   118   119