|
||
|---|---|---|
|
|
Опыт получения сухих легкорастворимых лечебных сывороток, изготовленных методом «Диаферм-III». Н. И. Синяшин, В. П. Федорчук, А. Н. Якубова
В настоящее время вакцино-сывороточное производство изготовляет в сухом виде много бакпрепаратов, преимущество которых по сравнению с жидкими заключается в стабильности при длительном хранении. На совещании, состоявшемся в Москве 22—25 декабря 1958 г., было отмечено, что ряд институтов хотя и получает сухие лечебные сыворотки, но все же их растворимость неудовлетворительна (15—25 мин.). Поэтому мы стремились получить быстрорастворимые сухие сыворотки. Первые опыты проводились с противодифтерийной сывороткой, очищенной методом «Диаферм-III». В асептических условиях сыворотка разливалась в пенициллиновые флаконы по 5 мл сыворотки в каждый флакон. Наполненные сывороткой флаконы помещались в стерильные кассеты, которые закрывались тремя слоями марли и двумя слоями оберточной бумаги. Марля и бумага на кассете раздельно закреплялись резиновыми жгутами, что позволяло снимать бумагу при высушивании, не нарушая стерильности высушенной сыворотки. 
Предварительное замораживание производилось при температуре — 30—35°, —40 и —78° С в течение 24 часов. Промороженная сыворотка одномоментно загружалась в сублимационные аппараты системы Е. К. Долинова, в которых за 3—5 минут создавался вакуум в 0,05 мм ртутного столба. Температура конденсатора на протяжении всей сушки была — 78°С. Сушка заканчивалась за 36 часов. Полученная сухая сыворотка представляла собой легкий, белый аморфный порошок, легко рассыпающийся при встряхивании. Сухую сыворотку растворяли в дистиллированной воде до первоначального объема. Время растворения определяли в минутах (табл. 1). Из табл. 1 видно, что существенно улучшить растворимость сухой сыворотки за счет вариации температуры пред-варительного замораживания не удалось. Из литературных данных известно, что растворимость сухих белковых препаратов значительно улучшается, если перед высушиванием к ним добавляются сахар или аминокислоты. В качестве средств, улучшающих растворимость сухих сывороток, мы применяли глюкозу и уротропин. 
Чтобы выяснить оптимальную дозу глюкозы и уротропина, которая способствует быстрому растворению сухих сывороток, мы эти вещества в различных количествах добавляли в сыворотки перед стерилизующей фильтрацией. Затем сыворотки стерильно различались по 5 мл в пенициллиновые флаконы н высушивались в тех же аппаратах К. Е. Долинова при нижеследующем режиме: а) предварительно замораживались при температуре -30° С в течение 24 часов; б) рабочий вакуум 0,05 мм ртутного столба, создавался за 5 минут; в) время высушивания с момента загрузки — 36 часов. Контролем служили параллельно высушенные сыворотки без наполнителей. Полученные сухие сыворотки С наполнителем и без наполнителя не тождественны по внешнему виду. Сыворотки, высушенные с уротропином, белого цвета, а сыворотки без уротропина — желтоватого цвета. В табл. 2 показаны средние данные, характеризующие растворимость полученных сухих сывороток в зависимости от содержания в них наполнителя, а также то, что уротропин резко улучшает растворимость сухой противодифтерийной сыворотки. Последующие опыты показали, что сыворотки, содержащие 3,5—4% уротропина, растворяются в течение 1,0— 1,5 мин. Для качественной оценки сухих сывороток наряду с растворимостью определялись титры (АЕ в 1 мл), апирогенность, безвредность. Контролем для сравнения служила исходная жидкая сыворотка и сыворотка, высушенная без наполнителей. Безвредность определялась на морских свинках общепринятым методом. Апирогенность определялась на кроликах 0,1 мл сыворотки на 1 кг веса кролика. Интересно отметить, что некоторые сыворотки, которые до высушивания были пирогенными, после высушивания становились апирогенными. Из табл. 3 видно, что 3,5—4% уротропина не изменяют качественные показатели исходных сывороток. В дальнейшем следует изучить свойства сухих сывороток в период их хранения. 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 |
|
|
|
||
