|
Преципитирующие вирусные сыворотки
В последние годы ведутся исследования по получению преципитирующих вирусных сывороток для постановки реакции преципитации в агаре.
Практическое применение находит гипериммунная оспенная кроличья сыворотка в реакции микропреципитации в агаре, основанная на образовании в агаровом геле зон преципитации при взаимодействии оспенного антигена со специфической сывороткой. Реакция применяется для быстрой диагностики натуральной оспы или вакцинии. Этот метод впервые был предложен К- Dumbell, М. Nizamuddin (1959).
Его рекомендовали для широкого использования I. Sourek (1960), С. С. Маренникова, Н. Н. Мальцева (1961), С. Раniker, S. Кагеа (1962), С. С. Маренникова (1963), Н. В. Беляев (1970) и др.
Сыворотка для постановки реакции преципитации в агаровом геле была изготовлена К. Dumbell, М. Nizamuddin (1959). Несколько позднее С. С. Маренникова и Н. Н. Мальцева (1961) разработали схему и предложили в производство гипериммунизацию кроликов вирусвакциной, включающую вначале накожную аппликацию вируса и последующие внутривенные инъекции антигена (2—4) в уменьшающихся дозах с интервалом между введениями 5 дней. Кровопускание проводили через 7 дней после последней инъекции антигена.
Большие исследования по совершенствованию схем гипериммунизации кроликов с целью получения высокоактивных преципитирующих оспенных сывороток проведены в Томском институте вакцин и сывороток А. П. Степановой (1970, 1971, 1973). Испытание различных вариантов схем и методов введения, выполненные ею на значительном числе кроликов, показало, что наиболее оптимальной является нанесение антигена на скарифицированную кожу кролика в объеме 0,2—0,3 мл с последующей внутривенной иммунизацией в дозе 1, 6 мл за 2 инъекции (активность вируса не ниже 2—4X10 оопообразующих единиц в мл) с интервалом между инъекциями в 12 дней и кровопусканием на 8-й день после окончания иммунизации. Эта схема позволяет получать сыворотки с титром преципитинов в 1-м цикле 1:8±1,7, во 2-м — 1:17,3±1,8, в Знм — 1:14,5±1,1. Интенсивное образование лреципитинов отмечено А. П. Степановой (1973) и при однократном внутривенном введении вируса. Хороший эффект дает использование в качестве антигена штаммов Листеровского (Московский институт вирусных препаратов), Белорусского (Минский институт эпидемиологии и микробиологии), достаточными антигенными свойствами обладают штаммы Ташкентский и белый клон Московского института вирусных препаратов. Очистка и концентрация полученных сывороток методом Диаферм-3 и замораживанием позволяет получать их с более высокими специфическими свойствами.
Типоспецифические сыворотки для постановки реакции преципитации в агаре с вирусом полиомиелита получают путем гипериммунизации различных животных. С этой целью Е. Grasset с соавт (1958) использовали морских свинок и кроликов, N. Schmidt, Е. Lennet (1959) — кроликов, М. С. Балаян (1961) — обезьян макака резус весом 1,5—2 кг, кроликов весом 2—3 кг и цыплят в возрасте одной недели. 1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
50
51
52
53
54
55
56
57
58
59
60
61
62
63
64
65
66
67
68
69
70
71
72
73
74
75
76
77
78
79
80
81
82
83
84
85
86
87
88
89
90
91
92
93
94
95
96
97
98
99
100
101
102
103
104
105
106
107
108
109
110
111
112
113
114
115
116
117
118
119
120
121
122
123
124
125
126
127
128
129
130
131
132
133
134
135
136
137
138
139
140
141
142
143
144
145
146
147
148
149
150
151
152
153
154
155
156
157
158
159
160
161
162
163
164
165
166
167
168
169
170
171
172
173
174
175
176
177
178
179
180
181
182
183
184
185
186
187
188
189
190
191
192
193
194
195
196
197
198
199
200
201
202
|