Замораживание и лиофилизация
Для лиофилизадии на коллекторной установке Харьковского НИИВС противогангренозные и противостолбнячные сыворотки разливали по 500—600 мл в колбы из стерла «Дюран» и замораживали обкатыванием вручную в спирте, охлаждаемом жидким кислородом до температуры —25 —30°, и затем через штуцера в пробках подсоединяли к коллектору (Г. П. Черкас и др., 1955). Данный способ высушивания трудоемок, небезопасен ввиду использования жидкого кислорода, а при последующем ссыпании сухой сыворотки из многочисленных колб в бутыли возможно микробное обсеменение препарата.
Некоторые недостатки вышеописанного метода были устранены М. Евстюговым-Бабаевым (1959), предложившим для лиофилизации разливать сыворотку по 4 л в специальные барабаны (бидоны) из нержавеющей стали. Для предварительного замораживания бидон вставлялся в ванну со смесью льда и соли и медленно вращался со скоростью 30—50 об/мин., сыворотка намораживалась на стенках в течение 10—15 минут. В качестве сублиматора был использован реконструированный автором вакуум-сушильный шкаф ВШ-0,035 М, выпускавшийся московским заводом «Платино- прибор». Шкаф соединялся с сухоледным конденсатором и вакуумным насосом.
В бидонах подобного типа, но значительно больших размеров, проводилась сушка в камерах ИЭМ-3 противогриппозной (Ф. Д. Усиков, 1958) и противогангренозной (Г. В. Дударенко и др., 1960) сывороток. Но изготовленные авторами бидоны были громоздки, а предварительное замораживание сывороток в них можно проводить лишь при наличии твердой углекислоты или жидких газов, что также ограничивало их применение.
А. В. Бейлинсон, Т. А. Витохина, Р. А. Шуфер (1960) сообщили о лиофилизации противогангренозных сывороток в аппарате СБОС, который позволял одновременно высушить до 20 л. Сыворотка намораживалась на стенках сублиматора, вращающегося со скоростью 10 об/мин. и охлаждаемого рассолом с температурой —37 —40°. Весь процесс лиофилизации длился 33—35 часов, сухой препарат ссыпался в контейнер с помощью специального устройства. Несмотря на положительные результаты, полученные авторами, этот способ не приобрел широкого распространения, так как аппарат указанной конструкции не выпускался серийно.
Своеобразную модификацию емкостей для сушки противогангренозных сывороток в камерах Lg-200 предложили
А. И. Борзунина с соавт., (1961). Ими сконструированы специальные противни, в каждый из которых заливалось 174 3—4 л сыворотки. Противни помещались по 4 в камеру. Несколько видоизмененные и приспособленные для камер ИЭМ-3 емкости использовали для сушки сывороток Л. М. Прилуцкая и М. А. Бычкова (1965). Достоинство этих и предыдущих емкостей в том, что предварительное замораживание препарата в них может проводиться в обычной морозильной камере, они легки и удобны в работе.
Основными требованиями при лиофилизации сывороточных препаратов являются: сохранение исходной специфической активности, обеспечение быстрой растворимости и стерильности. Последняя зависит в основном от оснащения технологического процесса.
Качество же высушенного препарата в значительной мере определяется температурой и скоростью предварительного замораживания, режимом лиофилизации, средой высушивания, остаточной влажностью, газовой средой в ампуле и температурой хранения.
Многие исследователи проводят предварительное замораживание сывороточных препаратов при возможно более низкой температуре (—30 -76°) во избежание концентрирования отдельных белковых фракций и замедленной растворимости их после сушки. 1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
50
51
52
53
54
55
56
57
58
59
60
61
62
63
64
65
66
67
68
69
70
71
72
73
74
75
76
77
78
79
80
81
82
83
84
85
86
87
88
89
90
91
92
93
94
95
96
97
98
99
100
101
102
103
104
105
106
107
108
109
110
111
112
113
114
115
116
117
118
119
120
121
122
123
124
125
126
127
128
129
130
131
132
133
134
135
136
137
138
139
140
141
142
143
144
145
146
147
148
149
150
151
152
153
154
155
156
157
158
159
160
161
162
163
164
165
166
167
168
169
170
171
172
173
174
175
176
177
178
179
180
181
182
183
184
185
186
187
188
189
190
191
192
193
194
195
196
197
198
199
200
201
202
|