Исследования в области особоопасных инфекций

Культуральные варианты

Таблица 1. Отличительные особенности С. diphtheriae var. gravis, intermedius, mitis (Bergey, 1974)

Начало микробиологической диагностике дифтерии положили исследования Conradi и Troch (1912), предложивших для выделения чистых культур С. diphtheriae полуселективные среды с теллуритом натрия или калия. Впоследствии выяснилось, что теллуриты способны диффундировать внутрь клетки через ее стенку; процесс восстановления этих солей до металла идет внутриклеточно, а кристаллы теллура способны накапливаться в клетках. В 30—40-х годах в разных странах было предложено немало кровяно-теллуритовых сред. Наибольшего внимания заслуживают среды Clauberg (1931) с 14% гемолизированной кровью и 0,04% теллурита калия, среда McLeod, так называемый шоколадно-теллуритовый агар, содержащий 10% дефибринированной крови и 0,04% теллурита калия (Anderson е. а., 1931), а также среда Tinsdale (1947) с 0,03% теллурита калия, 0,024% цистина, 15% нормальной лошадиной сыворотки. На этих средах цистиназа С. diphtheriae восстанавливает металлический теллур, что придает колониям черный или темно-коричневый цвет.

Используя кровяно-теллуритовые среды, Anderson и соавт. (1931) описали 3 культуральных варианта С: diphtheriae, отличавшихся между собой прежде все го морфологией колоний: gravis intermedius, mitis.

Дифференциально-диагностические признаки этйх вариантов по «Определителю бактерий» Bergey (1974) представлены в табл. 1.

В 1945 г. Frobischer и соавт. описали, вариант minimus, близкий к варианту mitis. Штаммы варианта minimus на цистин-теллуритовом агарё или агаре Мак-Леода через 48 ч давали чрезвычайно мелкие, едва видимые невооруженным глазом, совершенно черные непрозрачные или с черным центром гладкие колонии, с гладкими, как у штаммов варианта mitis, или шероховатыми, как у штаммов варианта gravis краями. На бульоне эти штаммы росли очень слабо, не сбраживали гликоген и крахмал, глюкозу сбраживали непостоянно. Такие штаммы встречались среди токсигенных и нетоксигенных культур. М. Rogosa с соавт» (1974) вариант minimus отнесли к типу intermedius.

При определении культурального варианта штаммов по классификации Anderson и соавт. (1931) большинство исследователей исходили главным образом из вида колоний на кровяно-теллуритовых средах, характера роста на бульоне и способности ферментировать крахмал.

Необходимо отметить также, что в ряде исследований сведений о вирулентности (или токсигенности) штаммов нет. В связи с тем, что подавляющее большинство работ проведено в 30—40-х годах, когда заболеваемость дифтерией была еще достаточно высока и штаммы выделяли преимущественно от больных и контактных носителей, можно предполагать, что и в этих работах речь идет почти исключительно о признаках токсигенных С. diphtheriae.

Почти все исследователи сходятся во мнении, что через 24—48 ч после посева на кровяно-теллуритовый агар по морфологии колоний можно предварительно дифференцировать культуральные варианты С. diphtheriae. Наиболее четко различия видны на среде Клауберга II с гемолизированной кровью и теллуритом калия. На этой среде штаммы варианта gravis дают крупные (до 2—3 мм в диаметре) матово-черные или аспидно-серые колонии с приподнятым центром и зазубренными краями. Штаммы варианта mitis растут в виде гладких, блестящих серых с темным центром колоний, несколько ко мельче колоний варианта gravis, более выпуклых, а главное, с ровными краями.

1   2   3   4   5   6   7   8   9   10   11   12   13   14   15   16   17   18   19   20   21   22   23   24   25   26   27   28   29   30   31   32   33   34   35   36   37   38   39   40   41   42   43   44   45   46   47   48   49   50   51   52   53   54   55   56