|
Культивирование микробов на различных питательных средах
Микробов культивируют на различных питательных средах типа Уленгута, Ферворт-Вольфа, Терских, содержащих в своем составе кроличью сыворотку в количестве от 5 да 30%. Г. Ф. Марченко, А. М. Шальнева, В. Я. Гузачева (1950) использовали для приготовления антигена питательную среду, состоящую из стерильной водопроводной воды и 1—2% инактивированной бараньей сыворотки. Однако они отмечают, чта увеличение в среде бараньей сыворотки до 2,5% способствует повышению урожайности лептоспир.
С. Я. Любашенко, Л. С. Новикова (1950) сравнили рост лептоспир в зависимости от количества добавленной сыворотки и вида животных, от которого она была получена. Авторы установили, что лучшей питательной средой для выращивания культур лептоспир является среда Уленгута, содержащая 5% сыворотки кролика, овец или коз. В этой среде наиболее интенсивный рост лептоспир (80—100 и больше в поле зрения) отмечался при pH 7,2—7,4 на 3—5—7—9-й день культивирования в термостате при 28—30°. Сыворотка телят оказалась менее пригодной при использовании для культивирования микробов, сыворотки же лошадей, лисиц, песцов и собак совершенно непригодны.
Штаммы поддерживаются на жидкой сывороточной среде при комнатной температуре. С. Я. Любашенко, Л. С. Новикова (1950) показали, что микробы хорошо размножаются и сохраняются без пересевов в течение 60—75 дней, в производственной практике их обычно пересевают не реже, как через 10—15 дней.
Для приготовления антигена в больших объемах важное значение имеет количество добавляемой культуры. Было показано (С. Я. Любашенко, Л. С. Новикова, 1950), что интенсивный рост лептоспир на сывороточной среде Уленгута с 5% сыворотки кролика, овцы или козы (80—100 и более микробов в поле зрения) наблюдается через 5—7—10 суток только тогда, когда соблюдается пропорция при засеве 274
бульона: 4—6 частей среды и 1 часть культуры с густо микробов 60—80 в поле зрения.
В качестве антигена для гипериммунизации живот применяют живые и убитые культуры лептоспир. Послед готовятся путем прогревания в течение 30 минут при темратуре 55—56°.
Сравнение в эксперименте на кроликах антигенной ак ности живой и гретой культур лептоспир выявило преимущество использования для иммунизации живой культурой (С. И. Тарасов, 1938; Г. Ф. Марченко, А. М. Шальш В. Я. Гузачева, 1950).
С целью приготовления гипериммунной противолептоспирозной сыворотки использовались различные животные. R. Inado, I. Ido (1914), как мы уже указывали выше, получили и испытали с положительными результатами гипериммную сыворотку коз. 1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
50
51
52
53
54
55
56
57
58
59
60
61
62
63
64
65
66
67
68
69
70
71
72
73
74
75
76
77
78
79
80
81
82
83
84
85
86
87
88
89
90
91
92
93
94
95
96
97
98
99
100
101
102
103
104
105
106
107
108
109
110
111
112
113
114
115
116
117
118
119
120
121
122
123
124
125
126
127
128
129
130
131
132
133
134
135
136
137
138
139
140
141
142
143
144
145
146
147
148
149
150
151
152
153
154
155
156
157
158
159
160
161
162
163
164
165
166
167
168
169
170
171
172
173
174
175
176
177
178
179
180
181
182
183
184
185
186
187
188
189
190
191
192
193
194
195
196
197
198
199
200
201
202
|