Исследования в области особоопасных инфекций

Устойчивость коринефагов к действию физико-химических факторов

Устойчивость коринефагов к действию физико-химических факторов невелика. Коринефаги термолабильны: прогревание до 56°С уже через 6 мин. наполовину снижало активность фагов В и β tox+ (Barksdale, Pappenheimer, 1954).

Фаги быстро инактивируются на свету (В. В. Поспелова,; 1958). Но даже при хранении в рефрижераторе их стойкость невысока. В частности, в этих условиях фаг В в течение месяца снижает свой титр в 1000—10 000 раз (Groman, 1953; Groman,. Lockart, 1953),

Снижение активности фагов при хранении связывают с уменьшением щелочности фильтратов с 7,8 до 7,2. Некоторую устойчивость ори хранении фагам может сообщить буфер щелочной реакции (pH 7,6—8,4) (В. В. Поспелова, 1958; Groman, Lockart, 1953, и др.).

По наблюдениям Groman и Lockart (1953), коринефаги сравнительно быстро инактивировались в фосфатном буфере, содержащем 0,1 или 0,01 М фосфата (pH 7,4) и были более устойчивы в буфере, содержащем 0,001 М фосфата. Это явление можно объяснить тем, что фосфатные ионы способны тормозить адсорбцию коринефагов на клетке (Barksdale, Pappenheimer, 1954).

Коринефаги быстро инактивируются при разведении в физиологическом растворе (Groman, Lockart, 1953), в кислом бульоне (pH 5,6—5,7) (В. В. Поспелова, 1958), при действии мочевины (И. М. Габрилович, 1964), эмбихина, ультрафиолетовых лучей (В. В. Поспелова, 1958).

Вместе с тем отмечено, что коринефаги обладают высокой устойчивостью к хлороформу (В. В. Поспелова, 1958; Крылова, 1970; Thibaut, Fredericq, 1952; Saragea, Maximesco, 1964, и др.).

При взаимодействии с микробной клеткой коринефаги слабо активны. Это проявляется малой скоростью адсорбции и большой длительностью латентного периода, низким средним урожаем. Процесс взаимодействия коринефагов и бактерий довольно хорошо изучен на модели фага β tox+, его мутантов и конвертируемых нетоксигенных штаммов С. diphtheriae var. mitis С4 (№ 444), С7 (No. 770).

Константа скорости адсорбции для фага tox+ составляла 2,5*10-10 мл/мин (Groman, Lockart, 1953). Фаги В. В. Поспеловой (1958) имели константы скорости адсорбции от 1,1 до 3,9*10-10 мл/мин.

Природа рецепторов дифтерийных фагов и месторасположение их на оболочке бактерий еще точно не известны. Возможно, что рецептором для фагов В могут быть липидосодержащие t молекулы, жирные кислоты. Так, Kerszman (1966) наблюдал торможение адсорбции фагов липидными субстанциями штамма С7, отсутствие антифаговой активности в нелипидных субстанциях, равно как и в делипидированных коринебактериях дифтерии. Адсорбцию фагов на дифтерийных бактериях могут тормозить олеиновые кислоты (Groman, McCormick, 1961), цитратные и фосфатные ионы (В. В. Поспелова, 1958; Barksdale, Pappenheimer, 1954).

В связи с длительной фазой генерации С. diphtheriae латентный период у коринефагов длителен. Так, у фага β tox+ по данным Barksdale и Pappenheimer (1954), он равен 86 мин, по данным Groman и Lockart (1953) — 60—65 мин. По длительности латентного периода коринефаги близки к микофагам (Д. М. Гольдфарб, 1961).

При столь длительном латентном периоде урожай коринефагов невысок. Если у колидизентерийного фага Т5, например,, урожай достигает 350—400 частиц на клетку, то у дифтерийного фага В, который также считается вирулентным, урожай всего 54 частицы (Groman, Lockart, 1953), 30 частиц (Barksdale, Pappenheimer, 1954). У умеренного фага β1 tox+, по данным тех же авторов, урожай всего 24 частицы, у фагов В. В. Поспеловой (1958) 10—15 частиц. Столь значительные различия в урожайности коринефагов могут отражать погрешности в методике; ее нестандартность, а порой и непреодоленные методические трудности.

Длительный латентный период в совокупности с относительно низкой урожайностью обусловливает невысокие титры умеренных и даже вирулентных коринефагов. Титры типовых фагов Rische и Endenmann (1962) были около 5*107 — 5*109 частиц/мл при I ТР, равном 10-4, титр фага В — 108 - 109 частиц/мл (Groman, Lockart, 1953), умеренных фагов И. М. Габриловича (1964) — 2,05*104 — 1,74*106 частиц/мл.

Matsuda и Barksdale (1967, 1968) получили вирулентную линию конвертирующего фага β tox+ — фаг βhv 64 tox+, урожай которого достигал 2,0*1011 частиц/мл. Но такие фаги — редкость.

1   2   3   4   5   6   7   8   9   10   11   12   13   14   15   16   17   18   19   20   21   22   23   24   25   26   27   28   29   30   31   32   33   34   35   36   37   38   39   40   41   42   43   44   45   46   47   48   49   50   51   52   53   54   55   56