|
||
|---|---|---|
|
|
Кровопускание
В практике сывороточного производства принято осуществлять цикловые кровопускания в период максимального нарастания титра специфических антител в крови гипериммунизированных животных. Как правило, пик антителообразования приходится на 5—11-е сутки после окончания антигенного раздражения. Учитывая указанное, некоторые специалисты сывороточного дела предпочитают производить цикловые кровопускания на 5—6-й день после введения антигена, другие — на 7—9-й и даже 10—11-й день. Согласно учению П. Ф. Здродовского (1950, 1963), процесс выработки антител носит волнообразный характер. Вслед за фазой максимального возбуждения всегда наступает фаза угнетения, на протяжении которой животные утрачивают способность к продукции антител под влиянием дополнительного антигенного раздражения. При этом на примере иммунизации животных анатоксинами совершенно четко показано, что после повторного введения антигена наступает состояние повышенной реактивности, которое соответствует 1 5-му дню. В дальнейшем оно сменяется торможением (рефрактерность), достигающим своего максимума на высоте волны возбуждения, соответствующей 10-му дню, когда титр антитоксина достигает своей вершины. В дальнейшем фаза заторможенности постепенно исчезает и к 60-му дню сменяется состоянием восстановленной реактивности. Эта закономерность подмечена рядом авторов при получении лечебных и профилактических гипериммунных сывороток. Так, отмечено, что при иммунизации животных-продуцентов противодифтерийной сыворотки средний титр антитоксина, получаемого на 5-й день, почти равен титру антител в сыворотке, взятой на 8-й день после окончания иммунизации (А. Д. Павловский и А. М. Максутов, 1895; Е. Ф. Гогин, Е. Г. Цуринова, 1933; М. Ф. Видинский, 1954; Н. А. Криулина, Ю. Б. Лукин, Л. И. Афанасьева, Н. Н. Левитов, 1959). Динамика нарастания антитоксина на фоне гипериммунизации лошадей дифтерийным анатоксином имеет несколько стадий. Введение антигена вызывает в первые 2—4 дня стойкое падение титра антитоксина, затем в течение следующих 2—4 дней их уровень устанавливается на одной высоте (стадия инкубации) и нарастает в последующие 2—3 дня (стадия медленного повышения титра). Далее наступает период быстрого повышения специфической активности сыворотки. При однократном введении дифтерийного токсина максимальное содержание антител приходится на 10-й день, вслед за этим наблюдается резкое падение титра. Многократные инъекции токсина приводят к максимальной выработке антител уже на 3—7-й день и стойкому падению активности сыворотки на 11-й день (С. Н. Предтеченский, П. П. Скопинцев, С. Н. Иоффе, 1934). Аналогичная закономерность в нарастании антител имеет место и при получении противостолбнячной (Е. Ф. Гогин, И. Е. Корчемкина, 1934; Ф. М. Кац, 1940; Ф. Т. Панин, 1958; Р. М. Слободской, 1959; Н. А. Криулина, Ю. Б. Лукин, Л. И. Афанасьева, Н. Н. Левитов, 1959), противоботулинической (Г. А. Королева, К- И. Матвеев, 3. М. Волкова, 1958; В. Б. Фрейман, И. М. Михайлова, В. А. Омарова, А. Р. Комиссарова, 1967) и ряда других сывороток, при которых цикловые крововзятия рекомендуется производить, как правило, на 7—10-й день. При эксплуатации лошадей с целью получения противогангренозной сыворотки Д. Д. Хаджидимова и И. Р. Гринеберг (1945) установили на фоне моновалентной иммунизации максимальное нарастание антитоксина на б-й, a pn бивалентной — на 5-й день. Цикловые кровопускания лошадей и других животных при изготовлении поливалентной противодизентерийной сыворотки целесообразно проводить на 7—11-й день, так как к 13-му дню агглютинационные титры и превентивные свойства сыворотки начинают снижаться (Л. С. Базилевская, С. Д. Элькин, И. Я. Сильд, 1960). Все вышесказанное в равной степени распространяется и на получение противовирусных сывороток. Так, при изготовлении противогриппозной сыворотки ряд авторов рекомендуют проводить кровопускания на 6—8-й день (Н. С. Целигорова, 1960; Н. Е. Алатырцева, Г. Г. Ахмадуллина, И. С. Нагирнер, Т. И. Крюченкова, Б. Д. Долгов, 1965), хотя допустимо производить крововзятие и на 9—11-й день (Е. И. Чернышева, Н. Г. Серебрянникова, О. А. Оплачко, 1969). При изготовлении антирабической сыворотки наиболее оптимальным временем забора крови является 10—12 дней с момента введения антигена (Л. И. Майорова, И. Е. Корчемкина и М. А. Селимов, 1962), сыворотки против полиомиелита — на 7—14-й день (О. Г. Анджапаридзе, Р. Г. Десятскова, 1959), а сыворотки против клещевого энцефалита — на 10—12-й день (О. Г. Анджапаридзе, 1968). Одним из нас (Ю. В. Федоров, 1965) в Томском институте вакцин и сывороток проведено изучение динамики накопления вируснейтрализующих и антигемагглютинирующих антител у лошадей, иммунизированных мозговой суспензией, содержащей вирус клещевого энцефалита. Период наблюдений охватывал дни от момента последней инъекции антигена до начала циклового кровопускания, которое обычно приходилось на 10-й день. Данное наблюдение выполнено на 15 продуцентах, находящихся в эксплуатации в продолжении 5—9 циклов (рис. 16). Оказалось, что содержание специфических антител находится почти на одном и том же уровне. Так, если на 10-й день титр вируснейтрализующих антител был равен (в показателе отрицательного логарифма 50%-ной летальности белых мышей) 3,3±0,09, а на 2, 4 и 7-й день он был в пределах 3,5 log, то второе кровопускание (12-й день) вызывало некоторое падение вируснейтрализующей активности сыворотки. Аналогичные результаты отмечались и в отношении уровня антигемагглютинирующих антител. Подобные же наблюдения (Ю. В. Федоров, Р. К. Локтионова, Н. Г. Турлянцева, 1967) были проведены на 6 лошадях-продуцентах сыворотки против клещевого энцефалита, иммунизированных вируссодержащим культуральным антигеном. Рассматривая полученные материалы, видно, что если напряженность вируснейтрализующих антител почти на всех этапах иммунизации находилась на одном уровне, то пик нарастания антигемагглютиминов и антител, связывающих комплемент, приходился на 5—8-й день с момента инъецирования антигена. Анализируя полученные данные, мы считаем целесообразным проводить производственные кровопускания лри получении сыворотки против клещевого энцефалита не на 10-й день после последней инъекции антигена, а на 6—8-й день. Таким образом, при получении гипериммунной сыворотки от животных-продуцеитов, иммунизированных различными антигенами, наиболее оптимальным временем для цикловых кровопусканий следует считать период от 6 до 12 дней после последнего антигенного раздражения, что соответствует периоду максимального нарастания антител в крови животных и полностью укладывается в закономерности иммуногенеза, разработанные П. Ф. Здродовским. 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189 190 191 192 193 194 195 196 197 198 199 200 201 202 |
|
|
|
||
