Исследования в области особоопасных инфекций

Добавление сахаров при получении токсинов Cl. botulinum

Большое значение в получении токсинов придается углеводам. В одних случаях добавление углеводов к среде увеличивает токсинообразование, но не влияет на интенсивность роста микробов, как отмечает И. Упикап (1962, 1963), для типа А, в других — добавление сахаров обеспечивает не только токсинообразование, но и размножение возбудителя, как указывает Е. В. Перова (1970), для типа F.

Обладая широким диапазоном сахаролитической активности, Cl. botulinum типов А и В ферментируют глюкозу, левулезу, фруктозу, мальтозу, декстрин, салицин, глицерин адонит и иррозит. Некоторые штаммы типа В салицин не ферментируют (К. И. Матвеев, 1959). F. Wagner с соавт (1923), К. Levis, Е. Hill (1947) показали, что токсинообразование Cl. botulinum типов А и В при добавлении к среде глюкозы усиливается. Г. Е. Синельников и Л. Г. Щипкова (1974) изучили действие сахаров на токсинообразование Cl. botulinum типа А. Из исследуемых сахаров и их сочетаний (15 вариантов) наилучшее токсинообразование было от 1% глюкозы, 1% мальтозы, а также их совместного добавления и от их сочетания с 0,6% крахмала.

При культивировании Cl. botulinum Е добавляют в бульон 0,5% глюкозы (A. Barron, G. Reed, 1954; А. А. Воробьев с соавт., 1962; М. И. Тарков, 1963; Л. Г. Иванова, Т. И. Сергеева, 1963; Е. Райчева и Н. Марчев, 1966 и др.). Эффект от действия ее в 1%-ной концентрации, по данным Ё. Д. Кушнир (1952), зависит от pH среды: при pH, близкой к нейтральной, она стимулирует токсинообразование Cl. botulinum типа Е, при кислой реакции — тормозит. Cl. botulinum ти па Е способен ферментировать не только глюкозу. Он обладает мощными сахаролитическими свойствами и разлагает с образованием газа декстрозу, левулезу, сахарозу, мальтозу, адонит, сорбит, инозит, глицерин, салицин, декстрин (Е. Наzen, 1937, 1942; Т. А. Завадовская, 1940; С. Dolman, D. Кеег, 1947).

Е. Н. Воробьева (1969), Г. С. Атаманова и Е. Н. Воробьева (1969), Ю. А. Шаронов и Р. А. Афанасьева (1969) и др. использовали в производстве ботулинического токсина типа Е сочетание 0,5% глюкозы и 0,5% мальтозы.

По данным В. И. Чернявского (1970), О. И. Зимина, С. Я. Исаева, В. И. Чернявского (1972), лучшее токсинообразование Cl. botulinum типа Е наблюдается при добавлении к питательной среде 3% декстрина, приготовленного по методу кислотного гидролизата крахмала.

Из 15 различных сочетаний углеводов, вводимых в бульон Мартена, лучшее токсинообразование Cl. botulinum типа Е было при добавлении 0,5% глюкозы с 0,6% крахмала (С. А. Соловьева, 1973).

На интенсивность токсинообразования в какой-то мере оказывает влияние количество посевного материала (D. Ohye, W. Scott, 1953).

В практике получения ботулинических токсинов многие авторы использовали различный процент посевного материала. Так, К. Levies, Е. Hill (1947) для получения ботулинического токсина типа А проводили посев 2%-ной взвесью свежей культуры. Они отметили, что небольшое количество материала и слабое помешивание задерживали образование токсина.

Н. Марчев (1967) использовал 0,5% посевной освеженной культуры Cl. botulinum типа Е. Такое же количество ее для этого типа применяли Л. Г. Иванова и Т. И. Сергеева (1964).

B. Gullmar, N. Molin (1967) указывают, что количество посевного материала на синтетическую среду следует брать в 10 раз. больше, чем на мясную. В. И. Чернявский (1972) полусинтетические среды засевал 0,4—0,5% Cl. botulinum типа Е. Однако в Томском институте вакцин и сывороток C. А. Соловьевой, Г. Е. Синельниковым, С. А. Нестеровой, С. М. Прегер, Т. В. Майоровой, Г. Н. Майоровой (1972), Г. Е. Синельниковым (1972) было показано, что количество посевного материала в пределах от 0,1 до 5% к объему среды не влияет на интенсивность токсинообразования.

Определенное значение в получении токсинов имеет метод культивирования. При росте возбудителя ботулизма различных типов в целлофановых мешках, помещенных в питательную среду, наблюдается значительное увеличение активности токсина. Приготовленные таким образом токсины отличаются не только высокой концентрацией, но и значительной степенью очистки (A. Poison, М. Sterne, 1946; М. Sterne, L. Wentzel, 1950; Ю. 3. Гендон, 1957; A. Barron, G. Reed, 1954; Н. Meisel с соавт., 1964; А. А. Омарова, 1968; С. А. Соловьева, 1973). Вместе с тем следует указать, что в качестве антигена для гипериммунизации лошадей такие токсины пока не нашли применения.

1  2  3  4  5  6  7  8  9  10  11  12  13  14  15  16  17  18  19  20  21  22  23  24  25  26  27  28  29  30  31  32  33  34  35  36  37  38  39  40  41  42  43  44  45  46  47  48  49  50  51  52  53  54  55  56  57  58  59  60  61  62  63  64  65  66  67  68  69  70  71  72  73  74  75  76  77  78  79  80  81  82  83  84  85  86  87  88  89  90  91  92  93  94  95  96  97  98  99  100  101  102  103  104  105  106  107  108  109  110  111  112  113  114  115  116  117  118  119  120  121  122  123  124  125  126  127  128  129  130  131  132  133  134  135  136  137  138  139  140  141  142  143  144  145  146  147  148  149  150  151  152  153  154  155  156  157  158  159  160  161  162  163  164  165  166  167  168  169  170  171  172  173  174  175  176  177  178  179  180  181  182  183  184  185  186  187  188  189  190  191  192  193  194  195  196  197  198  199  200  201  202