Исследования в области особоопасных инфекций

Депротеинизация С-полисахаридного комплекса

С целью депротеинизации С-полисахаридного комплекса применяли различные кислоты, кипячение, спирт (W. Tillet,. Т Frencis, 1930; W. Golb с соавт., 1943; Н. С. Anderson, М. Me Carty, 1951; М. В. Далин, 1963). Б. Н. Грачев (1966) сравнил методы депротеинизации, применив с этой целью 0,5 N раствор соляной кислоты, 1 N раствор трихлоруксусной кислоты, ледяную и 1N раствор уксусной кислоты. Он считает, что лучще всего депротеинизацию вести уксусной кислотой при 4,0 pH среды, после чего доводить pH раствора до 7—7,2. В таком виде С-полисахарид сохранял способность осаждать острофазовый белок в течение 3 месяцев наблюдения.

Для выделения С-реактивного белка С. М. Mac Lead и О. Avery (1941) использовали метод фракционирования сернокислым аммонием. По их данным, С-реактивный белок полностью осаждался из разведенной в 2 раза сыворотки насыщением сернокислого аммония между 50 и 75%. Для его элективного выделения авторы применили С-полисахарид. Полисахаридный метод был использован также Т. Abernethy (1941), М. Me Carty (1947), Н. Wood с соавт. (1954), А. Ямпольским (1959), М. П. Пашининым (1961, 1962), Б. Н. Грачевым (1966) и другими. При осаждении С-реактивного белка М. Me Carty, О. Avery (1946) добавляли С-полисахарида из расчета 0,1—0,2 мгмл конечной его концентрации. По данным Б. Н. Грачева (1966), необходимо для осаждения использовать С-полисахарид в эквивалентном соотношении с C-реактивным белком, для чего в пред-варительном опыте выявлять эти соотношения. G. Zach, К. Zummerman (1959) применили для выделения С-реактивного белка бесполисахаридный метод, заключающийся в его сорбции из крови на сернокислом барии с последующей элюцией цитратом натрия. Б. Н. Грачев с соавт. (1966) использовали и другие методы выделения острофазового белка, как-то: сернокислым аммонием, опиртом на холоду, риванолом. Авторы указывают, что наибольший выход С-реактивного белка был получен бесполисахаридным методом при фракционировании сернокислым аммонием и спиртом, лучшая же очистка антигена достигается при фракционировании жидкости сернокислым аммонием с последующим применением соматического С-полисахарида пневмококков.

1  2  3  4  5  6  7  8  9  10  11  12  13  14  15  16  17  18  19  20  21  22  23  24  25  26  27  28  29  30  31  32  33  34  35  36  37  38  39  40  41  42  43  44  45  46  47  48  49  50  51  52  53  54  55  56  57  58  59  60  61  62  63  64  65  66  67  68  69  70  71  72  73  74  75  76  77  78  79  80  81  82  83  84  85  86  87  88  89  90  91  92  93  94  95  96  97  98  99  100  101  102  103  104  105  106  107  108  109  110  111  112  113  114  115  116  117  118  119  120  121  122  123  124  125  126  127  128  129  130  131  132  133  134  135  136  137  138  139  140  141  142  143  144  145  146  147  148  149  150  151  152  153  154  155  156  157  158  159  160  161  162  163  164  165  166  167  168  169  170  171  172  173  174  175  176  177  178  179  180  181  182  183  184  185  186  187  188  189  190  191  192  193  194  195  196  197  198  199  200  201  202