|
Кратковременная (ударная) иммунизация. Комплексная и ассоциированная иммунизации
Кратковременная (ударная) иммунизация
Метод предусматривает кратковременное использование животных и поэтому при производстве лечебных сывороток не применяется. В основном рекомендуется при получении диагностических сывороток, которые чаще всего изготовляются на лабораторных животных и используются для получения сывороток, свободных от содержания групповых антител. Сущность метода заключается в том, что после 1-го цикла иммунизации проводится несколько кровопусканий с интервалами в 2—3 дня с последующим тотальным взятием крови, либо сразу производят тотальное кровопускание. Серьезным недостатком метода является более низкий титр антител по сравнению с качеством сыворотки, получаемой при использовании прерывистого и непрерывного методов иммунизации ввиду того, что при нескольких кровопусканиях конечные порции сыворотки обладают низкой активностью.
Недостатком является и то, что появляется необходимость в частом приобретении новых животных, их карантинировании, ветеринарном обслуживании, дополнительном расходовании антигена, что делает данный метод нерентабельным. Метод кратковременного использования животных особенно оправдан при получении специфических диагностических сывэроток, пригодных для метки их изотиоционатом флуоресцеина или другими подобными красителями. Преимущество этих сывороток — низкое содержание антител к неспецифическому белку, наблюдаемое при иммунизации любым антигеном.
Форсированным методом иммунизации иногда удается быстро получить высокий титр агглютинирующих сывороток, но не всегда он держится долго, что часто связано с перенасыщением организма антигеном и наступлением иммунизаторного паралича, так как при таком методе в короткий период стремятся ввести наибольшее количество антигена. Этот способ приводит также к повышенной гибели животных, что особенно проявляется при изготовлении на кроликах дизентерийной, пара-Бреслау и Гертнера сывороток (М. И. Федорович, 1949). Разработан метод (С. И. Тарасов, 1938) скорого изготовления агглютинирующей лептоспирозпой сыворотки путем одновременного введения больших количеств слабовирулентных или даже сапрофитных лептоспир в брюшную полость и внутривенно, создавая таким образом выраженную лептоспиремию. Этим методом удается получить сыворотку высокого титра в короткий срок. Для изготовления преципитирующей диагностической сыворотки к вирусу осповакцины рекомендуется проводить иммунизацию кролика взвесью вируса путем одномоментного нанесения антигена на выбритую и скарифицированную кожу спины, боков с последующим внутривенным введением вируса. Уже через 21—30 дней можно иметь сыворотку, содержащую антитела к указанному вирусу в высоком титре (А. П. Степанова, И. Н. Федотова, 1972). Быстрый способ получения сывороток описан многими авторами при получении сыворотки к аденовирусам (Н. И. Зацепин, Г. И. Олейник, В. И. Дегтеревко, 1968) — путем комбинированной внутрибрюшинной и внутривенной иммунизации кроликов, к вирусу орнитоза (Т. И. Зайцева с соавт., 1970) — на голубях, вирусу лимфоцитарного хориоменивгита (Л. Е. Подоплекина, А. С. Скобенникова, 1972) — на морских свинках, кроликах, белых крысах и сирийских хомяков и т. д.
Таким образом, все вышеприведенное позволяет считать, что при применении больших доз антигена, введенного комбинированно, может быть получена сыворотка с высоким титром и в относительно короткий срок, что является важным фактором при изготовлении препаратов, максимально свободных от групповых и побочных антител к неспецифичеокому белку, который всегда в том или ином соотношении входит в состав любого антигена и особенно вирусного.
Комплексная и ассоциированная иммунизации
В практике производства поливалентных гипериммунных сывороток широкое распространение получили ассоциированная и реже комплексная иммунизация животных. Под первым понятием И. И. Рогозин и В. Д. Беляков (1968) понимают введение смеси различных антигенов, а под вторым — одновременное введение нескольких антигенов, но каждого в разные места. Нам кажется, что эти два понятия вполне приемлемы и достаточно четко отражают существо вопроса.
Чаще всего предпочитают использовать для иммунизации ассоциированные антигены.
Впервые Widal и Sikard (1897) и вскоре Costellani (1902) показали возможность иммунизации животных смесью нескольких антигенов. В дальнейшем классические наблюдения G. Ramon (1925) и Н. Ф. Гамалеи (1939) дали толчок к началу исследований по широкому внедрению в практику гипериммунизации комплекса антигенов. Значительные преимущества поливалентных сывороток перед моновалентными заключаются в возможности своевременной серопрофилактики и терапии ряда инфекционных заболеваний, характеризующихся поливалентностью возбудителей, а также некоторых сочетанных инфекций. Немаловажным фактором изготовления поливалентных сывороток перед моновалентными является их более высокая экономическая эффективность. Среди них важное место занимают методы, направленные на изготовление поливалентных сывороток против газовой инфекции (Cl. perfringens, Cl. oedematiens, V. septicus).
Уже первые исследования, выполненные в этом направлении, показали большую перспективность данного метода иммунизации (Klose, 1919; Sordelli, 1923; М. Weinberg, 1928; О. А. Комкова и К. И. Матвеев, 1943; Д. Б. Хаджидимова, 1944). В дальнейшем экспериментальными и производственными наблюдениями, проведенными в Казанском ИЭМГ, Московском ИЗМ им. Н. Ф. Гамалеи, Московском, Харьковском Пермском, Томском институтах вакцин и сывороток (Г. А. Черкас с соавт., 1955; О. А. Комкова, 1959; Н. П. Ефимова, А. А. Борнякова, В. В. Оборина, 1959; X. И. Ушеренко, 1960; И. Е. Алатырцева с соавт., 1965; Г. М. Михайлова с соавт., 1965; М. А. Бычкова, 1966; М. А. Бычкова, Г. Е. Синельников, 1973), позволили значительно усовершенствовать методику производственного изготовления поливалентных противогангренозных сывороток, и в настоящее время данный препарат в основном выпускается в поливалентном виде.
Аналогичное положение имеет место и при изготовлении поливалентных противоботулинических (Г. А. Королева, К. И. Матвеев, 3. М. Волкова, 1958; В. Б. Фреймам с соавт., 1965; 1967; В. Денчев, Н. Марчев, Е. Райчева, 1966; Н. Я. Денисова, Р. Т. Лобза, 3. А. Полежаева, 1968; А. А. Омарова, .1968 и др.), противогриппозных (Ю. К. Петров, 1965; Н; Н. Орлова с соавт., 1965), противополиомиелитных (О. Г. Анджапаридзе, Р. Г. Десятскова, 1959; В. Д. Соловьев с соавт., 1959) и других сывороток.
Предпринимались попытки получения от животных смешанных сывороток, содержащих одновременно антитела против столбняка и газовой инфекции (С. А. Зелевинская, 1937; Ф. Т. Панин и Ю. М. Фролова, 1945; М. А. Бычкова, Н. Д. Мишина и В. П. Петров, 1967), чумы и сибирской язвы (А. В. Хунданов, Э. М. Клец и Е. Д. Шкурко, 1961) и др. 1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
50
51
52
53
54
55
56
57
58
59
60
61
62
63
64
65
66
67
68
69
70
71
72
73
74
75
76
77
78
79
80
81
82
83
84
85
86
87
88
89
90
91
92
93
94
95
96
97
98
99
100
101
102
103
104
105
106
107
108
109
110
111
112
113
114
115
116
117
118
119
120
121
122
123
124
125
126
127
128
129
130
131
132
133
134
135
136
137
138
139
140
141
142
143
144
145
146
147
148
149
150
151
152
153
154
155
156
157
158
159
160
161
162
163
164
165
166
167
168
169
170
171
172
173
174
175
176
177
178
179
180
181
182
183
184
185
186
187
188
189
190
191
192
193
194
195
196
197
198
199
200
201
202
|