Исследования в области особоопасных инфекций

Тест проверки степени бактериального обсеменения сыворотки

Тестом проверки степени бактериального обсеменения сыворотки до сентября месяца 1954 г. был метод подсчета колоний на чашках Петри с нейтральным агаром. С октября 954 г. степень бактериального загрязнения сыворотки определялась методом последовательного разведения (рекомендовано Государственным контрольным институтом вакцин и сывороток).

Тестом проверки пирогенных свойств являлось внутривенное введение испытуемых проб кроликам в количестве 2 мл (до сентября 1954 г.) к 0,1 мл (с октября 1954 г.), рекомендованным также ГКИВС.

Степень бактериального загрязнения и пирогенные свойства мы обследовали 23 серии противодифтерийных сывороток, прошедших очистку и концентрацию методом «Диаферм-III» с марта 1954 г. по сентябрь 1957 г. Каждая из 23 серий обследовалась по этим показателям на шести различных этапах производственного процесса в нативном виде (до начала обработки), после первичной дегазации, после двух часов ферментативного переваривания, после первичного осаждения белков сернокислым аммонием, после стандартизации и в готовом виде после стерилизующей фильтрации.

На основании проведенной работы мы констатировали следующее. Нативная сыворотка во всех 23 пробах оказалась стерильной и не пирогенной. Сыворотка после первичной дегазации характеризовалась бактериальным загрязнением от 10 до 6250 микробных тел в 1 мл. Показатели пирогенности сыворотки после дегазации были такими же, как и нативной сыворотки.

Дистиллированная вода в наших опытах иногда оказывалась значительно загрязненной, особенно при обработке первых партий сыворотки. Количество микробных тел в ней достигало 6560 в 1 мл. Убедившись в возможности такого бактериального загрязнения сыворотки дистиллированной водой, мы путем замены шлангов и обработкой их 5% раствором карболовой кислоты, пропаривания мерников и другими мероприятиями добились снижения количества микробных тел до 20—50 в 1 мл, а иногда и полного отсутствия в ней роста.

После, двух часов ферментативного переваривания сыворотки мы зарегистрировали до 1250 микробных тел в 1 мл. Пирогенную реакцию обнаружили две пробы при пользовании тестом в 2 мл сыворотки на 1 кг веса кролика.

После первичного осаждения белков сернокислым аммонием количество микробных тел в 1 мл сыворотки резко возрастало, иногда достигая 40 000. Такое резкое увеличение микробного загрязнения на этом этапе можно связать с тем, что сыворотка после осаждении фильтровалась в общем помещении и в нее из воздуха попадало большое количество микроорганизмов. После выведения этого процесса в специальные боксы бактериальное обсеменение сывопотки на этом этапе резко снизилось (до 1250 микробных тел). Пирогенные свойства сыворотки на этом этапе не проверялись, так как большое содержание в ней сернокислого аммония вызывало гибель кроликов.

После диализа зарегистрировали самую высокую степень бактериального загрязнения. Количество микробных тел в 1 мл достигает в отдельных случаях 7 300 000. Такое резкое увеличение количества микробных тел на этом этапе объясняется тем, что из сыворотки, заключенной в целофановые мешочки, могут диффундировать вместе с сернокислым аммонием и продукты жизнедеятельности микроорганизмов, обусловливая тем самым некоторое обновление питательной среды и создавая условия для большего микробного размножения.

Пирогенные свойства сыворотки после диализа выразились также максимальными температурными показателями: температурный прирост у кроликов достигает в отдельных случаях 3,6°С. Пирогенными на этом этапе оказались все сыворотки, испытанные тестом в 2 мл и одна сыворотка, испытанная тестом в 0,1 мл на 1 кг веса кролика.

1   2   3   4   5   6   7   8   9   10   11   12   13   14   15   16   17   18   19   20   21   22   23   24   25   26   27   28   29   30   31   32   33   34   35   36   37   38   39   40   41   42   43   44   45   46   47   48   49   50   51   52   53   54   55   56   57   58   59   60   61   62   63   64   65   66   67   68   69   70   71   72   73   74   75   76   77   78   79   80   81   82   83   84   85   86   87   88   89   90   91   92   93   94   95   96   97   98   99   100   101   102   103   104   105   106   107   108   109   110   111   112   113   114   115   116   117   118   119