|
Преципитация сывороток
X. М. Дамкас (1960) и др. считают, что с токсином связана зона, наиболее отдаленная от фильтровальной бумаги, остальные линии будут — «ложными». Ouchterlony (1949) находил до 4 «ложных» линий преципитации, X. М. Дамкас (1960) — до 6, King с соавт. (1950) — от 4 до 16. «Ложные» линии связывают с наличием в антитоксических сыворотках антител к компонентам бактерийной клетки. Надо учитывать, что хотя продуцент токсина штамм PW-8 серологически обособлен от многих распространенных штаммов С. diphtheriae, у него были антигены, общие с другими штаммами (Л. М. Филиппова и др., 1969).
«Ложные» линии преципитации могут быть связаны также с присутствием в сыворотке антител к нейраминидазе, внеклеточным ДНК-азам, которые продуцируют как токсигенные, так и нетоксигенные штаммы (М. Д. Крылова, 1972; Morijama, Barksdale, 1967, и др.). Получить антитоксическую сыворотку без таких антител сложно, так как токсин чрезвычайно трудно отделить от нейраминидазы и ДНК-аз даже на колонках с сефадексом.
Необходимость дифференциации различных линий преципитации в агаровом слое усложняет использование чашечного метода определения токсигенности в широкой практике (X. М. Дамакае, 1960, и др.). С этим связаны попытки создания «однозональных» сывороток. Их готовят путем адсорбции антител в обычной продажной сыворотке белками и фракциями нетоксигенных штаммов или гипериммунизацией животных анатоксином, полученным из кристаллического токсина.
При использовании однозональных сывороток любая зона преципитации должна свидетельствовать о присутствии токсина в антигенном комплексе, продуцируемом испытуемым штаммом. Однако некоторые однозональные сыворотки дают несколько линий преципитации. В сыворотке Пражского института вакцин и сывороток добавочные линии были обусловлены преципитацией антитоксином фрагментов молекулы токсина разрушенной протеолитическими ферментами среды (Libich, 1964).
Однозональные сыворотки были получены в Пермском институте вакцин и сывороток. В Харьковском институте вакцин и сывороток А. И. Педенко и соавт. (1967) для очистки противодифтерийной сыворотки применили метод спиртового осаждения на холоде, получив гамма-глобулин, который рекомендовали в практику как однозональный.
При специфической токсигенности принадлежность коринебактерии к виду С. diphtheriae не вызывает сомнения. На практике у таких штаммов изучают способность сбраживать (или не сбраживать) сахарозу, крахмал и глюкозу (для этого используют среды Гисса с 1 % пептонной водой), продукцию цистиназы (на среде Пизу с цистином и ацетатом свинца), продукцию уреазы, вид колоний на кровяно-теллуритовых средах, характер роста на мартеновском бульоне, морфологию мазков с кровяного агара, серологический вариант. Совокупность этих признаков позволяет отнести токсигенные С. diphtheriae к культуральным вариантам gravis, intermedius и mitis.
Дифференциация нетоксигенных коринебактерий дифтерий от других коринебактерий, обитающих в носоглотке человека, встречает серьезные затруднения и более подробно будет освещена далее.
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
50
51
52
53
54
55
56
|