Стабильность признака токсигенности
В процессе конверсии фаг tox+ инфицирует вначале только часть клеток популяции; тем не менее в конечном счете она вся становится токсигенной. Нативные, полученные непосредственно из токсигенных штаммов фаги tox+ нередко имеют примесь неконвертирующих вирусов — следствие полилизогенности штаммов (И. В. Чистякова, 1972, и др.). Так, Hewitt (1954), инфицируя нетоксигенный штамм С. diphtheriae var. gravis нативным фагом Н 874, показал, что не все его частицы обладают конвертирующей активностью, причем фаги с геном tox+ были в этой смеси в меньшинстве.
Нетоксигенная культура, к которой добавлены конвертирующий и неконвертирующий фаги, вначале состоит из токсигенных и нетоксигенных клеток. Нетоксигенные клетки постепенно исчезают (лизируются или лизогенизируются, превращаясь в токсигенные).
Присутствие в культуре не содержащих ген tox+ вирусов может препятствовать феномену конверсии, даже если они не родственны конвертирующим (И. В. Чистякова, 1971; М. Д. Крылова, 1972).
Конвертирующие фаги можно инактивировать также специфической антифаговой сывороткой, в результе чего конвертируемая культура не приобретает ток- сигенности. Anderson и Cowles (1958) обнаруживали нелизогенные нетоксигенные клетки после пассажей токсигенной культуры (конвертанта) через кроличью сыворотку, содержащую антитела к фагу tox+.
В этих опытах нельзя исключить наличие в популяции клеток, в которых геном профагов tox+ не был интегрирован с хромосомой и по этой причине мог быть утрачен при их размножении на средах с антифаговой сывороткой. В этом случае даже пассаж на обычных питательных средах в конечном счете может приводить к «исцелению» токсигенной популяции конвертантов от вирусов tox+, к «выщеплению» нетоксигенных клонов. Так, при пассаже на 0,2% мартеновском агаре при комнатной температуре на протяжении 5 лет с многократными пересевами из 31 конвертанта С. diphtheriae варианта gravis (фаговариантов ABCDFGH и других) 5 штаммов утратили токсигенность (М. Д. Крылова, 1972). Mouton (I960) добился отщепления нетоксигенных вариантов от токсигенных, используя твин-80 в концентрации, препятствовавшей адсорбции фага клетками.
Наибольшую частоту элиминации профага из токсигенных конвертантов, сопровождающейся утратой токсигенности, удается получить при действии некоторых акридиновых красителей. Так, в опытах Л. С. Наумова (1967) токсигенный лизогенный конвертант штамма № 1180 после обработки акридиновым оранжевым стал нетоксигенным и нелизогенным по фагу tox+. Rajadhyaksha и Rao (1965) элиминировали профаг tox+ из токсигенных конвертантов акрифлавином.
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
50
51
52
53
54
55
56
|