Исследования в области особоопасных инфекций

Солевое фракционирование. Электрофорез

Следовательно, и при солевом фракционировании наибольшая активность определяется во фракции гамма-глобулина и несколько меньшая во фракции бета-глобулина. Чтобы выяснить активность гамма-глобулина к сыворотке добавляли сульфат аммония до появления легкой мути. Затем смесь выдерживалась один час при комнатной температуре и осадок отделялся центрифугированием при 5000 обмин. — 15 минут. Осадок растворялся, диализовался и подвергался электрофоретическому исследованию. При электрофорезе на бумаге он представлял собой гамма-глобулин.

Противоядная активность промежуточных фракций сыворотки

Надосадочная жидкость после диализа титровалась на содержание противоядной активности и подвергалась электрофоретическому анализу. Активность в надосадочной жидкости сохранялась полностью, а количество γ2 глобулина равнялось почти нулю, поэтому активность гамма-глобулиновой фракции обусловливается в основном γ1 (Т) - компонентом.

Выводы

1. Методом свободного электрофореза в барбитуратном буфере с pH—8,6 и М 0,1 мы установили в нормальной лошадиной сыворотке наличие четырех белковых компонентов и их количественные колебания в различных сыворотках, которые составили: для гаммаглобулина от 16,2% до 27%; для бета-глобулина от 17,2% до 22,6%: для альфа-глобулина от 11,2 % до 19% и для альбумина от 34,9% до 48,4%, что вполне соответствует литературным данным.

Электрофоретический состав и противоядная активность фракций, выделенных по методу Кона

2. В противоядной сыворотке имеется дополнительный компонент γ1 -(Т) с подвижностью в электрополе, равной средней между гамма- и бета-глобулином.

3. Количество общего белка в иммунной сыворотке ниже, чем в нормальной.

4. Количество альбумина в иммунной сыворотке уменьшено, альфа-глобулина увеличено а бета-глобулина не изменено.

5. Методом препаративного электрофореза и солевого фракционирования мы установили, что противоядная активность обусловлена в основном гамма-глобулином (γ1 или Т) и бета-глобулином.

ЛИТЕРАТУРА

Вашков 13. И., Курочкина Н. А. ЖМЭИ, 1943, 6.

Гендон Ю. 3. ЖМЭИ, 1956.

Гроицкий Г, В.. Методы химического анализа крови., Медгиз, 1950 Троицкий Г.В. Биохимия, XVI, в. 6, 1951.

Хабас И. М., Хаустова И, М., Архив биол. наук, t. XLiy, в. 2, 1936. Xавкин Ю. А. Лабораторное дело, .1958, 1.

Ackerman P. G., Toro G., Kountz W. B. J. Lab. Clin. Med., 1954, 4.

Barr L. Brit. J. Exp. Path., 1931, 12.

Barr L. Gjenny C. Brit. J. Exp. Path., 1941, 22, 27.

Brat sen G. Acta Chem. Scand., 1954, 8. 10.

BussardA., Perrin D. J. Lab. Clin. Med., 1955, 46, 5.

Van-der-Sсhее r. J. Immunolog. 1940, 39, 65; 1941, 40, 39.

Chopard P. L. Tirzucht imd Ltchtungsbiol. 1954, 63, К Cohn E. J., Me. Meekin F. G., On с lev J. L., Newell J. М., Hughns W. J. Amer, Chem. Sol. 1940, 62, 3386.

Enders, цигир. rio E d s a 11 J. T, The Plasma Protein and their fractionation.

Grossman W. and. Hanning K. Angiochemic, 1950, 62, 7.

Hоldswоrth E. S. Biochem. J., 1953, 55, I. X, IV.

Kekwick R. A., Record B. R. Brith, J. Expt. Path;, 1941. 22, 27.

Кeкwiск R. A., Recurd B. R. Brit. J. Expt. Path., 1941, 22, 29. Longs worth L. G. Chem. Revs., 1942, 30, 323.

Longswor.th L. G. and Mac Innes. D. A. J. Amer. Chem. Sol., 1940, 62. LongsworthL. G., Chedlovsky T. and Mac Jnnes D. A.

J. Expt. Med, 1939, 70.

Nikki IE,, Haansi E., Pesold R. Acta Chem. Scand,, 1953,7, № 8.

S. Venson, цитир. по Ed sail J. T. The Plasma Protein and their fractionation.

Tiselius A. Biochem. J. 1937, 31.

1   2   3   4   5   6   7   8   9   10   11   12   13   14   15   16   17   18   19   20   21   22   23   24   25   26   27   28   29   30   31   32   33   34   35   36   37   38   39   40   41   42   43   44   45   46   47   48   49   50   51   52   53   54   55   56   57   58   59   60   61   62   63   64   65   66   67   68   69   70   71   72   73   74   75   76   77   78   79   80   81   82   83   84   85   86   87   88   89   90   91   92   93   94   95   96   97   98   99   100   101   102   103   104   105   106   107   108   109   110   111   112   113   114   115   116   117   118   119