Исследования в области особоопасных инфекций

Получение анатоксина из токсина

Исследования ряда авторов показали, что у ботулинических бактерий обнаружены малоактивные предшественники токсина — протоксины, которые активируются под влиянием трипсина. Это работы P. Bonventre, L. Kempe (1960) в отношении типов А и В, G. Sakagucki, S. Sakagucki (1959), А. А. Воробьева, Н. Н. Васильева (1961), I. Gerwing, С. Dolman, А. Ко (1965) и др. — для типа Е, Holdem (1967) — для типа F.

Однако следует указать, что у активированного токсина при росте токсичности в 10—1000 раз (Т. И. Булатова, 1965) - антигенность не изменяется (А. А. Воробьев, Л. М. Самородов, И. В. Воронцов, 1959; Ф. А. Черткова, Н. С. Гродко». A. А. Ушакова, 1960; Т. И. Булатова, 1965).

Для перевода токсина в анатоксин М. Weinberg, P. Goy (1924, 1925) добавляли к фильтрату культуры Cl. botulinum 0,3—0,8% формалина и выдерживали смесь в термостате в течение 12—17 дней при температуре 37°. С. А. Зелевинская и 3. М. Волкова (1935) для приготов-ления анатоксина типов А и В прибавляли к токсинам 0,8% формалина и выдерживали их в термостате при 37° в течение 3 недель, а К. И. Матвеев и Г. Е. Фрумкина (1949) — 25—30 дней.

М. Елисуйский и С. Товаров (1941) предлагают ускоренный метод детоксикации ботулинических токсинов типов А и В путем добавления 1—1,5% формалина и выдерживания в термостате 5 дней при температуре 39,5° с последующим удалением излишков формалина аммиаком. Примененные такие анатоксины для гипериммунизации лошадей дали хороший результат. Наименьшие потери активности токсина типа F происходят при добавлении 0,4% формалина и обезвреживании при 37° 18—27 суток (В. П. Царапкин, 1972) или 0,5% формалина и обезвреживании в течение 9—10 суток (Е. В. Перова, 1970; B. П. Царапкин, 1972). И. М. Михайлова и В. К. Голшмид (1966) обезвреживали токсин типа F добавлением 0,2% формалина и выдерживании в термостате при 37° 8—9 суток.

В настоящее время для приготовления анатоксинов типов А, В, С к токсину добавляется 0,8% формалина, типа Е — 0,4% и выдерживают их в термостате при 37° в течение 21—25 дней (В. Б. Фрейман с соавт., 1966).

Помимо качественного антигена важное значение в получении противоботулинических сывороток имеют продуценты. Способность к продукции ботулинического антитоксина изучали у многих животных (лошади, крупный рогатый скот, овцы, бараны и др.). Для изготовления противоботулинической сыворотки в производственных масштабах в качестве продуцентов используются лошади.

На материале 138 лошадей С. А. Соловьевой в Томском институте вакцин и сывороток (1973) было показано, что при получении противоботулинической сыворотки типа Е пол животных не влияет на иммунологическую реактивность. При выявлении влияния, возраста продуцентов на эффективность их эксплуатации была выявлена реактивная зрелость 3—5-летних животных, которые оказались более рентабельными, чем лошади 6—9 лет. Г. А. Королева, К. И. Матвеев, 3. М. Волкова (1958), Г. А. Королева с соавт. (1959) при получении противоботулинических сывороток типов С и Е, а также бивалентных и поливалентных типов А, В, С, Е пользовались лошадьми степной башкирской породы в возрасте 3—5 лет. Предварительная иммунологическая подготовка животных оказывает существенное влияние на эффективность эксплуатации. С этой целью К. И. Матвеев, Г. Е. Фрумкина (1949) при подготовке лошадей под типы А и В применили двухкратное группирование с интервалом в 3 недели между грундми и началом 1-го цикла. В первую инъекцию лошадь получала 25 мл смеси (5 мл анатоксина, 15 мл ланолина, 5 мл подсолнечного масла), во вторую — 50 мл (количество каждого компонента удваивалось). Позднее Г. А. Королева, К. И. Матвеев, 3. М. Волкова (1958), Г. А. Королева с соавт. (1959) пользовались для подготовки концентрированным анатоксином в Дозе 5 и 10 мл, эмульгированным в ланолине или адсорбированным на гидрате окиси алюминия. Интервалы между первой и второй инъекциями были увеличены и составляли 20—30 дней, между вторым группированием и началом гипериммунизации — 30 дней.

1  2  3  4  5  6  7  8  9  10  11  12  13  14  15  16  17  18  19  20  21  22  23  24  25  26  27  28  29  30  31  32  33  34  35  36  37  38  39  40  41  42  43  44  45  46  47  48  49  50  51  52  53  54  55  56  57  58  59  60  61  62  63  64  65  66  67  68  69  70  71  72  73  74  75  76  77  78  79  80  81  82  83  84  85  86  87  88  89  90  91  92  93  94  95  96  97  98  99  100  101  102  103  104  105  106  107  108  109  110  111  112  113  114  115  116  117  118  119  120  121  122  123  124  125  126  127  128  129  130  131  132  133  134  135  136  137  138  139  140  141  142  143  144  145  146  147  148  149  150  151  152  153  154  155  156  157  158  159  160  161  162  163  164  165  166  167  168  169  170  171  172  173  174  175  176  177  178  179  180  181  182  183  184  185  186  187  188  189  190  191  192  193  194  195  196  197  198  199  200  201  202