|
Роль адъювантов и тканевых препаратов при гипериммунизации
Мысль о возможности усиления специфических свойств сыворотки путем повышения реактивности организма и увеличения специфической активности антигенов появилась давно. Еще в 1889 г. Е. Roux и A. Iersen применили в качестве неспецифического раздражителя при иммунизации животных дифтерийным антигеном хлористый кальций и отметили при этом заметное стимулирование антителообразования по сравнению с животными, иммунизируемыми без применения указанного вещества. Однако подлинно научное развитие это направление получило начиная с 1925 г., когда появилась первая серия работ выдающегося французского иммунолога G. Ramona и многочисленных его учеников и последователей, изучавших влияние неспецифических раздражителей различного состава, названных ими адъювантами, на иммуногенез.
G. Ramon (1925) обратил внимание на то, что животное, имеющее абсцессы на месте введения антигена, более интенсивно вырабатывает антитоксин. Эти наблюдения привели к мысли, что главной причиной усиления антителообразования является воспаление, возникающее на месте инъекций антигена. Добавление гноя и различных микроорганизмов, способных вызвать воспаление к анатоксину, и введение этой смеси лошадям подтвердили данное предположение (1925, 1926). Расширяя свои наблюдения, G. Ramon (1926, 1931) и его ученики (P. Descombey, 1925; 1926; 1930; G. Ramon, Е. Lemetayer, 1931; G. Ramon, M. Dechages, 1931; G. Ramon, М. Djourichitch, 1933; G. Ramon, Е. Lemetayer, R. Richou, 1934; E. Lemetayer, 1931; 1935 и др.) пришли к твердому убеждению, что к стимуляторам иммуногенеза может быть отнесено большое число различных по химическому составу веществ: хлористый кальций, хлористый магний, тапиока, крахмал, ланолин, растительное масло, холестерин и др. По мнению Г. Рамона (1962), антиген, к которому добавлено какое-либо адъювантное вещество, например, тапиока, при подкожном введении встречает в месте инъекции различные элементы ткани, как-то: лейкоциты, ферменты клеток и плазмы, приток которых усилен присутствием тапиоки, встречает соединительно-тканевые клетки, количество которых увеличивается под влиянием искусственно вызванного воспаления. Антиген находится как бы в мешке и его всасывание резко замедляется. Вместе с этим увеличение времени нахождения антигена в организме приводит к удлинению периода интенсивной продукции антител. На это указывал Н. Ф. Гамалея (1936), это было подтверждено в лаборатории П. Ф. Здродовского (А. А. Климентова, 1954; Г. В. Шумакова, 1954).
В настоящее время существует множество разнообразных точек зрения на механизм стимулирующего действия адъювантов на иммуногенез (А. А. Воробьев, Н. Н. Васильев, 1969). Одна группа гипотез стимуляцию иммуногенеза под влиянием адъювантов объясняет результатом действия их на организм, вследствие чего изменяются защитные и другие функции последнего, вторая группа — основную роль приписывает изменению антигена под действием адъюванта, приводящему к повышению его иммуногенности. Из адъювантных веществ чрезвычайно эффективными оказались результаты наблюдений по применению тапиоки для гипериммунизации лошадей-продуцентов противодифтерийной и противостолбнячной сывороток (Г. Рамон, 1962). Так, уже после первого цикла эксплуатации 1 мл противостолбнячной сыворотки нейтрализовал 10—50 тыс. смертельных для морских свинок доз столбнячного токсина, в то время как 1 мл сыворотки животных, иммунизированных без тапиоки, способен был нейтрализовать только 300—1000 смертельных доз. Заслуживают внимания наблюдения, проведенные К. Халяпиной и Ф. Баутц (1925), по использованию тапиоки при иммунизации лошадей-продуцентов противодифтерийной сыворотки. Оказалось, что животные, имеющие низкие титры антитоксина, не превышающие 310 АЕ в 1 мл сыворотки и получившие антиген в смеси с тапиокой, повысили активность сыворотки до 520 АЕ. Аналогичные данные выявлены и при иммунизации лошадей столбнячным, ботулиновым и дифтерийным анатоксинами и антигеном против газовой гангрены, вводимыми в смеси с крахмалом (М. П. Изаболинский, В. А. Юденич, 1927; М. Вейнберг, Б. Гинзбург, 1928; Д. Г. Маполов, И.М. Солдатов, 1941; С. Ж. Малышев, Б. Я. Ознобишин, 1946).
В 1926 г. A. Glenny, С. Рорре и др. сообщили о резком усилении антигенных свойств анатоксинов при добавлении к ним алюмокалиевых квасцов. Вскоре эти данные были подтверждены М. Вейнбергом, Б. Гинзбургом (1928, 1930, 1931), Л. Г. Ковтунович (1954), Г. П. Черкас с соавт. (1955) при противогангренозной, Е. Ф. Гогиным с соавт. (1935) — противодифтерийной, В. М. Кругликовым (1941), С. М. Прегер (1953), Н. В. Модестовой (1955) — противостолбнячной, И. И. Архангельским с соавт., (1940), С. Д. Роньжиной (1942) — противоскарлатинной, А. И. Буровой, Ф. М. Кац (1940) — противоботулинической гипериммунизациях.
При изготовлении противовирусных сывороток в качестве неспецифических раздражителей также применялись алюмокалиевые квасцы. Так, Ю. К. Петров (1962) нашел, что добавление их к гриппозному антигену усиливает его антигенные свойства и способствует антителообразованию. Подобные результаты получены и при гипериммунизации лошадей аденовирусными антигенами (Г. И. Волчанецкая с соавт., 1968).
В то же время исследованиями, выполненными в Томском институте вакцин и сывороток, не удалось продемонстрировать усиление процессов антителообразования при иммунизации животных квасцовыми антигенами при получении сывороток против вируса клещевого энцефалита (Ю. В. Федоров с соавт., 1964; Ю. В. Федоров, Р. К. Локтионова, 1966; Р. К. Локтионова, 1966) и против вируса западного энцефаломиелита лошадей (А. С. Скобенникова, Ю. В. Федоров, 1968, 1969; А. С. Скобенникова, 1969). 1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
50
51
52
53
54
55
56
57
58
59
60
61
62
63
64
65
66
67
68
69
70
71
72
73
74
75
76
77
78
79
80
81
82
83
84
85
86
87
88
89
90
91
92
93
94
95
96
97
98
99
100
101
102
103
104
105
106
107
108
109
110
111
112
113
114
115
116
117
118
119
120
121
122
123
124
125
126
127
128
129
130
131
132
133
134
135
136
137
138
139
140
141
142
143
144
145
146
147
148
149
150
151
152
153
154
155
156
157
158
159
160
161
162
163
164
165
166
167
168
169
170
171
172
173
174
175
176
177
178
179
180
181
182
183
184
185
186
187
188
189
190
191
192
193
194
195
196
197
198
199
200
201
202
|