|
Иммунизация животных осуществляется различными путями
Иммунизация животных осуществляется различными путями. Чаще всего антиген вводится подкожно в 2—4 точки в область лопаток и спины (Н. А. Краокина с соавт, 1971: С. Л. Бляхер с соавт., 1972), внутривенно (У. А. Арипов с соавт., 1971; А. М. Нажмитдинова, 1974) и внутримышечно (D. Long с соавт., 1969). Хорошие результаты отмечены при чередовании подкожного, внутривенного и внутримышечного методов инъецирования взвеси лимфоцитов (К. Games с соавт., 1968; R. Pichlmayer с соавт., 1968; I. Г. Дорошенко, 1973). Непосредственно перед введением лимфоцитарного антигена лошадям рекомендуется К. Балтрашович с соавт., 1974) добавлять к нему по 250 тыс. ед. пенициллина и 500 тыс. ед. стрептомицина. Антибиотики предохраняют возникновение воспалений у лошадей в месте введения антигена. Максимальный подъем антителообразования отмечается в первые 5—15 дней после окончания иммунизации (О. А. Безрученко с соавт., 1973).
Согласно производственному регламенту при иммунизации рекомендуется осуществлять в 1-м цикле 4 инъекции антигена. Как правило, при первом антигенном раздражении вводится 10—15, втором — 15—20, 3 и 4 — 20—25 млрд. клеток. Интервалы между 1-й, 2-й, и 3-й инъекциями состав ляют 7 дней, 3-й и 4-й — 14 дней. Спустя 5—6 дней после 4-го введения производят пробные (кровопускания и определяют титр сыворотки в реакции лимфоагглютинации и цитотоксическом тесте. При наличии титров 1:4000—1:8000 7—8-й день после последней инъекции проводятся цикловые кровопускания. Если титр ниже указанной величины, инъекции продолжают 1—2 раза в дозе по 15—20 млрд. клеток с интервалом в 7 дней. Лошади с титром антител в реакции лимфоагглютинации и в цитотоксическом тесте ниже 1:400 выбраковываются. Животным после каждого цикла эксплуатации предоставляется отдых 15—20 дней и проводится 1—2-кратная реиммунизация с кровопусканиями на 7-й день
Антилимфоцитарная сыворотка обладает строгой видовой специфичностью и реагирует только с лимфоцитами человека.
Лимфоцитарные агглютинины появляются на 10—11-12 день после иммунизации и связаны с 19 S-фракцией, на 25-й день основное количество агглютининов связано с 7 Э-фракцией глобулина. Наибольший уровень лимфоцитотоксинов приходится на 25—27-й день и сосредоточены также в 7 S-фракции (К. Games с соавт., 1970).
Наряду с антилимфоцитарными антителами в сыворотке иммунизированных животных обнаруживаются в высоких титрах антитела к эритроцитам человека, достигающие иногда до 1:2500—1:10240. Для их устранения сыворотки инактивируют при 56° в течение 30 минут и несколько раз адсорбируют на отмытых в физиологическом растворе эритроцитах всех групп крови человека. Прогретую и адсорбированную сыворотку подвергают фракционированию с целью получения щ препарата, содержащего иммунные гамма-глобулины. Установлено, что иммуносупрессивные свойства связаны с фракциями иммуноглобулинов IgG (К. Games, P. Medawar, 1967; N. Kashiwagi с соавт,, 1970; D. Long с соавт., 19691. Mckenzie с соавт., 1969; I. Iwasaki с соавт., 1967). 1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
50
51
52
53
54
55
56
57
58
59
60
61
62
63
64
65
66
67
68
69
70
71
72
73
74
75
76
77
78
79
80
81
82
83
84
85
86
87
88
89
90
91
92
93
94
95
96
97
98
99
100
101
102
103
104
105
106
107
108
109
110
111
112
113
114
115
116
117
118
119
120
121
122
123
124
125
126
127
128
129
130
131
132
133
134
135
136
137
138
139
140
141
142
143
144
145
146
147
148
149
150
151
152
153
154
155
156
157
158
159
160
161
162
163
164
165
166
167
168
169
170
171
172
173
174
175
176
177
178
179
180
181
182
183
184
185
186
187
188
189
190
191
192
193
194
195
196
197
198
199
200
201
202
|