Исследования в области особоопасных инфекций

Интенсивность образования нейтрализующих антител

Интенсивность образования нейтрализующих антител зависит от способа введения антигена в организм. Наиболее распространенными методами являются внутримышечный, подкожный, внутривенный. Описано получение диагностических сывороток на мелких лабораторных животных и при внутрибрюшинном и других способах.

С целью получения нейтрализующих антител используется метод многократного введения антигена.

Так, специфическая вируснейтрализующая гипериммунная сыворотка против полиомиелита была приготовлена путем многократной иммунизации обезьян, кроликов, ослов, коз, лошадей вирусом полиомиелита, выращенным в культуре ткани (S. Levinson с соавт., 1954; G. Mountain, 1953; H. М. Ральф с соавт., 1957; О. Г. Анджапаридзе, Р. Г. Десятскова, 1959). Наиболее высокие титры сывороток наблюдались при гипериммунизации обезьян и кроликов (Н. М. Ральф с соавт., 1957). Рекомендуется использовать антигены, содержащие живые и убитые .вирусы (S. Levinson с соавт., 1954), а также аттенуированные вакцинные штаммы Сэбина (Н. А. Граевская с соавт., 1961). Последние авторы при изучении эффективности различных способов введения антигенов и схем гипериммунизации кроликов пришли к выводу, что наиболее экономичной является схема, включающая внутримышечную грундиммуиизацию с использованием адъюванта и в дальнейшем внутривенные инъекции вируса.

При получении иммунных сывороток к арбовируеам рекомендуются схемы, разработанные G. Casals (1947, 1949), D. Clarke, G. Casals (1958). Белым мышам 5—6-недельного возраста вводят внутрибрюшинно по 0,2 мл свежеприготовленной 10%-ной суспензии инфицированного мозга мышей-сосунков четырехкратно с интервалом в 7 дней. Кровь берут через 7 дней после последней инъекции антигена. Если агент патогенный, первые 2 инъекции делают инактивированным вирусом.

А. К. Шубладзе и С. Я. Гайдамович (1954) рекомендуют для получения нейтрализующих сывороток к вирусам клещевого и японского энцефалитов осуществлять семикратные внутрибрюшинные инъекции 10%-ной суспензии мозга инфицированных -белых мышей кроликам с интервалом в 7—8 дней, а кровопускания проводить на 10-й день после окончания иммунизации.

Для постановки реакции нейтрализации с целью лабораторной диагностики аденовирусных заболеваний используется типоспецифическая гипериммунная кроличья сыворотка. Р. С. Дрейзин (1965) сообщила о получении сыворотки с титрами нейтрализующих антител от 1:64 до 1:256 при гипериммунизации кроликов вирусом, выращенным на культуре клеток HeLa и FL, или КВ при внутривенных шестикратных инъекциях с интервалами в 3 дня различных доз вируса с титром 103—105 ТЦД/мл, а также при комбинированной (внутривенно и внутрибрюшинно) гипериммунизации.

Для приготовления иммунных сывороток к вирусу бешенства лучше использовать хомяков (самцов в возрасте 6—8 недель) или морских Свинок (N. Stanlegecons, 1953). Животных иммунизируют инактивированной мозговой тканью внутрибрюшинно четырехкратно с 7-дневными интервалами. Антиген применяется в смеси с Arlacel и 8,5 частей минерального масла. На 10—14-й день вводят внутрибрюшинно 1,0 мл 10%-ной вируссодержащей суспензии и на 10—14-й день берут кровь.

Таким образом, для получения специфических вируснейтрализующих сывороток используются различные схемы и способы введения антигенов. Принципиально важным в изготовлении указанных сывороточных диагностических препаратов является обязательный прогрев полученных сывороток с целью инактивации неспецифических термолабильных ингибиторов (Р. Н. Лукина, 1965). Температура прогрева зависит от вида используемых сывороток. Сыворотки обезьян, морских свинок и лошадей инактивируют при 56°, кроликов и белых крыс — при 60°, петухов — при 57°, а сыворотки к вирусам СА и лихорадки Денге из-за термолабильности антител прогреву не подлежат.

1  2  3  4  5  6  7  8  9  10  11  12  13  14  15  16  17  18  19  20  21  22  23  24  25  26  27  28  29  30  31  32  33  34  35  36  37  38  39  40  41  42  43  44  45  46  47  48  49  50  51  52  53  54  55  56  57  58  59  60  61  62  63  64  65  66  67  68  69  70  71  72  73  74  75  76  77  78  79  80  81  82  83  84  85  86  87  88  89  90  91  92  93  94  95  96  97  98  99  100  101  102  103  104  105  106  107  108  109  110  111  112  113  114  115  116  117  118  119  120  121  122  123  124  125  126  127  128  129  130  131  132  133  134  135  136  137  138  139  140  141  142  143  144  145  146  147  148  149  150  151  152  153  154  155  156  157  158  159  160  161  162  163  164  165  166  167  168  169  170  171  172  173  174  175  176  177  178  179  180  181  182  183  184  185  186  187  188  189  190  191  192  193  194  195  196  197  198  199  200  201  202